-Ä^IX "'l«^ ^i^ 5 f ' * < xw. -■W ^ > '^.* t '^ t:'*" ' K ^.»i <*HU ZEITSCHRIFT FÜR WISSENSCHAFTLICHE MIKROSKOPIE UND FÜR MIKROSKOPISCHE TECHNIK BEGRÜNDET A'ON W. J. BEHRENS Unter beäouderer Mitwirkung Prof. Dr. Paul Schieflferdecker, Prof. Dr. E. Sommerfeldt m Bonn in Ttibingen und Prof. Dr. W. Gebliardt in Halle a. S. herausgegeben von Prof. Dr. ERNST KUSTEB in Kiel Band XX VI (Jahrgang 1909) Mit 66 Textabbildungen und 5 Tafeln LEIPZIG Verlag- von S. Hirzel 1909 Alle Rechte vorbehalten. 2 ^ ^' I n h a 1 1 s Y e r z e i c h n i s. I. Abhandlungen, Seite Ariens Kappers, C. U., Beschreibung eines automatischen Alkohol- tropfers für das Jungsche Schlittenmikrotom 25G Berg, W., Eine einfache Methode zur Paraffineinbettung im \'akuum 209 Berliner, K., Über ein verbessertes Gehirnmikrotom 378 — , — , Methode zur Zerlegung des in Müllerscher Flüssigkeit ge- härteten Gehirns in dünne Scheiben 382 Bödeeker, C. Fr., Fleischmanns Kritik meiner Celloidin-Entkalkungs- methode 20G Boeke, J., Über ein verbessertes „Rocking- Microtome" 242 Bonvicini, G., Zur Technik der mikroskopischen Schnitte durch beide Gehirnhemispliären 410 Bruduy, V.. Ein neuer Heißwassertrichter 418 Carazzi, D., Zur Bleichtechnik 526 — . — , Über die Abkühlung des Paraffins 530 — . — . Über das Aufkleben der Celloi'dinschnitte 533 Cavazza, L. E., Studi microchimici e fisiologici sui tannini .... 59 Fimck, Ch., A propos de la deshj^dratation des coupes montees sur lames porte-objet 422 Halle, B., Über die Methoden der Härtemessung 424 Hansen, Fr. C. C. , Gelbgrünes einfarbiges Licht durch Yorschalten von Lichtfiltern vor der Qnecksilberlampe für mikroskopische Zwecke 525 Ignatowsky, W. v., Einige Neuerungen am Leitzschen Spiegel- kondensor 387 Kittsteiner, C, Untersuchung über die Einwirkung des denaturierten Alkohols auf tierische Organe und seine Verwendbarkeit in der mikroskopischen Technik 191 Kowler, R., Einfache Wässerungsvorrichtung für fixierte Objekte . 259 Krause, R., Die Herstellung von transparenter roter Leirainjektions- masse 1 Lebruu, H., La Methode rotative en Microscopie 223 Lendvai, J., Apparat zum Schleifen des Mikrotommessers .... 203 Levy, 0., Entwicklungsmechanische Technik im letzten Dezennium . 42G IV Inhultsverzeiclinis. Seile Martiu, I*., Verwendung des P^ding-erschen Zeichen- und Trojektions- apparates zur makroskopischen Photographie 219 Martinotti, L., Sulla tecnica della diraostrazione delle cellule eosinofile 4 Maxiniow, A., Über zweckuiäßige Methoden für cytologische und histogenetisclie Untersuchungen am Wirbeltierembryo , mit spezieller Berücksichtigung der Celloidinschnittserien . . . 177 Mayer, P., Zur Färbung des Glykogens 513 — , — , Über ein neues Intermedium 52o Meyer, A., Der Suchtisch II (Perquirator) SO Mozejko, B., Courte notice sur l'injection de quelques mollusques acephales o5o — , — , Sur l'injection tardive du Systeme circulatoire 542 Pöschl, V., Eine neue Methode der Härtemessung ....... 104 Radasch, H. E., Einige Modelle zur Darstellung der Mitose . . . HG Rawitz, B., Neue Methoden zur Untersuchung des Zentralnerven- systems der Vertebraten .'!.-;7 Savini, E., u. Savini-Castano, Th., Zur Technik der Elastika- und Bindegewebsfärbung :;;< Scheffer, W. , tlber eine Spiegel -Reflex- Camera für mikrophoto- graphische Aufnahmen 111 Siedentopf, H., Über ultramikroskopische Abbildung .391 Somnierhoff, E. O., Die Färbung der Pikrinsäure auf Seide. Eine Erscheinung der Osmose, wobei die Haut des Seidenfadens als tierische Membran wirkt 48 Ssobolew, L. W., Theorie und Praxis des Schleifens 65 Suzuki, B, , Eine einfache Entwässerungs-, Härtungs- und zugleich Auswuschungsvorrichtung für mikrotechnische Zwecke . . . 211 Tafner, H., Das Zeiclinen auf einer durchsichtigen Zeichenfläche . . 384 Tobler , Fr, , Fehlergröße einiger Fixierungsmethoden und Quellung einer Algenmembran ■ . . . 51 Wolff, M. , Über ein neues kleines Minot- Mikrotom, das noch für feinste histologische und embrj^ologische Arbeiten ausreicht, und über einen Mikroskopiertisch s4 II. Referate. Alagna, Gr., Über einige eigenartige Zellen in der Gaumentonsille eines Hundes und über ihre wahrscheinliche Bedeutung . . 135 Amato, A., Die Ganglienzelle bei der Insolation 48i> Andreesen, A., Beiträge zur Kenntnis der Desmidiaceen 316 Asher, L., Die Anwendung der physikalisch-chemischen Methoden in der Physiologie 119 Aßmann, G., Über eine neue Kontrastfärbung zur Darstellung intra- zellulärer Tuberkelbazillen im Auswurfe 310 Inhaltsverzeichnis. V Seite Awerinzew, S., Über ein parasitisches Infusor aus dem Dann von Ophelia liniacina (Ratiikkj 129 Axhausen, G., Über die bei der Luft- und Gasfüllung- des Knochen- g'ewebes auftretenden Phänomene und ihre Deutung-, insbeson- dere über die sogenannten „Gitterfiguren'- 482 liabes et Feodorasco , Sur deux microbes intermediaires entre le paratyphique B et le bacille typhicjue 493 Karanuikoff, J.. Zur Technik der Versilberung von Spirochaete pal- lida [öchaudixx-Hoffmaxn] 309 Barber, M. A., The rate of multiplication of Bacillus coli at different temperatures 14(J Bechhold, H. , u. Ziegler. J. . Die Beeinflussung der Diffusion in (Gallerten 300 Beer, R., Un Elaioplasts 158 Benecke, W., Die von der CRONEsche Nährsalzlösung 152 Berger, K. , Vergleichende färberische Nachprüfung der von Ziehl- Neelsex, Much und Gasis empfolilenen Färbemethoden für Tuberkelbazillen und einige Versuche über Umfärbung bereits gefärbter Bazillen 575 Berka, F., Über das Verhältnis der zur Darstellung gelangenden Tuberkelbazillen bei Sputumfärbemethoden 499 Bethe, A., Wirbellose Tiere 119 Boehm, P., Über den feineren Bau der Leberzellen bei verschiedenen Ernährungszuständen ; zugleich ein Beitrag zur Physiologie der Leber. Beiträge zur Physiologie der Drüsen 296 Bonuey, V., Eine neue und sehr schnelle Dreifach -Färbung . . . 12G Boresch , K. , Über Gummifluß bei Bromeliaceen nebst Beiträgen zu ihrer Anatomie 320 Beule , L. , Recherches sur le Systeme nerveux central normal du Lombric 268 Brandts, E., Über Einschlüsse im Kern der Leberzelle und ihre Be- ziehungen zur Pigmentbildung a) beim Hunde, b) beim Menschen 567 Brenchley, W. E., On the strength and development of the grain of wheat [Tritieum vulgare] 158 Brnckuer, J. , Sur la fermentation des Sucres par le meningocoque et le micrococcus catarrhalis 147 Buard, G., Recherche de Findol dans les cultures raicrobiennes . . 148 Bürker, K., Methoden zur Thermodynamik des Muskels 122 Burgetf, H. , Die Wurzelpilze der Orchideen, ihre Kultur und ihr Leben in der Pflanze 581 Burri, R. , Das Tuscheverfahren als einfaches Mittel zur Lösung- einiger schwieriger Aufgaben der Bakterioskopie (absolute Reinkultur, Spirochätennachweis u. a. m.) 300 (ajal, 8. Ramöu y, Les conduits de Golgi-Holmoreen du proto- plasma nerveux et le reseau pericellulaire de la membrane . 284 Calderini , A. , Untersuchungen "über Anaerobenzüchtung nach dem Tarozzi sehen Verfahren 499 VI Inhaltsverzeielinis. Seite Calmette, Massol et Bretou . Milieux de culture pour le bacilh; tuberculeux öTo Casaris-Demel, A., Über die morphologische Struktur und die morpho- logischen und chromatischen Veränderungen der Leukocyten auf Grund von Untersuchungen nach der Methode der Vital- färbung des Blutes :2t>y Chausse, Methodes de coloration communes ä Tactinobacillose, l'actino- mycose et la botrynomycose 495 Ciliano, P., EleVdin 133 Ciiica et Peiiea, Recherches sur le diagnostique post mortem du charbon bacteridien par l'examen bacteriologique des matieres fecales 494 Colliu, R. , Les variations de structure ä l'etat normal du noyau de la cellule nerveuse soraatochrome chez le Cobaye 142 Da Fauo, C, Über die feinen Strukturveränderungen der motorischen Kernzellen infolge verschiedenartiger Verletzungen der zu- gehörigen Nerven :i7ii Dakin, W. J., Striped rauscle in the mantle of Lamellibranchs . . . 2i;t; Dantscliakoif, W., Untersuchungen über die Entwicklung des Bhites und Bindegewebes bei den Vögeln. I. Die erste Entstehung der Blutzellen beim Hühnerembryo und der Dottersack als blutbildendes Organ l;jö Davis, Br. M., Cytological studies on Oenothera. I. Pollen develop- ment of Oenothera grandiflora ')()2 des Arts, L., Über die Muskulatur der Hirudineen 554 Di Christina , G. , Die sekretorischen Funktionen der Magendrüsen unter abnormen Bedingungen der Innervation und Kanalisa- tion des Organs 140 Dietrich, AV., Die Facettenaugen der Dipteren 549 Dieiidonne, A., Blutalkaliagar , ein Elektivnährboden für (Jholera- vibrionen oO(i Döring, W., Über Bau und Entwicklung des weiblichen Geschlechts- apparates bei myopsiden Cephalopoden lol Dopter, Etüde de quelques germes isoles du rhinopharynx, voisins de meningocoque [parameningocoques] 495 Duesberg, J., La Spermatogenese chez le rat [Mus decumanus Fall., Variete albinos] 144 Eckerson, S., On the demonstration of the formation ofstarch in leaves 582 Ehrlich , P. , Beiträge zur experimentellen Pathologie und Chemo- therapie 572 Eilermann, V., u. Erlandsen, A., Nachweis von Tuberkelbazillen im Sputum 311 Escallon, J. , et Sigre, A. , Recherche de l'indol dans les cultures microbiennes ä l'aide du furfnrol 14b Esch, P., Ein Beitrag zur Züchtung des Meningococcus 579 Federolf, Über den Nachweis des Bacterium coli im Wasser durch die Fällungsmethode 498 » Inhaltsverzeichnis. VII Seite Feoktistow, A., Eine neue Methode zur Gewinnung von Reinkulturen aus ganzen Organen und Gewebsteilen 52t) Prowazek, S. v. , Taschenbuch der miicroskopischen Technik der Protistenuntersuchung 499 — , — , Einführung in die Physiologie der Einzelligen (Protozoen) . 558 Pütter, A., Methoden zur Erforschung des Lebens der Protisten . . 118 Rau, S., Vergleichende Untersuchungen über einige neuere Methoden von Tuberkelbazillen im Sputum 579 Regaiid, C, Sur les mitochondries de l'epithelium seminal. III. Tech- nique, variations histochimiques 491 — . — , Sur un procede de coloration de hi myelirie des übres ner- veuses peripheriques et sur certaines analogies de reactions microchimiques de la myeline avec les mitochondries .... 49(» Regaud, C, et Favre, M., Granulations interstitielles et mitochondries des fibres musculaires striees 271 Regaud, C, et Mawas, J., Ergastoplasma et mitochondries dans les cellules dans la glande sous-maxillaire de l'homme .... 5(j5 Retterer, Ed., Amygdales et follicules clos du tube digestif [deve- loppement et structure] 29i) Richter, O., Zur Physiologie der Diatomeen (II. Mitteilung;: Die Biologie der Nitzschia putrida Bexecke ol5 Rößle, R. , u. Yoshida, T. , Das Gitterfasergerüst der Lymphdrüsen unter normalen und pathologischen Verhältnissen 295 Röthig, P., Zur Darstellung der Zellgruppierungen im Zentralnerven- system 282 Roseuberg, O., Cytologische und morphologische Studien an Drosera longifolia -(- rotundifolia 319 Rühlemann , H. , Über die Fächerorgane , sogenannte Malleoli oder Kaquettes coxales. des vierten Beinpaares der Solpugiden . . 474 Ruhland, W., Beiträge zur Kenntnis der Permeabilität der Plasmahaut löS — . — , Die Bedeutung der KoUoidalnatur wässeriger Farbstoif lösungen für ihr Eindringen in lebende Zellen 155 Russakoff, A., Über die Gitterfasern der Lunge unter normalen und pathologischen Verhältnissen. Zugleich ein Beitrag zur Kennt- nis der feinsten Stützsubstanz einiger Parenchyme .... 5(j7 Sachs -Müke, Vergleichende Untersuchungen über die Typhusbazillen- züchtung aus kleinsten Blutgerinnseln vermittelst der Callen- anreicherung und des direkten Plattcnausstriches 580 Saigo, Y. , Die Purkinje sehen Muskelfasern bei Erkrankung des- Myokards l."]8 XII Inhaltsverzeichnis. Seite Sauvageau, C, Sur les cultures cellulaires d'aloues 501 Savini, E., u. Savini, Th., Ein neues Verfaliren zur Ncivenzellen- färbung 285 Saxton, W. T., Preliminary account of the ovule, j^ametophytes and embrj'o of Widdringtonia cupressoi(]es 58j! Schaffner, J. H, , The reduction divifsion in the microsporocytes of Agave virginica 320 Schenck, J., Atembewegungen 120 Schereschewsky, J., Züchtung der Hpirocliaete pallida Schaudinx . 307 — , — , Weitere Mitteilung über die Züchtung der Spirochaete pallida 307 Schikorra, W., Über die Entwicklungsgeschichte von Monascus . . 31(; Schilling, V., Zur Morphologie, Biologie und Pathologie der Kupffei:- schen Sternzellen der menschlichen Leber 565 Schindler, H., Über Malachitgrünnährböden 305 Schmidt, W. J,, Beiträge zur Kenntnis der Parietalorgane der -Saurier 571 Schmincke , A. , Die Regeneration der (juergestreiften Muskelfasern bei den Säugetieren 562 Schönichen- Kalberlah. B. Eyferths Einfachste Lebensformen des Tier- und PHanzenreichs. Naturgeschichte der mikroskopi- schen Süßwasserbewohnor 474 Schröder, R., Die Drüsenepithelveränderungen der Uterusschleimhaut im Intervall und Prämenstruum 567 Schütz , Die Silberimprägnation der Neurolibrillen nach Biel- SCHOWSKY 143 Schumacher, Vergleichender Typhusnachweis mittels des kombi- nierten Endo -Malachitplatten verfahren und des Conradi sehen Brillantgrünpikrinsäureagars 5S0 Schurig, W., Biologische Experimente nebst einem Anhang: Mikro- skopische Technik 126 Senn, G., Die Gestalt- und Lageveränderung der Pflanzenchromato- phoren 158 Sigre, A., Au sujet du rouge neutre comme indice du Colibacille . 148 Stantschinsky, W., Über den Bau der Rückenaugen und die Histo- logie der Rückenregion der Oncidien 131 Steinhaus, J. , Grundzüge der allgemeinen pathologischen Histo- logie 124 Stephau, S., Über eine besonders für Schnittfärbungen brauchbare Modifikation der Gkam sehen Färbungsmethode 309 Sterling, St., Das Blutgefäßsystem der Oligochäten. Embryologische und liistologische Untersuchungen 550 Stoklasa, J. , u. Ernest, Ad., Beiträge zur Lösung der Frage der . chemischen Natur des Wurzelsekretes 152 Strigl, M., Der Thallus von Balanophora, anatomisch-physiologisch geschildert 155 Suzuki, B. , Eine einfache Schnittserienmethode bei der Celloidin- einbettung 264 Iiili:ilt8 Verzeichnis. XUI Seite Svedelius, N., Über den Bau und die Entwicklung der Florideen- ;^attung Martensia 501 Swellengrebel, N. H., Neuere Untersuchungen über die vergleichende Cytologie der Spirillen und Spirochäten 308 Tarapani, H., Zur Entwicklungsgeschichte des Hyobranchialskelettes von Salamandra atra Lauu. und Triton alpestris Lauk. . . öcj-i Taube, E., Beiträge zur Entwicklungsgeschichte der Euphausiden. 1. Die Furchung des Eies bis zur Gastrulation 557 Tigerstedt, R., Handbuch der physiologischen Methodik 118 Tschachotiu, S., Die Statocyste der Ileteropoden 130 ügduleua , (r. , Über die Färbbarkeit der Achsenzylinder peripherer Nerven bei primärer und sekundärer Degeneration nach der ERNSTschen Methode der Nervenfärbung 487 Vouk, Val. , Laubfarbe und Chloroplastenbildung bei immergrünen Holzgewächsen 153 Wada, T., Über die Unterscheidung der Menschen- und Tierknochen 563 Wasielewski u. Hirschfeld, Zur Technik der Amöbenuntersuchung 497 Watkinson, G. B. , Untersuchungen über die sogenannten Geruchs- organe der Cephalopoden 555 Wehnier, C, Nachweis des Hausschwammes (Merulius) auf kulturellem Wege 156 Werbitzky, F. W. , Untersuchungen über den diagnostischen Wert einiger Nährböden für den Nachweis von Typhusbazillen in Faeces , 305 — , — , Ein neuer Nährboden zum Nachweis der Typhusbazillen in Faeces 305 Wester, D. H., Studien über das Chitin 501 Wilson, M., On spore formation and nuclear division in Mnium hor- minum 317 Wisselingh, C. v., Zur Physiologie der Spirogyrazelle 314 Wright, F. E., Measurement of Extinction Angles in the thin Section 162 — , — , The Bi-Quartz Wedge Plate applied to Polarimeters and Sacharimeters 163 Yamamoto, J., Über den Lokomotionsapparat der Protistenzellen . 575 Yaniauouchi, Sh., Mitosis in Fucus 314 Zach, F., Über den in den WurzelknöJlchen von Elaeagnus angusti- folia und Alnus glutinosa lebenden Fadenpilz 316 Zieliuska, J., Über Regenerationsvorgänge bei Lumbriciden. Rege- neration des Hinterendes 554 Zijlstra, K., Die Gestalt der Markstrahlen im sekundären Holz . . 151 Zürcher L., Histologie der Körper- und Darmmuskulatur und des Hämocöls von Owenia 562 Verzeichnis der Mitarbeiter an Band XXYI. C. U. Aritins Kuppers in Amsterdam. Dr. W. Berg in Straßburg i. E. Dr. K. Berliner in Gießen. Dr. C. Fr. Bödecker in Berlin. Dr. J. Boeke in Leiden. Dr. G. Bonvicini in Tulln. Dr. V. Brudny in Wien. Prof. D. Carazzi in Padua. Prof. L. E. Cavazza in Bologna. Dr. Ch. Funck in Nancy. B. Halle in Steglitz. Dr. W. V. Ignatowsky in Berlin. Prof. Dr. A. Johnsen in Kiel. Stiid. med. C. Kittsteiner in Wiirzburg. Cand. med. R. Kowler in Jena. Prof. Dr. R. Krause in Berlin. Prof. Dr. E. Küster in Kiel. Dr. H. Lebrun in Brüssel. Prof. J. Lendvai in Temesvar. Dr. 0. Levy in Leipzig. Prof. Dr. P. Martin in Gießen. Prof. Dr. L. Martinotti in Bologna. Prof. Dr. A. Maximow in St. Petersburg. Prof. Dr. P. Mayer in Neapel. Prof. Dr. A. Meyer in Marburg a. L. B. Mozejko in Symferopol (Krim). Dr. V. Pöschl in Graz. Verzeichnis der Mitarbeiter an Band XXVI. XV Dr. H. K. Tiadascli in Philadelphia. Prof. Dr. B. Rawitz in Berlin. Dr. W. Reideraeister in Berlin. Dr. E. Savini in Berlin. Frau Dr. Th. Savini- Castano in Berlin. Dr. W. Scheffer in Berlin. Prof. Dr. P. Schiefferdecker in Bonn. Dr. E. Schoebel in Neapel. Dr. G. Seliber in Paris. Dr. H. Siedeutopf in Jena. Prof. Dr. E. Sommerfeldt in Tübingen. E. 0. Sommerhoflf in Locarno. Dr. L. W. Ssobolew in St. Petersburg-. Prof. B. Suzuki in Kyoto. Prof Dr. H. Tafner in Beszterceb.-inya. Dr. Fr. Tobler in Münster i. W. Dr. M. Wolff in Bromberg. Band XXVI. Heft 1. Die Herstellung von transparenter roter Leim- inj ektionsmasse. Von Prof. Rudolf Krause in Berlin. Hierzu eine Textabbildung. An eine gute rote Leimmasse, die ja in der Mikrotechnik eine so außerordentlich große Rolle spielt , muß man folgende Anforde- rungen stellen : 1) Die Masse muß eine genügende Menge Farbstoff enthalten, so daß sie selbst in dünnster Schicht noch hinreichend tief gefärbt erscheint. 2) Die Masse muß transparent sein, d. h. sie muß diese Farb- stoffmenge ausschließlich in gelöster Form enthalten. 3) Der Farbstoff darf nicht durch die Gefäßwand diffundieren, er muß in gelöster, aber indiffusibler Form in der Masse ent- halten sein. 4) Die Masse muß so konzentriert sein , daß sie das Gefäß- lumen ausfüllt und bei der Nachbehandlung möglichst wenig schrumpft. Daß eine Masse , die diesen Anforderungen entspricht , sehr schwer herzustellen ist, ist eine alte Erfahrung. Am schwierigsten ist es der vorletzten Forderung zu entsprechen und es sind eine große Anzahl von Vorschriften in dieser Beziehung gegeben worden. Sie sind aber entweder zu kompliziert oder zu unsicher. Ein ein- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. 1 2 Krause: Herstellung von transparenter Leiminjektionsmasse. XXVI, 1. Faches und sicher zum Ziel führendes Verfahren dürfte deshalb allgemein willkommen sein. Ich fertige mir seit Jahren meine Injektionsmasse selbst an und habe dabei noch niemals einen Mißerfolg erlebt. Dabei ist das von mir geübte Verfahren ein so einfaches, daß die Masse von jedem Diener hergestellt werden kann. Dasselbe ist im wesentlichen eine Modifikation einer vor Jahren von Fol beschriebenen , anscheinend aber nur sehr wenig geübten Methode, deren Prinzip darin besteht, daß man die Gelatineplatte ganz ähnlich wie ein mikroskopisches Präparat mit Boraxkarmin färbt und die Farbe in der Platte dann durch Behandlung mit Salzsäure fixiert. Zur Vereinfachung und Erleichterung der ganzen Prozedur dient das neben abgebildete Gefäß ungemein. Es ist das ein rechteckiger Kasten von Weißblech, der 28 cm lang, 15 cm breit und 10 cm hoch ist. In den Kasten paßt ein mit Henkeln versehenes Sieb von gleicher Form , dessen Maße in allen Dimensionen 1 bis 2 cm ge- ringer sind als die des Kastens. Der übergreifende Deckel ist mit Ausschnitten versehen, die in die Arme der Henkel passen. p]s faßt dieses innere Sieb bequem 100 g trockene Gelatine, zu deren Färbung etwa 2 Liter Farblösung nötig sind. Man bringt die angegebene Menge Gelatine, etwa 50 Platten, in das Sieb, setzt es in den Kasten ein und übergießt mit destilliertem Wasser. Nach einer bis 2 Stunden ist die Gelatine genügend ge- quollen, das Sieb wird herausgenommen und das Wasser eine ^/^ bis ■^/g Stunde lang abtropfen lassen. Zur Färbung dient folgendes Boraxkarmin. 100 g Borax werden in 2 Liter heißem destilliertem Wasser gelöst, 15 g fein pulveri- siertes Karmin zugesetzt und tüchtig gekocht. Am nächsten Tag wird einfach vom Bodensatz abgegossen, ein Filtrieren ist unnötig. Diese Lösung wird in den Kasten gegossen und das Sieb mit der gut abgetropften Gelatine in sie eingesenkt. Dann suche man durch Rütteln und Schütteln des Siebes die Luftblasen zwischen den Gelatineplatten möglichst zu entfernen , damit sie allseitig von der Farblösung umgeben werden. Nach 48- bis 72stündigem Färben in dem bedeckten Kasten wird das Sieb herausgehoben , die Farblösung gut abtropfen lassen imd zu späterem Gebrauch abgegossen. Dann füllt man den Kasten mit Leitungswasser , senkt das Sieb wieder ein und wäscht durch Schütteln die überschüssige Farblösung aus, was nach drei- bis vier- maligem Wechseln des Waschwassers erreicht wird. XXVI, 1. Krause: Herstellung von transparenter Leiniinjektionsraasse. 3 Nun folgt die Behandlung der gefärbten Gelatine mit Salzsäure, der einzige Punkt des ganzen Verfahrens, der einige Aufmerksamkeit erfordert. Ich benutze dazu eine 2prozentige Salzsäure und ver- wende zu ihrer Herstellung einfach Leitungswasser. Hauptsache ist, daß man die Säure in recht großer Menge verwendet und sie wechselt, sobald sie sich rot färbt. In ein großes , nicht zu liohes Steingutgefäß bringe ich 5 bis 10 Liter 2prozentiger Salzsäure und behandele in ihm die mittler- weile aus dem Sieb entfernten gefärbten Gelatineplatten. Man nehme immer nur höchstens 5 bis 6 Platten auf einmal vor und bewege sie so lange in der Säure fortwährend hin und her, bis das Kar- moisinrot umschlägt in Kirschrot. Ist das erreicht, so müssen die Platten heraus , bleiben sie zu lange in der Säure , so wird die Masse zu hell. Ich bringe dann die Platten wieder in das Sieb zurück und stelle sie zum Wässern , indem ich den Wasserleitungsschlauch zwischen Sieb und Kastenwand einführe. Man kann dann darauf rechnen , daß nach etwa ^/o- bis einstündigem Wässern der Säure- überschuß aus den Platten entfernt ist. Läßt man schließlich das Wasser 3 bis 4 Stunden abtropfen , so ist die Masse zum Konser- vieren fertig. Zu diesem letzteren Zweck kann man entweder die einzelnen Platten , die bei einigermaßen vorsichtigem Vorgehen ganz bleiben, herausnehmen und an einem kühlen Orte trocknen. Oder aber man schmilzt, was ich entschieden vorziehe, die Masse auf dem Wasser- bade ein und konserviert durch Zusatz eines haselnußgroßen Stückes Kampfer. Diese einfache Konservierung reicht vollkommen aus. Man darf nur nicht, wie mau das so oft sieht, den Kampfer auf die er- starrte Masse einfach auflegen, sondern man muß das Kampferstück in die noch flüssige , auf dem Wasserbad beflndliche Masse hinein- bringen, so daß etwas Kampfer in Lösung geht. Wir haben die so konservierte Masse monatelang aufbewahrt, ohne daß sich die ge- 1* 4 Martinotti: Tecnica della dimostrazione delle cellule cosinofile. XXVI, 1. ringste Spur von Verschimmelimg zeigte und müssen deshalb im Gegensatz zu Hoyer diese einfaclie Konservierungsmetliode der Kon- servierung mittels Zusatz von Chloralhydrat mindestens gleichstellen. Die so erlialtene Masse erfüllt alle die oben aufgestellten Be- dingungen, vor allem aber die wichtigste : sie diffundiert nicht durch die Gefäßwand. Ein Ausfallen des Karmins kommt niemals vor, die Masse ist auf jeden Fall transparent. Die Konsistenz hat man natürlich ganz in der Hand , je länger man die Platten abtropfen läßt, um so konsistenter wird die Masse. Die Farbe, ein helles, durchsichtiges Kirschrot, ist, wenn man die obigen Vorsichtsmaßregeln beherzigt, auch vollkommen kräftig genug. [Eingegangen am 6. April 1909.] [CHnica dermatologica di Borna diretta dal Prof. Jadassohn.] Sulla tecnica della dimostrazione delle cellule eosinofile. Per il Dott. Leonardo Martinotti (Bologna). L' importanza assunta in questi Ultimi tempi dallo studio delle granulazioni eosinofile, sopratutto per merito di Ehrlich, ha fatto si che molti autori si siano occupati della questione di vedere quäle ufficio abbia uella fisiologia la presenza di tali elementi come costi- tuenti normali di determinati organi , e nella patologia quäle impor- tanza assuma la comparsa loro in determinati processi morbosi e in organi nei quali normalmente non esistono. Altri aucora , sopratutto "1' Ehrlich stesso , hanno studiato il coraportamento istochimico di tali granulazioni, e hanno determinato in tal modo che probabihnente nella loro costituzione entra un radicale a carattere basico che tende ad unirsi al radicale acido dei colori cosi detti acidi di anilina (g r a n u 1 a z i o n i a c i d o f i 1 e od o s s i f i 1 e , granulazioni a di Ehrlich). XXVI, 1 . M a r t i n ü 1 1 i : Tecnica della dimostrazione delle cellule eosinofile. 5 Per altro, beiiclie sia ormai certo che esse si colorano coi colori acidi di aniliiia, in particolar modo colle „eosine", e anchc indubbio che la loro dimostrazione, sopratutto nei tessiiti, urta in certe diffi- colta, tanto che probabilmente in raolti processi nei qiiali esistono non appaiono colorate perch^ necessitano di particolari procedimenti (Dahieu),^ oppiire perche i procedimenti adottati sono sfavorevoli alla loro dimostrazione ; cosi ad es. e opinione generale che la fii>sa- ziüne dei pezzi negli alcooli ostacoli impedisca la loro dimostrazione (Darier^, Kanter). In base a cio io mi sono occupato di cercare quali sono le condizioni che si mostrauo favorevoli e quali sfavorevoli per la dimostrazione loro tanto nei preparati per striscio qiianto nelle sezioni. A tale proposito io dovrei prendere in cousiderazione non solo tutti i metodi posti iunanzi da vari autori per la dimostrazione delle granulazioni eosinofile , ma anche quelli dati per la colorazione del sangue, nonche tutte le innumerevoli modificazioni proposte al metodo preconizzato dal Romanowsky per la dimostrazione dei parassiti malarici nei sangue, metodo che, come e noto, si basa suUo speciale potere colorante di una miscela di bleu di metilene ed eosina. Sic- come perö un simile studio comparativo uscirebbe di molto dai limiti di questa nota e d' altra parte rappresenterebbe anche un lavoro poco utile giacche moltissimi dei metodi proposti sono notoriamente lunghi e complicati e non hanno nessun particolare vantaggio, io mi sono limitato a raccogliere le indicazioni di grande numero di questi metodi nella bibliografia per coloro i quali volessero occuparsi piü minutamente di ciascuuo di essi, mentre nei corso del lavoro ho cercato di determinare quali sono i momenti che facilitano od osta- colano la dimostrazione delle granulazioni eosinofile dal punto di vista sia della fissazione, sia della qualita del colorante e sia del diverso procedimento adoprato. II materiale mi fu dato da sangue avente un certo quäl grado di eosinofilia , da contenuto di bolle di pemfigo e di Dermite di DuHRiNG che presentavano numerosi eosinofili e da midollo osseo rosso di bue e di coniglio. Quest' ultimo racchiude, come e noto, anche delle cosidette granulazioni pseudoeosinofile , che per altro sono di- ^) Darier, Pratique Dermatolog. — T. I, Path. gener. de la peau. (; l\l ;ir I i iiol I i : ruciiicii dcllii (liuiontriiziono düllo cellulc eosinolilo. XXVI, L HÜiipiibili per i loio c'irnllciri i);u"li(',oliirl fpiccolezz;!, rcazioni colo- iMiili, c(('..). II ini.i;li(»r m;ilcii;ili' iiii (N hIjiIo foniilo sopratlltto dal inidollo (li l»iii'. cIk; Iio ikiIiiIh oticiicrc. Hciiipr« (VeHchissiiiio , jjoco dopo siicrilicilo I' :uiiinalo, o clio ]K)SHicdc f^raiiiila/ioni eosinolile afiatto aiiMl();;li(^ a (iiiollc. chdl' iiomo ; in liiic, o (',S('.}i,'iii(o pi-c|i;ii-:itl di (•(infndio aiiclic »II iiiidoll«! (Icllc, iissa dcll' iioiiio. |ja hu'iiica, piT l;i riccrca (|<'j;Ti ('(»siiiolili ucdlc, pr('i);ira/ioni lisHatc sia, per siriscio sia in st'zioiii r scMiiprc ,sla(a ideulica per tuttc le vai'i(^ pi'ov(^ oiide jiolcr slabilire i dati di cunfronto. Kcc'.o i iiictüdi usali custantcnieidc : a) r (' r i>;\\ H 1 r i 8 c i : I *^ ('(»htrazioiic d(d pnip.'iralo coii soliizioue acciiiosa all' 1 "/„ di l'losiii cxlia ll(">clis( di (}ui'inij;R per h' . 'j" |javaf^};io in ac(Hia distillata. .'{" AHciuf^anieido colla carta bibiiia. -1" ('(doi-azione con l)lcu di nictilone aciiuoso neutro all' 1 "/^ per l' (non di |)iii). T)" liava^j;i(> in accpia dislillala. (')" l']saiccaiucnlo eolla c.irta bibid:i e pdi a licve calore. 7** Xilolo, Halsanio, oppiire esanie colTolio di cedro e 1' iniinersioue. b) Tor 1 0, H e z i (» n i : I*' ("oloraziono delle Sozioni con ylico-cmallnne di Mayku 3' — b'. 2" li.ivaj;i;io in ai'(|ua connine. .'{^* (Nilorazione per 12-24 ore con cosina dihiitissinia (2 j^occie di soluzione ac(iU()sa all' 1 ^/^ in 50 — lUO cc di ac(j|ua coniune). I" Alcool i)0— 95 — Alcool a 100^. 5" Xilolo, Halaanu). N(d dare il nictodo alTcitsina e blen di nictilene ])er strisei (a) lio insistito perch^ la colorazione con (luosf ultimo in soluzione aequosa ncnira all' uno per ccnio non sorpassasse la dnrala di im niinnto. La r;i,i;ione e che, mentre se si leng'ono coslauti questi lenipi il risultato dclla colorazione riesce , diro, normale in (|uan)o clic si lianno Ic eniazie e le granulazioni eosinolile colorate dalla eosina e i nucici e f;li altri elemenli basolili linli dal bleu di nictilene, aceade ehe se si ecccde nella colorazi(Uie con ()iicst' ultimo si lianno risultati variabili ehe posaono })ortare uua totale eolora/ione azzurra ilegli XXVI, 1. Miirtinotti: Tccnicadolhi diiijoötraziono delle cellule coHinofilo. 7 elementi, occezion futta dello f,^raniilazioni cosiiiodle cho roHistono piii di tutli alla azione del coloraiite basico. Questo fatto giä da tenipo iioto (Jauassoiin) e da talmii iisii(Viiit(» pi;r iiiia colora/ionc esclii.siva dcgii eosiiiofili CVEH'AiM'viAA-'ji). I. Dimostrazione a fresco senza fissazione. Sc si proudcjiKJ dclh; por/ioiii iiiiiiiiiK; di niidollcj o.sscm) di ciHiif^lio appeiia ucciso, si irnmergoiio in una soiiizionc (isiologica di cloriiro sodico addizioiiata di scarsa (juaiitit;\ di eosiiia (l^/o,^ circa), sflascia no per dodici-vciiti(iiiattro or(! , eventiialracntc d(;ntro al terinoBtato a 37®, urclie venga pro- lungata la du rata de IIa fissazione stessa. Se si fissano dei preparati di sangue fatti per striscio, dopo averli lasciati dissec- care all'aria, con aleool assoiuto (reso tale mediante solfato di rarne calcinato) si lia una buona fissazione giä dopo circa lO' (un ternpo minore di\, risuitati incostantij ; dopo 15' — 20' essa 6 anche migliore, invece se per la stessa durata di tenipo si usano gli alcooli inferiori CJ9*^ — 9G'^ — 90® etc.) le granulazioni o uon vengono fissate ma- 8 Martinotti: Tecnica della diinostrazione delle cellule eosinofile. XXVI, 1. lissimo c appaiono allora diffusamente colorate , tutt'al piü con iiiia tinta un po' piü intensa degli altri elementi acidoiili , oppure come se fossero congloraerate. Prohmgando il tenipo di fissazione ad una mezz'ora si hanno gia discrete preparazioni iu quasi tutti gli alcooli, e infine quando si arrivi ad 1 — 3 e piü ore si possouo allora osser- vare delle elegaiiti dimostrazioni di eosinofili in tutti gli alcooli di . vario grado cominciando da quelle perfettamente assoluto (otteuuto nel modo sopradetto), e giuiigendo fino all'alcool a 70^ — 60*^. Scen- dendo ancora nella scala degli alcooli si banno naturalmente dei risul- tati sempre peggiori, perche in essi all'azione fissativa va man mano sostituendosi l'azione macerante , il che accade approssimativamente coiralcool a 50^ — 40^. E allora si vede questo fatto che, siccome le granulazioni eosinofile resistono piü degli altri elementi all'azione di macerazione, esse, per quanto malamente, rimangono ancora colo- rate. Ciö accade ad esempio nell'alcool a 30*^ dove gli altri ele- menti sono per lo piü alterati. Cio che avviene pel sangue si osserva anche per strisci di mi- dollo osseo, di coutenuto di bolle, di vescicole e via diceudo. Solo che allora la fissazione va mantenuta un po' piü a lungo : per qua- lunque preparato quando essa dura per 3 — 6 ore da bellissimi risultati. Coli' aggiunta di tracce di acidi o di basi o non si ha fissazione od essa e pessima. In conclusione credo di poter affermare che si ottiene una ottima fissazione cogli alcooli di diverso grado da 100^ a 70^ — 60*^ quando essi siano neutri e quando la durata si prolunghi per alcune ore (1— o— 6). L'alcool MetiMco da elegantissime immagini e costituisce certo il migliore fissativo delle granulazioni eosinofile, La sua azione e rapida: uno striscio di sangue rimane fissato gia dopo 15 secondi ; per altro l'optimum si ha dopo 5' — lO'. La miscela AlcooUco - Eterea fissa pure ottimamente, sopratutto se la sua azione si prolunga per un'ora o due (Nikiforow). Buoni risultati si hanno pure col Calore ; per gli eosinofili non e per altro necessario raggiungere gli elevati gradi di temperatura consigliati da Ehrlich per le granulazioni neutrofile. Passando il portaoggetti su cui si e fatto lo striscio 10 al massimo 20 volte sulla fiamma si ha un'ottima fissazione« Anche il Cloroformio (Josue') da talora buoni risultati. Buone immagini si hanno talora coi vapori di Fonriolo puro ovvero di Acido Osniico acquoso al 2 ^/q , sopratutto quando si XXVI, 1. Martinotti: Tecnica tlella dimostrazione delle cellule eosinofile. 9 operi rapidameute facendoli agire siigli strisci appena fatti e an- cora umidi. Altri numerosi metodi di fissazione ö pure esperimentato raa tutti rai sono apparsi iuferiori ai precedenti , i quali oftrono sopra- tutto il vantaggio della sicurezza, della semplicita e della rapiditii. Mi limito perciö ad enumerarli ; essi sono dati dai liquidi di Flem- MiNG , Caknoy , Kleixenbeug , Mann , BouiN , Okth , DoMiNici , dal- r acido c r m i c , dall' a c e t o n e , dalla soluzione acquosa satura di Sublimate, uouclie dai metodi complicati di Weidenreich , di Argutinsky, etc. B. Fissazione dei pezzi. Per questo studio mi sono attenuto esclusivamente al midollo osseo di coniglio come quelle che meglio si presta per simili ricerebe. Esso veniva immerso frescbissimo nei vari fissativi e, dopo eseguiti i passaggi necessari, veniva incluso in paraffina, Le sezioni attaccate al portaoggetti venivano colorate seguendo il metodo sopraindicato. Älcool Efilico. CoU'alcool a 100*^ (reso tale mediante sol- fato di rame calcinato), con quelle a 99*^ — 98'' (alcool assoluto del commercio), con quello a 96*^, bo tissato per 15 ore; con gli alcooli inferiori (90*^—80^ — 70^^ etc. fiuo a 30**) per 24 ore. Ancbe qui, come per gli strisci ho avuto cogli alcooli buone fissazioni degli eosinotili. Non sarä certo una fissazione di predilezione quella che si ottiene, ma esse assumono una buona colorazione rosea coll'eosina, sono abbastanza ben delimitate e distinte le une dalle altre e risal- tano sempre dagli altri elementi acidofili, sopratutto sulle emazie, per il colore piü intenso che esse assumono. E nemmeno ho notato una grande ditierenza fra gli alcooli di diverso grado: per es. col- r alcool a 80 ** bo avuto fissazioni che non avevano nulla da invi- diare a quelle ottenute coli' alcool a 100^. lo ho avuto discrete fissazioni fino all' alcool a 80*^ — 70*^; coli' alcool a 60*^ le granula- zioni appaiono gi:i un po' ditFusamente colorate e cogli alcooli infe- riori i risultati diventano gradatamente peggiori per il prevalere graduale dell' azione maceraute su quella fissativa. Finalmente nel- r alcool al terzo essendo le granulazioni eosinofile resisteuti all'azione di macerazione piü degli altri elementi esse possono ancora per quanto in modo non hello ne completo apparire colorate. La fissa- zione degli altri elementi va in generale di pari passo con quella 10 Martinotti: Tecnica della dimostrazione delle cellule eosinofile. XXVI, 1. degli eosinofili. Gli alcooli devono sempre essere neutri ; raggiuuta di trnccie di acidi o di alcali ostacola e impedisce talora del tiitto la loro dimostrazione. Colle miscele alcooliche (Liq. di Carnoy-v. Gehuchten - Sauer, liq. di Ohlmacher, miscela alcoolico -eterea (ana)) ho avuto discrete fissazioni ma senza alciin particolare vantaggio. Alcool MetiUco. Qiiesto fissativo, che a quaiito m\ Consta non h stato finora molto nsata per i pezzi^, da splendide inimagini per gli eosinofili. Dopo 15 ore di soggiorno i pezzi sono passati diretta- mente in cloroformio e inclusi in paraffina. Le granulazioni sono nettissime e intensamente colorate. Anclie i niiclei sono ottimamente conservati per quanto talora possano subire retrazioni riguardo alla loro forma. Formolo. In soluzione acqnosa (al 4 o al 10°/q) da belle im- magini, in soluzione alcoolica invece (Formolo 10 — alcool etilico o metilico 90) da risultati iuferiori. La miscela di Formolo e liqiüdo di Muller (1 : 9) preconizzata da Orth da risultati discreti. Suhllmato. In generale il sublimato e un ottimo fissativo delle granulazioni eosinofile, e se di fronte all' alcool metilico ha lo svan- taggio di dare preparazioni meno eleganti, ha dall' altro lato il van- taggio di conferire una fissazioue piü regolare ai vari elementi del tessuto. Delle innumerevoli formule proposte vennero da me esperi- mentate quella di Heidenhain, la miscela del Mann (Sublimato -j- ac. picrico -\- ac. tannico), la miscela sublimato -jodata di Dominici, la soluzione alcoolica neutra e quella acida , e infine una formula particolare, in uso nella Clinica dermatologica di Berna, la quäle e cosi costituita Sublimato 21 g Alcool 950— lüO« 150 cc Soluz. tisiol. NaCl 279 „ Acido acetico 150 „ Essa dj\ risultati splendidi: si fissa per ^j^ — 3 ore, secondo la grandezza dei pezzi, si lava in acqua corrente per 24 ore, si passa il pezzo in alcool 70" e poi in alcool 90" per 12 ore ciascuno con tracce di tintura di jodio, poi in alcool assoluto puro, in cloroformio, in paraffina. *) Lo ha adoprato Pappenheim assieme aU'acetone e al formolo. XXVI, 1 . M a r t i n o 1 1 i : Tecnica della dimostrazione delle cellule eosinofile. 1 1 La formula di Heidenhain dk pure biioni risultati raa meno di quella iudicata ; le altre miscele non souo raccomandabili. Le miscele picriclie (liq. di Kleinexbeug, liq. di Bouin) e quelle cromiche (liq. di Müller, di Zenker, di Perönyi, di Tel- lyeniezcky, di Burchardt) mi hauno in genere dato risultati inferior! ai precedenti. Discrete preparazioni ho ottenuto talora col liquido di Bouin (formolo-picrico) , con lo Zenker e cd Tellyeniezcky , nia in maniera incostante, Colle miscele osmiche (liq. di Flemming , di Marchi , di Mann (Sublimato -\- ac. osmico -|- ac. acetico), di Altmann, di Altmann- ScHRiDDE e quelle platiniche (liq. di Hermann, liq. del Lindsay) ho ottenuto per lo piü risultati poco buoui. L' acetone, cattivo fissatore in genere, mi e apparso tale anche per le granulazioni eosinofile. Chiudero questa lista dei fissativi ricordando come col metodo della cottura (Posner) io abbia ottenuto risiiltati assai soddisfacenti. III. Qualita del colorante usato. Le granulazioni eosinofile, com'ö noto, souo dimostrabili coi colo- ranti cosi detti acidi di anilina (granulaz. a di Ehrlich), e tra questi sopratuttü colle „eosine". Sotto questo nome vanno diversi corpi aventi una costituzione chimica analoga e posti in commercio con ditferenti nomi. II Rosin nell' Encicl. di tecnica micr. da le seguenti varietcX del gruppo „e o s i n i c o" : 1^ Eosina pr. detta, di cui i principali sinonimi souo: eosina giallastra, eosina solubile all' acqua, eosina A, eosina G, eosina extra etc. 2® Eosina solubile all'alcool o metileosina. 3^ Safrosina o Eosinscharlach. ^^ Jodeosina o eritrosina (Eos. bläulich). 5^ Rosa bengala. 6" Floxina. Avendo richiesto al Dott. Grübler di Lipsia dei campioni di differenti varieta di eosina egli mi mandö le seguenti marche : Eosin- wasser gelb. Eosin AG, Eosin BA, Eosin alcool., Methyleosin, Eosin bläulich. Eosin rein französ. , Safrosin, Rosa Bengala, Erythrosin, (Magdalarot), le quali messe assieme ad alcune altre marche da me 12 Martinotti: Tecnica della dimostrazione delle cellule eosinofile. XXVI, 1. g\k possedute (di ciü una di Mekuk, im' altra di Schuchardt) mi diedero modo di far prove sii circa una quindicina di varieta di eosine. Debbo poi far notare che non ho potuto prendere a base dello studio la costituzione chimica delle varie eosine adoperate, perche i fabbricanti pongono in commercio un numero enorme di colori con nomi differenti che, al dire degli autori, dovrebbero essere chimica- mente identici ; valga l'esempio della erytrosin e della eosin bläulich, le quali secondo la classificazione riportata dal Rosin dovrebbero essere identiche e che invece mostrarono non solo un diverso com- portamento rispetto alla colorazione delle granulazioni eosinofile , ma anche all' aspetto esteriore delle soluzioni apparvero difterenti. Questa 6 la ragione per la quäle io ho dovuto limitarmi a sperimentare le varie eosine avute dal Grübler, attenendomi alla denominazione da questi usata. Di tutti i colori furono fatte soluzioni acquose all' 1 ^/^ (tranne deir eosin spirituslösUch di cui venne fatta una soluzione in alcool a 95^ all' 1 ^/o) e della fluoresceina che e pochissimo solubile e di cui si fece una soluzione diluitissima in acqua. Oltre che colle eosine ho fatto prove anche con altri colori acidi piü comuuemente in uso ; in generale pero non ho avuto buoni risultati : il wasserblau e il lichtgrün per lo piü non le colorano e danno una tinta ditfusa , la fuxina acida mi ha dato risultati vari ed incostanti ; il rosso congo le fa apparire talora discretamente colorate ; 1' orange Gr da una tinta giallo-rossiccia ; il goldorange e V elianthin le colorano in giallo oro. In conclusione tutti questi colori non sono raccomandabili perche costantemente mi sono apparsi inferiori sotto tutti gli aspetti anche alla peggiore delle qualitä di eosina. Una sostanza per altro merita una particolare menzione , ed e la coccinina, raccomandata sopratutto da Cornil e Bab£;s nelle colora- zioni di contrasto dei preparati di bacteri, la quäle da alle granula- zioni eosinofile una tinta rossa lievemente aranciata molto netta ed elegante. Tutte le prove vennero eseguite sempre secondo i metodi sopra indicati per strisci e per sezioni. Dai risultati avuti ho potuto convincermi che tutte le sostanze appartenenti al gruppo delle eosine colorano piü o meno bene le granulazioni eosinofile ^. ^) Debbo qui ricordare un latto notevole: 11 Grübler assieme ai XXVI, 1. Martinotti: Tccnica della dimostrazione delle cellule eosinofile. 1 3 Di tutti i colori acidi e di tutte le eosine provate in rapporto al loro potere colorante delle granulazioni eosinofile, si possono fare i seguenti gruppi : 1^ Sostanze coloranti acide in genere che colorano le granulazioni ma in modo non hello e che quindi non sono rac- comandabili, cioe : rosso Congo, Orange G, Goldorange, H e 1 i a n t h i n ; a questi deve aggiungersi la F 1 u r e s c e i n a , che da una debole tiuta giallo - verdastra disaggradevole. 2® Eosine che colorano le granulazioni in modo non abbastanza netto e danno al fondo del preparato o un colore rosso sporco, che nuoce al riconoscimento delle granulazioni stesse (Rosa B e n g a 1 a , Phloxin rot, Magdalarot [?]) una tinta rosso aranciata piü meno intensa (Eosina di Merck, Eos. diScHUCHARDT, Eos. spirituslös. di Grübler, Eos. AG di GRtJBLER, Eos. BA di Grübler). 3^ Eosine che danno un'ottima colorazione delle granulazioni e anche una lieve tinta al fondo (Eosin extra Höchst di Grübler, Eosin rein französisch di Grübler, Eosin- wasser gelb di Grübler). 4*^ Eosine che iufine non colorano quasi affatto il fondo e danno una bellissima tinta rosso porpora alle granulazioni e rosea aranciata alle emazie (Eosin bläulich,Methyleosin, Safrosin, Erythrosin). I preparati che si ottengouo con tali sostanze sono splendidi , e le granulazioni appaiono intensamente colorate e nettis- sime. La migliore e forse 1' eosiu bläulich, mentre 1' erythrosin e la meno consigliabile per la tiuta meno elegante che essa conferisce. A questo gruppo va aggiunta la Coccinina che le colora in rosso aranciato in modo bellissimo e ben diiferenziato. I risultati ottenuti portano quindi alla conclusione che le eosine campioni di eosina ml mandö anche del Magdalarot, che come e noto e un colore analogo alle Safranine avente uno spiccato carattere basico e rac- comandato sopratutto per la colorazione dei nuclei nelle sezioni di pezzi fissati in Flemmixg. Avendolo esperimentato tanto su sezioni come su preparati per istriscio mi ha dato una discreta colorazione degli eosinofili e soggiungerö di piü che veramente eosinofile erano le granulazioni colorate e non pseudoeosinofile (del coniglio della cavia) e tanto meno neutro- file basofile ; avendo richiesto al Grübler se per caso il colore inviatomi fosse una sostanza speciale, mi rispose che esso era il Magdalarot che comunemente si trova in commercio. Senza entrare in altre discussioni, mi limito per ora a segnalare questo fatto che mi pare sia abbastanza degno di nota. 14 Martinotti: Tecnica della diraostrazione delle cellule eosinofile. XXVI, 1. apparteneuti agli Ultimi diie gruppi in genere sono quelle piü rac- comandabili per la colorazione delle granulazioni eosinofili. Fra di esse io ritengo che la e o s i n bläulich sia la migliore, in quanto che da una colorazione veramente elettiva degli eosinofili, mentre se si desidera ottenere una discreta tinta di contrasto del fondo sono raccomandabili sopratutto la eosiu rein französisch e la eos. extra Höchst tutte di GrIjeler. IV, Solvente dell'eosina. II solvente dell'eosina ha una grande importanza, assai maggiore di quanto a prima vista potrebbe peusarsi. Giä altri autori si sono fermati su questa questione facendo rilevare la diversitä di risultati che si ottengono con i vari solveuti (Kanthack). Le soluzioni acquose sono ottime. Io ho fatto prove tanto su sezioni che su preparati per istri- scio, e i risultati sono stati sempre concordi. Le soluzioni glicerinate colorano bene le granulazioni ma assai lentamente. Le soluzioni acetoniche per Io piii danno risultati negativi. Le soluzioni idroglicerinate (30, 50 *^/q di glicerina) damio elegantissime preparazioni. Le soluzioni alcooliche e idroalcooliche presentano un fatto meritevole di essere rilevato. Se si fanno soluzioni di eosina alla stessa percentuale in alcool a diversi gradi (da 100^ a 30^), e se si lavano i preparati colorati con ciascuna di queste soluzioni coi ditferenti alcooli, si ottengono varie serie di preparazioni in ciascuna delle quali e facilmente rile- vabile la circostanza che le granulazioni appaiono colorate all'incirca quando l'alcool raggiunge un determinato grado. Ad es., se si co- lora con soluzione di eosina fatta in alcool assoluto e si decolora con i diversi alcooli da 100^ a 30 '^ si nota che mentre con quelli su- periori si hanno risultati negativi, quando si arriva a 80*^ si comincia ad ottenere per quanto in modo incerto una colorazione degli eosino- fili ; discendendo ancora essa si fa viepiü costante finche circa nel- r alcool a 40^ avviene quasi sempre. Lo stesso fatto si osserva se si tien costante il grado di lavaggio delF alcool (ad es. a 100") e si usano soluzioni di eosine con alcooli a ditferenti gradi di concen- trazione. Naturalmente i risultati sono di una costanza approssima XXVI, 1. Martinotti: Tecnica della dimostrazione delle cellulc eosinofile. 15 tiva tanto piii che sono sottoposti auche ad altri fattori, ad es., la durata della colorazione , quelle del lavaggio e via diceudo. lo ho cercato perciö di evitare tutte queste possibili cause di errore, come anche ho cercato di eliminare nel modo piü assohito l'uso di tracce minime di acqua, essiccaudo rapidamente con carta bibula le prepa- razioni nei diversi passaggi ed evitando qualsiasi possibile idratazione deU'alcool duraute i vari tempi, e in tal modo ho potuto giungere a risultati sufticentemente costauti. In tutti i modi ciö porta a con- cludere che l'alcool concentrato impedisce una colorazione elettiva dell'eosina, e a snpporre che in quei metodi (dati da parecchi autori) nei quali vengono usate soluzioni alcooliclie di questo colore, la colorazione degli eosinofili avvenga per l'azione quasi islantanea del- r acqua di lavaggio che viene in contatto coli' eosina stessa. Le soluzioni quindi che mi hanno dato i risultati migliori e anclie i piü sicuri, sono quelle acquose e quelle idroglicerinate ; cosi, ad es., una soluzione di eosina all' 1 ^/^ che sia fatta con il 70 ^/^ di acqua e il 30 °/o di glicerina, e raccomandabilissiraa e offre per di piü il vantaggio di conservarsi meglio della semplice soluzione acquosa. V. Tecnica della colorazione. I metodi che ho riferito sopra, sono di uso generale e dopo una fissazione idonea possono considerarsi tra i piü sicuri mezzi per la dimostrazione delle granulazioni eosinofile ; per altro nell' immensa falange di metodi coi quali puö ottenersi la colorazione delle cellule eosinofile i vari autori hanno seguito norme differenti che si possono schematicamentc cosi riassumere : I. Per gli strisci. Si puo fare una fissazione e colorazione separata e una fissazione e colorazione contemporanea. 1^ La fissazione e la colorazione separata rappresenta il metodo piü antico ed e in massima quello da me seguito : in esso dopo avvenuta la fissazione si puö far precedere la colorazione col bleu di metilene a quella coli' eosina , si possono usare svariati colori basici di aniliua (verde di metile , Tionina , Bleu di toluidiua, Brillantkresylblau etc., etc.) le varie formule di ematossilina. Si puö usufruire anche delle cosidette triacide di cui e tipo quella di Ehrlich, oppure anche delle miscele acidofile (Ehrlich). In generale la tecnica da me iudicata mi ha dato sempre ottimi risultati. 16 Martinotti: Tecnica della dimostrazionc delle celliilc cosinofile. XXVI, 1. 2^Nella fissazione e colorazione contemporanea si adoprano miscele sciolte in un liquido che e anche fissativo, che per lo piü e alcool metilico. Per altro in qiiesti casi, e logico supporre che l'azione del fissativo preceda , per quanto di poco, quella del colorante. Difatti nella massima parte dei casi si tratta di soluzioni di bleu di metilene ed eosina fatte assieme in alcool metilico ; ora se si fa la colorazione con una di tali miscele evitando qualsiasi traccia di acqua, la colorazione degli elementi acidofili pnri (ed anche basofili) non avviene od e appena percepibile anche se la prepara- zione rimane a lungo (^/^ — 1 ora) a contatto col colorante (Assmann, Inaiig. Diss.). Se invece si agginnge dopo un certo tempo dell' acqua e si lava in acqua (v. la tecnica iudicata piü avanti) la colorazione si effettua benissimo in 3 miuuti. Questo fatto (che probabilmente e dovuto oltrecche all' essere l'alcool metilico un cattivo solvente deir eosina, anche ad altri fattori che qui sarebbe lungo esporre [si vegga il lavoro dell' Assmann]), dimostra che l'azione dell' alcool me- tilico si svolge indipendentemente da quella del colorante. In relazione colle miscele fissativo - coloranti dovrei prendere in considerazione le innumerevoli formule di bleu di metilene ed eosina proposte dagli autori, le quali in gran parte non sono che modifica- zioni del metodo dato da Romanowsky per la dimostrazionc dei paras- siti della malaria. lo pero ho creduto bene di attenermi solo a quelle che sono gia note per i buoui risultati che esse danno e che sopratutto hanno il merito di associare alla sicurezza del metodo e alla bellezza delle preparazioni il non lieve vantaggio della semplicita e della rapiditji di esecuzione. lo ho usato e quindi confrontato tra loro i metodi di Giemsa, Marino, Leishman, May - Grünwald , Jenner, Goldhorn, Wright. Tutti questi sono ottimi: quello che forse per la colorazione delle eosin ofile e meno raccomandabile e il Giemsa, anche per la durata maggiore necessaria per avere una buoua colorazione (circa 15'). I metodi di Marino, Leishman, Goldhorn, Wright danno delle immagini elegantissime e assai delicate; quelli di May-GrIinwald e di Jenner danno tinte piü energiche, ma sempre bellissime. Questi due Ultimi, sopratutto il Jenner, sono forse piü adatti per lo studio delle granulazioni eosinofile e del sangue in genere. Di questi diversi colori si fanno soluzioni approssimativamente sature in alcool metilico assoluto puro , privo di acetoue, e precisa- XXVI, 1. Martinotti: Tecnica della dimostrazione delle cellule eosinofile. 17 mente al 0"30^/o della polvere di Wright e di quelle di May-Grün- WALD e di Jenner (poste in vendita da Grübler), al O'lb^j^ di quella di Leishman, al 0*20 ^/^ di quella di Marino e all' 1*^/^ circa di quella del Goldhorn. La tecnica e identica per tutti metodi: 1*^ Sulla preparazione non fissata si versano, in sufficiente quan- titä per coprire lo striscio e impedire l'essicamento da evaporazione, alcune gocce di soluz. colorante e si lasciano per 1'. 2^ Senza gettare, si lascia cadere a gocce, evitando possibil- mente ogni dispersione fuori del portaoggetti , acqiia distillata in ({uantita approssimativamente doppia del colorante e si lascia agire per un tempo doppio (2'}. 3^ Si allontana la miscela e si lava in acqua distillata: lo striscio deve avere per trasparenza una tinta rosea: se iilvece ha un aspetto verdastro bluastro , si prolunga il lavaggio sino a che ha assunto il colore voluto. 4*^ Si essicca coUa carta bibula e poi a lieve calore. 5 " Si esamina coli' olio di cedro oppure si chiude in balsamo. Cosi usati tutti questi metodi danno risultati splendidi. Puo talora accadere, ed io ho notato che questo avviene sopratutto colla soluzione di May - Grünwald che, malgrado che si contimii a lavare, lo striscio riraane persistentemente verdastro, oppure si scolora com- pletamente. A tale inconveniente si ovvia facilmente aggiungendo una lieve traccia di eosina all' acqua distillata che viene addizionata (nel passaggio 2) al colorante ; approssimativamente si aggiunge una goccia di soluzione acquosa di eosina all' 1 ^/^ a 10 cc di acqua (cio che porta circa ad avere una soluzione all' Vaoooo)- Qiiesta mo- dalitä di tecnica esiste nel metodo originario di Marino ed e neces- saria per la colorazione dei protozoari; e inutile invece per la colo- razione semplice del sangue, tranne quando si verifichi il caso so- pradetto. Con tale tecnica, ripeto, ho avuto sempre ottimi risultati ; quando le preparazioni si colorano dithcilmente si potranno alluugare i tempi: fino a 2' — o (non di piii !j il tempo 1^ e a 5' — 15' il tempo 2°. Se le preparazioni sono vecchie, si fissano prima in alcool asso- luto per ^l^ ora, poi si colorano diluendo la soluzione colorante con due volumi di acqua distillata e si fa agire per o — 15', quindi si procede come nell' altro metodo (Naegeli). Quando si fanno ricerche su sedimenti urinari , contenuto di bolle , citodiagnosi , ecc. , accade abbastanza frequentemente che lo striscio si stacca dal vetro , indipendentemeute da qualsiasi causa Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. 2 18 Martinotti: Tecnica dclla dimostrazionc delle cellulo eosinofile. XXVI, 1. riguardciute la pulizia del vetro stesso, il grado insufficeiite di essic- cameuto, ecc. ecc. Airinconv^eniente si puo ovviare usando la tec- nica indicata da Wright che e la segnente : 1 ^ Si copre la preparazione con : < Soluz. di Wriüiit (o di Jenner o di M. Grünwald) p. 3. Alcool metilico p. 1. Si lascia per 2" — 40". 2^ Si versano 8 — 10 goccie di acqua distillata e si lascia per 1'— 2'. 8® Si lava dolcemente facendo cadere l'acqua a goccie siil vetrino e lasciandovela per pochi secoiidi. Si ripete cosi iVperazione in 4 — 5 tempi. 4*^ Si essicca agitando il vetrino sul becco Bunsen, cercando per altro di non raggiungere un grado di temperatiira tale da dare una sensazione molesta di calore alle dita. 5*^ Si esamina col balsamo o all'olio di cedro. Tutti i procedimenti indicati mi hanno dato costantemente ottinii risultati. Altre miscele come quelle di Laurent, quella di Pröscher (al bleu di toluidina ed eosiua) mi sono apparse inferiori alle precedenti. IL Per riguardo allo tecnica delle dimostrazioni delle cellule eosinofile su sezioni, come e prevedibile, non si puo usare una fissazione contemporanea alla colorazione, giacche in generale quando i pezzi si includono vengono prima fissati. Non riniane quindi a considerare che il lato della colorazione, la quäle presa solo nel ri- guardo delle cellule eosinofile , puo effettuarsi in una delle se^uenti maniere. l*' Colorazione lenta progressiva. 2® Colorazione rapida regressiva. 3*^ Colorazione colle miscele di bleu di metilene ed eosina. 1^ La colorazione lenta progressiva da risultati splendidi : si effettua secondo la tecnica che abbiamo dato in principio e costi- tuisce uno dei metodi piü sicuri per la dimostrazione degli elementi eosinofili nei tessuti, quando la loro fissazione sia idonea a tale scopo. 2° La colorazione rapida regressiva si basa sul fatto che se si colora una sezione in eccesso con una soluzione forte acquosa di eosina , e la si tratta in seguito con una soluzione diluitissima alcalina, il tessuto si decolora in parte o in tutto secondo la durata XXVI, 1. Martinotti: Tecnica della dimostrazione delle cellulc eosinofilo. ] fcß -r"^ 5 ^ bC 3 o 3 3 Q ^ ^ 7v s igio-vio- cristall. allastro grigio 3 O O u 02 o tn m O 'o o C3 *> . denso erastro &c a 02 1^ a*^ o O 1 _Ä 11 J2 ;2o 3^ 92 oS _2 ^ :« bjD _. "5 02 •r- bß 3 3 bx:;S 3 s~ ^ tn O ^ t/j 02 ES) N 05 o , — s s3 d) o C8 O o es 53 .■« 03 ;^§ a bD — u SiO Iß (ß a m ^. — ! ^^ > +J 02 3 S9 SJ es o 02 53 03 tO o tl a ^ o 1 o o o o 2 o g O tn 03 tn t^ t| 02 53 > s 53 "Sc - 5 02 3 (^ -2 -= 3 a ■^ ^1 S o > o 4) ' ^ o *^ TS *§• > ^J > c^ _c o S o c .2 'S (— < o.-t; o 2 -4>^ 02 o 'ü 3 es > _s a c 3 > « o 1 O c8 es ö oE i-S Ü 43 > o -tJ Cl •>g 3 « 02 ^1 s > o > o « > 9 CO 3^ ^1 ea O 'S' ^ o o o ^^ CO « o 5^ o ü " 3 'XS o 64 Cavazza: Studi micrDchiinici e fisiolo.^^ici siii tannini. XXVI, 1. Nelle ricerche suU' andamento diurno^ raccolsi il materiale nelle diverse ore dello stesso giorno per avere dati confrontabili. I risultati otteimti quest' anuo sono abbastanza concordanti fra loro ; tuttavia aspetto la conferma di im altr' anuo di prova, prima di dedurre tutte le necessarie conclusioui. Ad ogui modo le ricerche fatte fino ad ora mi portano a riteuere : l*' Che sebbene 1' andamento quantitativo diurno dimostri im minimo verso il sorgere del sole, ed im massimo verso le ore 16 pomeridiane, i taimiui non aumentano rigorosamente col crescere della potenzialita elaborativa delle foglie, tant' e vero che in maggio e agosto si notano diminuzioni, che potrebbero perö attribuirsi ad assorbimenti del chimismo vegetale. 2^ Neil' andamento annuo della foglie si trova una diminuzione dei tannini verso il maggio, ed un massimo in settembre. 3*^ Neir andamento annuo dei tannini dei rami^ si notano niassimi in maggio, alla fine di dicembre, e in luglio ; meutre il minimo e verso il settembre-^. Pare dunqiie che, almeno per molti mesi, la qiiantita di tannino delle foglie sia in ragione inversa a quella dei rami. Sarebbe interessante estendere queste ricerche a molte altre spece vegetali , studiando anche 1' andamento dei tannini radicali, in modo da avere il diagramma completo diurno ed annuo dei tannini nelle diverse parti delle plante, onde poterne chiarire le vicende e le funzioni. Poiche non e da credere che il loro compito fisiologico si restringa ad azioni fellogeniche, ecologiche, o preservative. II tannino che si trova nel mesocarpo di tante frutta, e dentro cellule che contengono alburainoidi (quasi a precorrere gli studi del Delage sul meccanismo tanno-albuminoideo che in taluni casi supplisce al centrosoma fecondante) , il tannino ch' e a contatto con sostanze cosi iraportanti, deve avere beu altre ragioni di essere, altro influsso fisio-chimico nelle piante. 1) I miei dati si scostano dai vecchi risultati rtell' Oser (1875) , dell' Hampel, dell'EiTNER; e quasi si accordano con aicuni del Trimble, e di LeVI e WiLMER. Bologna — gennaio — 1909. [Eingegangen am 25. Januar 1909.] XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. 65 [Aus dem pathol.-anat. Institut der Kais, medizinischen Militär -Akademie in St. Petersburg. Direktor: Prof. Dr. A. Moissejeff.] Theorie und Praxis des Schleifens. Von Dr. L. W. Ssobolew. Hierzu sieben Textabbildungen. Viele praktische Ärzte, besonders aber die Chirurgen, und die Histologen haben scharfe, schneidende Instrumente nötig-. Sogar die Ärzte, welche in größeren Städten sich befinden, sind in dieser Be- ziehung nicht immer ganz zufrieden. Sie sind ja auch auf den Schleifer angewiesen. Die Schleifer aber arbeiten meist instinktiv, sie wissen nicht genau, was dieses oder jenes Instrument leisten soll, und können es nie erfahren, weil sie diese Instrumente nicht gebrauchen. Die meisten Ärzte geben sich keine Mühe, ihnen die Frage klar zu machen, sie verstehen nur die Schleifer zu tadeln und zu wechseln. Die Landärzte sind noch schlimmer daran. Wenn die Chirurgen auch nicht ganz scharfe Messer doch ge- brauchen können, ist dies ganz ausgeschlossen für die Histologen. Die Mikrotommesser haben sehr feinen Schliff, werden sehr bald stumpf, und beim Schleifen derselben sind einige Maßregeln zu be- achten , welche den Schleifern meist unbekannt sind , da sie keine Ahnung vom histologischen Schneiden haben. Es müßten also die Histologen entweder selbst ihre Messer schleifen, oder ihrem Schleifer das histologische Schneiden bekannt machen. Vielen erscheint dieses feine Schleifen sehr schwierig, etwas mysteriös und für nicht be- sonders begabte Leute unerreichbar. So dachte ich auch selber darüber, bis ich einmal, noch im achten Semester , das Schleifen des Mikrotommessers selbst zu pro- bieren w\agte. Ich war dabei beinahe verzweifelt, ich brauchte eine Schnittserie und mein Messer war nach vielem Schleifen in ver- schiedenen Geschäften doch nicht scharf genug. Mein erster Versuch Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. 5 66 Ssobolew: Theorie und l'raxis des Schleifens. XXVI, 1. war mit Erfolg gekrönt, ich habe es ebenso fertig gebracht wie der SpezialSchleifer, Später ging es noch besser, ich verstand mit der Zeit noch besser das Wesentliche beim Sclileifen, und mein Ver- fahren war zweckmäßig. Es erwies sich weiter , daß auch andere Leute sehr leicht das lernen können. Ich habe es einigen Chirurgen, einzeln als auch gruppenweise, gelehrt. Der Diener in unserem Institute ist auch mein Schüler, Er schneidet selbst auf dem Mikrotom, und bei der stetigen Übung schleift er noch besser als ich. Im Grunde der Wirkung unserer schneidenden Instrumente liegen die Prinzipe vom „Keil" und „Säge", Beim Schneiden mit den meisten Instrumenten wirken die beiden zusammen. Das scharfe Ende des Keils dringt in die Gewebe ein, seine schiefen Seitenflächen schieben dabei die Gewebsteile auseinander. Durch die Zähne der Säge anderseits wird eine Scheibe des Gewebes abgetragen und das Vordringen der Säge dadurch bewirkt. Die meisten Messer haben eine Keilform und viele kleinsten Zähne an der Schneide, sie werden nicht nur in die Tiefe gedrückt, sondern auch wie eine Säge beim Schneiden geführt. Die höchste Schonung der Gewebe erreicht man, wenn der Keil möglichst dünn und scharf ist, wenn die Säge schmal und ihre Zähne möglichst klein sind. Das Eindringen des Keils in die Tiefe geschieht nach den be- kannten in Lehrbüchern der Physik zu besprechenden Gesetzen und Formeln, Ich unterlasse die Ableitung dieser Formeln und beschränke mich mit den letzteren : die auf den Rücken eines Keils wirkende Kraft steht in demselben Verhältnis zur Widerstandskraft, wie die Rückenbreite des Keils zur Seitenlänge, Oder mit anderen Worten, bei dem gleichen Widerstände muß man für das progressive Eindringen des Keils in die Tiefe um so größere Kraft anwenden, als der Keil- rücken breiter und die Seiten kürzer sind, d, h. als der Winkel der Keilspitze größer, stumpfer ist. Die Anwendung der minimalen Kraft erleichtert die Graduierung derselben und gewährleistet eine bessere Schonung der Gewebe , aber sie ist unbedingt mit möglichster Ver- kleinerung des Winkels der Keilspitze verbunden. Diese Verkleinerung ist aber einerseits durch die Eigenschaften des Instrumentenmaterials, anderseits durch die der zu schneidenden Objekte begrenzt. Die lauge und schmale Schneide des Keils wird sehr bald abgebrochen bei hartem oder gebogen bei weichem Stahl und desto eher, je XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. 67 härter das Objekt ist. Es ist darum nötig für verschiedene Objekte die Instrumente von verschiedenen Btahlarten und aucli mit ver- schiedenen Winkeln herzustellen. Empirisch ist das Optimum dieser Eigenschaften für verschiedene Fälle festgestellt. Für die weichen, zarten Organe, welche von der Gewalt sehr leiden können, wie z. B. Auge, Gehirnsubstanz, werden möglichst schmale, bei spitzem kleinem Winkel geschlitfeue Messer gebraucht. Die Messer für die gewöhn- lichen Arbeiten, also zum Schneiden von Haut, Muskeln usw. macht man solider und schleift beim größeren Winkel bis etwa 30°. Schließ- lich sollen die Instrumente , wie Meißel , Raspatorien usw. für die erfolgreiche Wirkung einen AVinkel von etwa 60*' haben. Ihre Spitze soll sicher fest sein , die Kraftökonomie kommt bei der Arbeit mit diesen Instrumenten nicht in Betracht. Die Instrumente werden viel leichter und bequemer, und ihre Schneide dringt gut ein und ist dauerhaft, wenn sie nicht einfachen, sondern komplizierten, doppelten Keil darstellen. Die ganze Klinge hat dabei einen kleineren Winkel und ist schmal und leicht, nur die Schneide wird bei etwas größerem Winkel geschliffen und wird dadurch viel mehr leistungsfähig (s. Fig. 3). Es wird darum die Fähigkeit zum Eindringen in die Tiefe bei den meisten Instrumenten durch die Größe beider Winkel bedingt: erstens des Winkels der Schneide oder des Schliffwinkels und zweitens des Winkels der Klinge selbst. Während der Arbeit wird die Schneide abgestumpft, d. h. ab- gerundet, abgeplattet oder einfach seitlich verbogen. Längs der Schneide bilden sich dabei Dellen, Defekte, oft unrichtig Zähne ge- nannt. Die Schneide stellt dann keine richtige gerade oder krumme Linie dar, und auf dem Durchschnitt hat sie auch keinen spitz endigen- den Winkel mehr. Das Schleifen auf dem Steine besorgt beides. Eine oberflächliche Stahlschicht wird von den beiden Schlift'seiten abge- tragen, dadurch wird die Schneidelinie wieder eben und der Schneide- winkel spitz. Natürlich muß jedesmal dieselbe Inklination der Klinge zur Steinfläche , derselbe Schneide- bzw. Schliffwinkel beibehalten werden. Schon die Veränderung dieses Winkels allein kann manches Instrument für seine gewöhnliche Arbeit unbrauchbar machen. Man bekommt dabei selbstverständlich eine zu schwache oder zu starke, dicke Schneide. Die Mikrotommesser, welche immer in derselben bestimmten Lage befestigt werden (Weigert sehe Form oder einfacher Messerhalter) , können nicht mehr serienweise schneiden , wenn sie einmal zu steil geschliffen waren. Es kommt dabei zunächst in Be- 68 Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. XXVI, 1. Führung mit dem Objekt nicht die eigentliche Schneide-SchliftVinkel- spitze , sondern der Winkel zwischen den Flächen von Schliff und Klinge. Dieser Winkel drückt auf das Objekt , es kommen keine Schnitte heraus. Schließlicli bei etwas gröberer Einstellung kommt in Berührung mit dem Objekt die Schneide selbst und schneidet es an. Gleich aber darauf hebt die schief zum Horizont stehende Schlitfebene die Schneide bogenweise nach oben. Man kann dabei sich etwas helfen, wenn man den Messerrücken auf diese oder jene Weise hebt. Die geschilderten Nachteile und Übel werden bei den Mikrotom- messern durch die genau passenden Abziehvorrichtungen vermieden. So eine Vorrichtung wird auf den Messerrücken aufgezogen, mit dem Messer zusammen geschliifen und gibt immer denselben Schlitfwinkel. (Streng mathematisch — nicht denselben, weil die Klinge mit der Zeit schmäler, die Vorrichtung aber nicht dementsprechend abgeschliffen wird.) Das ist nur dann richtig, wenn jedem Messer eine spezielle Abziehvorrichtung entspricht. Man kann diese Inklination auch mit der freien Hand geben, aber diese Hand muß fest und geübt sein. Auch dem geübten Schleifer gelingt es nicht immer, den richtigen SchUffwinkel zu wählen, ist es dabei doch nötig, einen entsprechenden Messerhalter zu ge- brauchen, welcher die Neigung des Messers zu wechseln gestattet. Für die Messer für Paraffin- und Gefrierschnitte eignen sich mehr dickere Abziehvorrichtuugen , welche ihren Rücken beiderseits umfassen und verdicken. Diese Vorrichtungen haben die Form eines zylindrischen Rohres mit einer Rinne längs desselben für die Auf- nahme des Messers, welches durch eine Feder oder Schraube be- festigt wird (s. Fig. 1, 3 u. 4). Es werden auch solche Vorrichtungen gemacht, welche aus zwei etwas gegeneinander verschiebbaren Metall- platten bestehen. Diese werden an die Messerseiten angedrückt und durch zwei Schrauben befestigt. Um eine ganz schmale Schneide zu haben, schleift man die Messer für Celloidin (a) mit Abziehvorrich- tung aus Draht, die nur an die untere Seite des Messers angebracht wird. Die obere Seite dieser Messersorte ist hohl, konkav gemacht und läßt sich bequem direkt schleifen, auf dem Steine mit der Schneide und dem Rückenrand liegend (s. Fig. 2). Das Instrument auf dem Steine wird stets die Schneide nach vorne geführt. Man fängt an einem Ende des Steins mit der Messerferse, d. h. mit dem dem Griffe nächsten Teile der Klinge, an, zieht das Messer gegen sich und schließt die Bewegung an dem XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. 69 anderen Ende des Steines mit der Messerspitze. Die Messer mit gerader Schneide verlangen dabei keine Veränderung der zuerst ge- gebenen Lage ; Icrumme Schneide mit einem Bauch macht aber eine entsprechende Drehung mit der Spitze nach vorne notwendig. Um STEIN STEIN F'ig. 1. Das Schleifen des biplanen Mikrotommessers (c) auf dem Steine. Die Richtung der Bewegung ist durch den Pfeil gezeigt. Fig. 2 zeigt dasselbe wie Fig. 1 mit dem dünnen , plankonkaven Messer (a). In beiden Figuren sind auch entsprechende Abziehvorrichtungen angedeutet. dem Messerbauche auch dieselbe Neigung, denselben Schliftwiukel zu geben, ist jetzt nötig, nicht den Messerrücken, sondern den Griff zu heben. Für die Anfänger ist es besser und sicherer in Berührung mit dem Steine immer zuerst den Messerrücken , dann auch die 3. Fig. 3 zeigt, wie das Messer durch vieles Schleifen schmäler und an der Schneide dicker wird. Die teilweise schwarz gestrichene (Dreieck auf dem Durchschnitt) Stahlplatte a b soll schließlich abgeschliffen werden. 4. Fig. 4. Das Abziehen auf dem Rie- men. Der Pfeil zeigt die Bewegungs- richtung, die punktierten Linien sollen die nachgebende Riemenoberfläche darstellen. Schneide zu bringen und erst jetzt die nötige Neigung zu geben. Nur eine ziemlich große Übung gestattet , das Messer direkt schon in eine Winkellage zur Steinfläche zu bringen. Wenn man also zum Ende der Steinfläche gekommen ist, wiederholt man die Bewegung in entgegengesetzter Richtung mit der anderen Seite des Messers. Ein sehr stumpfes Messer kann man zuerst von einer Seite , ohne 70 Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. XXVI, 1, umzudreben , in beiden Richtungen schleifen, und dann von der an- deren ; aber es empfielilt sich nicht dies oft zu machen. Es ist besser, immer gleich nacheinander die Seiten zu wechseln, es wird dabei der Schliif beiderseits viel gleichmäßiger. Es ist nicht nötig, das Messer gegen den Stein stark zu drücken, es wirkt sogar schädlich, wenn ein feiner Schliff erforderlich. Man läßt das Messer beinahe nur mit seinem eigenen Gewichte gegen den Stein drücken. Für sehr stumpfe Messer ist wieder auch von dieser Regel eine Ausnahme zulässig. Man schleift sie bei gewissem Druck sogar auf dem grobkörnigen Steine , um die ziemlich dicke Stahl- schicht abzutragen, aber wenn das Messer beginnt scharf zu werden, unterläßt man jeden Druck. Der Druck beim Schleifen, sowie die Führung des Messers den Rücken nach vorne , begünstigen die Bildung des Grates , welcher auch beim überflüssigen Schleifen immer gebildet wird. Den „Grat" nennt man eine sehr schmale nachgiebige Metallplatte, die auf der freien Seite der Schneide gebildet wird. Der Nachgiebigkeit, Elasti- zität wegen ist dieser Grat mit dem weiteren Steinschleifen schwer abzutragen, sogar umgekehrt, je länger man schleift, desto größer wird sie bis zu gewisser Grenze und ihre Elastizität wächst etwas mit ihrer Größe. Es ist ganz klar und augenscheinlich, daß der Grat beim rich- tigen Schleifen ohne Druck und die Schneide nach vorne minimal wird. Der Grat besitzt keine Arbeitsfähigkeit, schon bei erster Be- rührung mit dem zu schneidenden Objekte wird er seitlich abgebogen, mit ihm aber auch ein Teil der eigentlichen Schneide. Es ist darum beim Schleifen außerordentlich wichtig, das Ende des nützlichen Schleifens und den Anfang der Bildung des Grates zu bestimmen. Manchmal ist es doch unmöglich, die Bildung des letzteren zu vermeiden, und zwar, wenn die Schneide einige Dellen oder besonders stumpfe Stellen besitzt, die geebnet werden sollen. Die Dellen, die wenig gelitten haben, werden dabei über das Maß geschliffen. Der ein- mal gebildete Grat ist durch Abziehen auf dem Riemen wegzubringen. Die Mikrotommesser , wenn sie nicht allzusehr abgestumpft sind und jedes seine eigene Abziehvorrichtung hat, sind sehr leicht auf dem Steine bis zum richtigen Grade zu schleifen. Man braucht das Messer nur 5- bis lOmal in jeder Richtung zu führen. Die Bestimmung des Endes vom nützlichen Schleifen ist darum beinahe das wichtigste Moment der ganzen Prozedur und verlaugt eine gewisse Übung und sogar Kunstfertigkeit. Am besten ist sie XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. 71 vermittelst des Daumens ausznfüiiren. Den Messergriff hält man mit einer Hand, seinen Rücken legt man auf die vier Finger der anderen und probiert mit dem Daumen dieser letzteren. Wenn aber das Messer nur von einer Hand gehalten wird, und seine Schärfe von einem Finger der anderen bestimmt wird , so ist diesmal die Koor- dination der Bewegungen zweier Hände viel gröber, als die zuerst beschriebene — der Finger ein und derselben Hand. Die Folgen davon sind ersichtlich — die Schärfe wird nicht bestimmt, und die Finger werden oft blutig geschnitten. Wenn aber der Jlnger bei richtiger Lage längs der Schneide geführt wird , so gewinnt man eine klare Vorstellung über deren Charakter, ob die Schneide sclrarf, ob sie Dellen und Grat hat, nach welcher Seite ist der letztere ab- gebogen und schließlich , was für ein Stein gebraucht , ob er grob- 5. Fig. 5. Abziehen auf dem Riemen ohne Abziehvorrichtung. Die Wirkung der letzteren ist durch die Nachgiebigkeit des mit freier linker Hand gehaltenen Riemens ersetzt. oder feinkörnig war. Auf der stumpfen Schneide gleitet der Finger ganz glatt, eine scharfe Schneide dringt in die Tiefe des Epidermis ein und um so weniger merklich, je feiner, glätter der Schliff ist. Im besten Falle merkt man das Eindringen des Messers erst beim Ab- nehmen des Fingers. Darum muß man als Regel beachten, jedes Messer mit unbekannter Schärfe als sehr scharfes zu probieren, d. h. den Finger beständig nur ganz kurze — 2 bis 3 cm lange — Strecken zu führen, denselben abzunehmen und dann gleich mit der Probe weiterfortzufahren. Alles dies ist viel leichter und schneller gemacht als geschrieben. Schließlich bei einer gewissen Übung ist es ganz leicht auf diese Weise zu bestimmen, ob das Messer 10 oder 5 fx dick schneiden kann. Bei dieser Probe habe ich noch nie meine Finger blutig geschnitten (s. Fig. 6). Diese Probeart ist unentbehrlich beim feinen Schliff, aber sie ist unbequem für die Chirurgen, weil dabei in der Epidermis eine Reihe kleiner, seichter Schnitte gebildet wird und in diesen Schnitten in- 72 Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. XXVI, 1. fektiöse Verunreinigungen festsitzen können. Die cliirurgisclien In- strumente bedürfen auch keines besonders feinen Scliliffes, wie z. B. Mikrotommesser und für sie genügt auch eine gröbere Probe der Schärfe gegen die Haare am Hinterkopf. Das geschieht so : das Messer wird unter einem spitzen Winkel gegen die Haare gestellt, die Schneide nach unten, und durch kleine kurze Bewegungen nach unten wird es bestimmt, ob das Messer an den Haaren greift. So wird die ganze Länge der Schneide aus- 6. Fig. 6. Photogramme der Probe mit dem Daumen eines Mikrotommessers. probiert ; das Messer muß bei der krummen Schneide entsprechend umgedreht werden. Wenn es überall leicht die Haare oberflächlich anschneidet, kann man das Schleifen lassen und zum Abziehen mit dem Riemen übergehen. Am Hinterkopf sind keine Spuren auch der mehr- maligen Probe zu merken, die Haare werden nicht abrasiert (s. Fig. 7). Oft versucht man die Schärfe der Messer (meist Tafel- und Federmesser) durch das Führen der Finger quer gegen die Schneide, durch das Abreiben mit derselben zu bestimmen. Bei dieser sehr groben Probe wird eine fein geschlitfene Schneide übersehen und sicher verdorben. Diese Probe soll darum in der Küche bleiben. Die Probe mit dem freien Haare kann nur an einem abgezogenen Messer ausgeführt werden. Darüber sage ich ein paar Worte später. XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. 73 Nun taucht selbstverständlich die Frage auf, was das Schleifen mit dem Steine allein leisten und ob man sich damit begnügen kann. Das Endresultat vom Schleifen ist natürlich von der Härte des Stahls, sowie von der Korngröße des Steines abhängig und dem- gemäß verschieden. Der Schliff ist desto feiner, je härter (bis zu gewissem Grade) der Stahl, und je feiner der Steinkorn ist. Der Grat bildet sich in diesem Falle nur in geringstem Umfange und der Schneiderand, im Mikroskop beobachtet, stellt eine Linie mit sehr feinen Zähnen und Dellen, der Steinkorngröße entsprechend, Fig. 7. Photogramme der Probe eines Messers gegen die Haare am Hinterkopf. dar. Auch im günstigsten Falle ist also die Schneide sägeartig und mit einem Grat versehen. Diese Schneide ist nicht dauerhaft und noch des Abziehens mit dem Riemen bedürftig. Hier möchte ich auch ein paar Worte über das Abschleifen sagen. Die Klinge selbst wird mit der Zeit vom Schleifen schmäler und die Seiten des Schliffwinkels bedeutend breiter. Dann drücken und pressen diese Seiten das zu schneidende Objekt und verhindern das Eindringen der Schneide in die Tiefe. In diesen Fällen ist es nötig, dem Messer seine ursprüngliche Form wiederzugeben. Es ge- schieht durch das Abtragen kleiner Stahlplättchen (s. Fig. 4, ab) von beiden Seiten des Messers, durch das Abschleifen. Das Abtragen geschieht nicht gleichmäßig auf der ganzen Fläche, sondern an der Schneide mehr und am Rücken am wenigsten. Das Abschleifen wird 74 Ssobolew: Theorie und Praxis des Sclileifens. XXVI, 1. bewirkt auf einem Gestell durch eine schnell drehbare Kreisplatte mit aufgetragenem Schmirgelpulver. Dabei muß streng beachtet werden , daß die Seiten der Klinge denselben Charakter behalten, daß z.B. die flache Seite nicht in eine konkave umgewandelt wird usw., und daß der Härtegrad des Stahls auch unverändert bleibt. Über alles dies muß der Meister genau unterrichtet werden, da das Abschleifen natürlich nur von den Meistern in den Anstalten ausgeführt werden kann. Das Abziehen geschieht nun auf einem weichen nachgiebigen Material, auf dem Riemen. Das Messer wird dabei mit dem Rücken nach vorne geführt und unter demselben Winkel wie beim Schleifen. Wie auf dem Stein, so auch hier wird für jede Seite der Klinge die ganze Länge des Riemens ausgenützt. Auf einer Seite schiebt man die Messerspitze nach vorn, auf der anderen die Ferse gegen sich. Auf die andere Seite kehrt man das Messer, wenn man es nicht heben will , stets über den Rücken um , sonst wird die Schneide beschädigt. Man übt nur einen ganz kleinen Druck aus und fährt mit dem Messer etwas schneller, als wie auf dem Steine vorwärts. Zum Schluß wird die untere Seite abgezogen, dann sehen die noch eventuell bleibenden kleinen Zähne und Grat nach oben, was natürlich nur für Mikrotommesser von Bedeutung ist. Die Wirkung der Riemen ist wegen ihrer Weichheit von der des Steines grundverschieden. Das eigentliche Schleifen ist dabei sehr gering oder bleibt aus, aber infolge der Nachgiebigkeit der Riemen macht die Schneide eine kleine Vertiefung auf ihrer Oberfläche, und darum wirkt der Riemen auf den Schneiderand unter einem größeren Winkel , als wie das Schleifen zuerst geschah (s. Fig. o). Demnach wird der Grat umgebogen und fällt ab, mit ihm auch die kleinen Zähne , die Schneide wird glatt und eben. Das läßt sich gleich mit dem Finger, auch unter dem Mikroskop konstatieren. Sie ist jetzt auch schärfer, sie dringt viel leichter in die Tiefe der Epidermis ein , was auch ganz klar mit der Haarprobe ist. Mit diesem dritten AVinkel (Abziehwinkel) ohne Grat ist die Schneide viel dauerhafter und arbeitsfähiger, als wie früher, das Messer ist ganz zur Arbeit bereit. Es ist vorteilhafter, ein auf dem gröberen (aber nicht allzu groben, z. B. Schiefer-) Steine geschliftenes und dann abgezogenes Messer zu haben, als ein sogar mit dem feinsten, z. B. Arkansassteine geschliffenes und nicht abgezogenes. Wenn das Instrument nicht besonders abgestumpft ist , ist es möglich, dasselbe durch das Abziehen wieder scharf zu machen und die Prozedur mit Erfolg noch einige Male zu wiederholen. Das XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des öchleifens. 75 Messer muß aber schließlich wieder mit dem Steine geschlifFen werden, weil durch das wiederholte Abzielien die Schneide allzusehr abgerundet wird: sie dringt dann schlecht ein, trotzdem sieht sie unter dem Mikroskop ganz glatt aus. Mit dem Finger ist aber der Zustand sehr leicht zu bestimmen. Darum empfehle ich die Fingerprobe ; mit dem Mikroskop sieht man nur Zähne und Dellen , wenn aber keine da sind, so sieht das stumpfste Messer genau so wie das schärfste aus. Die Probe mit dem frei in der Hand gehaltenen Haare ist auch mehr ein Spiel als eine ernste Probe. Es geht hoffentlich klar aus dem oben Geschilderten hervor. Weiter kann das Abziehen nicht schon darum das Schleifen ersetzen, weil sogar die kleineren Dellen nicht beseitigt werden. Der nachgiebige elastische Riemen kommt in dieselben hinein, er reibt und schärft ihre Oberfläche ebenso wie die der übrigen Schneide. Das Schleifen steht also zum Abziehen in demselben Verhältnis, wie das Abschleifen zum Schleifen selbst im engeren Sinne. Nun gehe ich zu den Materialien , welche zum Schleifen und Abziehen dienen — den Steinen und Riemen über. Die Steine sind natürliche oder künstliche Komplexe der kleinen festen Partikelchen- körner, welche den Stahl streichen, abreiben können. Der Schleif- stein muß selbstverständlich gleichartig sein, d. h. die Körner müssen von gleicher Größe und gleichmäßig voneinander entfernt sein. Die Unregelmäßigkeiten dieser Art, die sogen. „Knorren", sind oft schon mit dem bloßen Auge zu sehen und noch besser lassen sie sich, wie auch die Korngröße durch die Hand bestimmen. Am besten ist es, für mich wenigstens, durch die Ulnarseite des Kleinlingers oder durch die Thenarwölbung zu probieren. Meist ist der Stein um so billiger, je grobkörniger er ist und um so gröber und schneller schleift er. Die gebräuchlichsten Stein- sorten sind folgende. 1) Der rötliche natürliche Sandstein kostet etwa 50 Pfg. Der Stein wird beim Schleifen mit Wasser Übergossen, der Schliff ist schnell zu bekommen, aber etwas grob. Doch kann das geschliffene Messer, nachher auf dem Riemen abgezogen, sogar die Haare rasieren und ist darum auch für die einfaclien Operationen und für Leichensektionen brauchbar. Der Stein ist in Rußland besonders in verschiedenen Ge- werben verbreitet. Die gröberen Steinsorten ziehe ich nicht in Betracht. 2) Der graue natürliche Schleifstein aus dem Schiefer kostet das Stück etwa ^j^ bis 1 Mk. Der Stein wird beim Schleifen mit Wasser oder mit Öl befeuchtet. Der Schliff geht langsam, ist aber 76 Ssobolew: Theorie und Praxis des Scbleifens. XXVI, 1. viel feiner. Die Steine sind beinahe durchaus gleichartig. Das rich- tig mit diesem Steine geschliffene und dann sorgfältig mit einfachem Riemen abgezogene Mikrotommesser kann Schnitte von 10 bis 15 ju Dicke geben. Die chirurgischen Instrumente werden mit diesem Steine ganz gut geschliffen. Er ist also ein Universalschleifstein. Der Namen paßt für ihn schon deswegen gut, weil er überall zu haben ist. Wenn es keine speziell dazu gehauenen Schleifsteine gibt, dann kauft man die in den Schulen gebrauchte Schiefertafel, sägt ein Stück- chen daraus, klebt es mit Leim auf ein Holzklötzcheu, — der Schleif- stein ist fertig und kostet eine Kleinigkeit. 3) Der gelbe belgische Schleifstein (vermutlich künstlich gemacht, aber nicht immer gleiclimäßig), kostet je nach der Größe 3 bis 10 Mk. Man schleift auf dem mit Öl beschmierten Steine langsam, der Schliff ist 'fein, ganz gut für die Mikrotommesser brauchbar, selbstverständ- lich auch für alle chirurgischen. Für die letzteren ist es besser, die untere Seite des Steines vorzuziehen, welche mit einer Platte etwas gröberer Steinsorte von bräunlicher Farbe bedeckt ist. 4) Der weiße amerikanische natürliche Schleifstein Arkansas- oder Mississipi- Stein genannt, kostet je nach der Größe 2 bis 20 Mk. Sein Korn ist sehr hart und fein, dementsprechend ist auch der Schliff sehr fein, ist aber sehr langsam zu bekommen. Der Stein ist natürlich für alle Fälle brauchbar, besonders aber für diejenigen, wo das Abziehen mit dem Riemen sehr schwierig oder ganz un- möglich ist, wie es bei manchen äugen- und zahnärztlichen Instru- menten der Fall ist. Sehr stumpfe Messer ist es vorteilhaft zuerst mit einem grob- körnigen und dann mit feinerem Steine zu behandeln, dadurch wird manchmal viel Zeit erspart. Der Stein soll beim Schleifen immer mit einer Flüssigkeit be- schmiert sein. Das trockene Schleifen der großen Instrumente, z. B. Holzsägen mittels besonderer Maschinen, sogar mit Dampfbetrieb, kommt hier nicht in Betracht, es geschieht unter anderen Bedingungen. Bei dem hier zu besprechenden feineren Schleifen auf dem trockenen Steine werden sehr bald die Räume zwischen den einzelnen wirken- den Körnern des Steines fest mit Stahlpartikelchen ausgestopft. Die Oberfläche wird dadurch geebnet, der Stein greift den Stahl weiter schlecht und ungleichmäßig an. Das geschieht aber nicht, wenn die Steinoberiiäche mit einer Flüssigkeit begossen wird, in der die Stahl- und auch Steinpartikelchen suspendiert bleiben. Dazu sind folgende Flüssigkeiten gebräuchlich : einfaohes und Seifenwasser , Petroleum XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. 77 und Olivenöl. Je dicker die Flüssigkeit, je weniger beweglich sie ist, um so fester bleibt sie in den oben genannten Zwischenräumen unter dem darüberfahrenden Messer sitzen. Dadurch wird die Höhe einzelner Körner herabgesetzt und der Stein wie in einen feineren umgewandelt. Es ist also möglich auf ein und demselben Steine einen gröberen oder feineren Schliff zu erzielen, je nachdem ob man Wasser oder Olivenöl gebraucht. Dickere Flüssigkeiten bewahren auch den Stein vor zu schneller Ausnutzung und Aushöhlung. Die Mikrotommesser M'crdeu natürlich nur mit Ol geschliffen. Nach dem Schleifen mit einem Steine soll das Messer von den daran haftenden Stahl- und Steinpartikelchen sorgfältig mit saubeter Leinwand befreit werden. Die Schneide faßt man dabei von beiden Seiten mit zwei Fingern durch die Leinwand und zieht die Finger nach abwärts. Die Körner eines gröberen Steines, einmal auf den feineren Stein oder den Riemen aufgetragen, stören später den feinen Schliff. Die Steine kann man leicht davon befreien, die Riemen aber sehr schwer ; die letzteren können also dadurch manchmal ver- dorben und für feinen Schliff unbrauchbar werden. Wenn mit Wasser geschliffen wird, so muß der Stein gleich nach dem Schleifen gut abgewaschen und später vor der Verunrei- nigung mit Fettsubstanzen geschützt sein. Fette bekommt man durch Waschen mit Seife heraus. Die mit Öl durchgetränkten belgischen Steine schleifen gleich- mäßiger, darum ist es vorteilhafter, besonders die neuen Steine erst vor dem Schleifen zu putzen und nach dem Schleifen nicht zu rei- nigen. Es ist ja sowieso ein neues Putzen vom Staube vor dem Schleifen wieder notwendig. Das für Schleifen gebräuchliche Olivenöl ist zu filtrieren und in besonderen Gläsern, wie sie für Säuren gebraucht werden — Glasstöpsel und darüber Glashut — staubfrei aufzubewahren. Sonst haften am Rande der Glasöftnung Staubpartikelchen, darunter auch Sand usw., die dem feinen Schliffe viel schaden. Zum Abziehen wählt mau Riemen, möglichst feinfaserige und glatte. Es wird nicht die obere mit Epithel versehene Seite der Haut benutzt, sondern die untere mit dem Bindegewebe. Von dieser unteren Seite bringt man das lockere Unterhautzel^ewebe mit Glas- papier weg und kommt zum Korium mit seinen feinen engdurchfloch- tenen Fasern. So ein Riemen wird auf einem Holzbrette aufgezogen, als Unterlage nimmt man Filz, das überall dem ganzen Riemen ent- lang gleichmäßig federt und nachgibt. Das ist besonders wichtig 78 Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. XXVI, 1. und notwendig für die Messer mit geradliniger Schneide, für die Mikrotommesser. So konstruierte Riemen , amerikanischer Herkunft, wenn man der Anfsclirift glauben will, sind auch im Handel zu fin- den, sind aber sehr teuer, etwa 5 Mk. Es ist aber leicht, so einen Riemen für einige Pfennige selbst zu machen. Andere Sorten der Riemen, die z. B. zwischen zwei Punkten aufgespannt sind und keine Unterlage besitzen, federn und geben an verschiedenen Stellen ver- schieden nach und sind daher für die Mikrotommesser nicht zu emp- fehlen, für die einfachen Messer aber wohl. Wenn man als Unter- lage bei diesen Riemen ein schmales Holzbrettchen benützt , wie es bei sehr gebräuchlichen Riemen der Fall ist, so wird das Federn sehr vermindert, bleibt aber im Grunde doch ungleichmäßig. Die Riemen anf dem viel gebrauchten vierseitigen Klötzchen sind direkt auf dem Holze aufgeklebt, federn fast gar nicht und das Abziehen wird ungenügend. Darum werden diese beiden Riemen- sorten immer mit feiner Schmirgelsalbe beschmiert und wirken dabei eher wie ein künstlich hergestellter Schleifstein. Es ist schließlich ganz gut möglich, ein Messer ohne besondere Vorrichtung abzuziehen, wenn man den einfachen Riemen an einem Ende befestigt und das andere Ende mit der freien linken Hand hält (s. Fig. 5). Diese Hand reguliert die Nachgiebigkeit des Riemens und macht die In- klination des Messers unnötig. Ein Messer kann sogar auf dem Oberschenkel abgezogen werden, dessen Muskeln genug federn. Im Handel findet man auch die Salben, welche aus dem feinen, in einem dicken Fette verteilten Schmirgelpulver bestehen, die schwarze ist gröber, die rote — feiner. Die Riemen, mit dieser Salbe be- schmiert, können auch etwas schleifen, aber dann ist es zweck- mäßiger, die Elastizität des Riemens zu beseitigen, indem man den Riemen auf eine feste Unterlage klebt. So eine Salbe kann man auch ganz gut entbehren, wenn man einen Schleifstein hat ; die damit beschmierten Riemen stellen nur ein Surrogat des Steines und der Riemen dar. Nun möchte ich das Schleifen einzelner Instrumente etwas ein- gehender beschreiben. Wenn die Schneide vor allem dauerhaft sein soll und die damit ausgeführte Arbeit grober Art ist, so wird das Instrument sehr steil geschliffen. Die technischen Instrumente, welche das Eisen hauen und hobeln, werden unter einem, dem rechten (90°) nahen Winkel geschliffen. Die medizinischen Instrumente , welche die Knochen behandeln, die chirurgischen Meißel und die zahnärzt- lichen Instrumente schleift man unter einem Winkel von etwa 60*^ Grad und braucht nicht abzuziehen. Die Scheren werden auf dem XXVI, 1. Ssobolew: Theorie und Praxis des Schleifens. 79 Drelisteine unter etwa 45^ gesclilitfen. Die Scheren sowie die Sägen werden meist recht befriedigend von den Schleifern behandelt und bleiben lange Zeit scharf genug. Die meisten chirurgischen Messer bekommen ganz guten Schüft* auf dem Schiefersteine unter 20 bis HO*' und sind noch nachher abzuziehen. Von den Mikrotommessern ist oben genug gesagt. Das einfache Rasiermesser wird auch ebenso flach geschliften, wenn es aber nicht die Schnitte zum Mikroskopieren machen , sondern die Haare rasieren soll, so wird es ziemlich steil abgezogen. Nur dann kann es reiz- und schmerzlos rasieren, da es an den Haaren nicht zieht. Es kann jetzt die Haare nur dann schneiden, wenn sie es nur quer triff"!, t^iu flach abgezogenes Rasier- messer schneidet die Haare auch unter einem spitzen Winkel an, zieht sie längs aus und macht dadurch das Rasieren schmerzhaft. Diese Unbequemlichkeiten lassen sich auch bei den Experimenten merken, wenn die zarte Haut kleiner Tiere abrasiert sein soll. Die Haut wird dann oberflächlich beschädigt, sehr blutreich und sogar mit kleinen Blutungen durchsetzt , was für die folgende Operation, sowie Heilung der Wunde keine Vorteile bietet. Es bleiben mir noch ein paar Worte über das Konservieren der scharfen Schneide zu sagen. Wenn das Messer trocken und unerwärmt bleibt, so schützt man seine Schneide vor etwaiger Oxydation durch das Eintauchen in ge- schmolzenes Paraffin oder Fett. Beim Kochen chirurgischer Messer wird ihre Schneide durch das Anstoßen gegen andere Instrumente leicht beschädigt. Darum ist es empfehlenswert, ihre Klingen vorher in Watte einzuwickeln, oder, wenn es sich bloß um ein Messer han- delt, es allein in einem Reagenzglase auf einer Watteunterlage aus- zukochen. Aus den Angeboten in Zeitschriften weiß ich, daß in England dafür besondere Schlitten mit federnden Ösen konstruiert sind. Die Ösen umfassen das Messer am Halse und am Handgritf wie im Etui fest und das Ganze wird im Reagenzglase ausgekocht. Ich habe hier auch das Schleifen der dem Mikroskopiker schein- bar unnötigen chirurgischen Instrumente besprochen , aber jetzt ge- winnen viele Biologen ihr Material für mikroskopische Studien erst durch das Experiment und bei diesem haben sie alle möglichen chi- rurgischen Instrumente nötig, sie müssen diese Instrumente auch steri- lisieren und ihre Tiere auch eventuell tadellos abrasieren. [Eingegangen am 29. März 1909.] 80 Meyer: Der Suchtisch II (Perquirator). XXVI, 1. Der Suchtisch II (Perquirator). Von Prof. Dr. Arthur Meyer in Marburg. Hierzu zwei Textabbildungen. Ein schnelles und sicheres vollständiges Durchsuchen eines mikroskopischen Präparates läßt sich bei Führung des Präparates mit der Hand, ja selbst bei Benutzung eines gewöhnlichen Kreuztisches kaum erreichen. Dieses veranlaßte mich schon 1900 einen einfachen Kreuztisch bauen zu lassen , der das Objekt automatisch um eine Sehfeldbreite verscliiebt. Dieser als Suchtisch I von W. u. H. Seibert in Wetzlar (Preisliste 1909, No. 71) für 36 Mk. zu beziehende Ap- parat ist von mir schon 1901 (A. Meyer, Die Grundlagen und die Methoden der mikroskopischen Untersuchung von Pflanzenpulvern, Jena 1901, p. 246) empfohlen und bezüglich seiner Anwendung er- läutert worden, aber erst 1908 (Archiv d. Pharmazie Bd. CCXLVI, 1908, p. 532) abgebildet und beschrieben worden. Dieser einfache, in erster Linie für die Mikroskope von Seibert bestimmte Suchtisch I ist auch zur quantitativen mikroskopischen Untersuchung von Pulvergemengen , vorzüglich von Pflanzenpulvern nach meiner Methode , welche im Archiv der Pharmazie an der an- geführten Stelle und in der Zeitschrift für die Untersuchung der Nahrungs- und Genußmittel sowie der Gebrauchsgegenstände (1909) beschrieben worden ist, anwendbar. Vollkommener und für beliebige Mikroskope und Linsenkombina- tionen passend, ist der ebenfalls auf meine Veranlassung von Seibert in Wetzlar gebaute Suchtisch II (Der Perquirator), den Seibert unter No. 72 für 100 Mk. in seiner Preisliste anbietet. Ich gebe eine kurze Beschreibung des Instrumentes. Der Perquirator ist im wesentlichen ein Kreuztisch mit zwei zueinander senkrechten Bewegungen, und kann auch genau wie ein anderer Kreuztisch gebraucht werden, wenn der Knopf F (Fig. 2) in die Mittelstellung gebracht wird, so daß das den Suchtisch aus- zeichnende Radgetriebe ausgeschaltet ist. XXVI, 1. Meyer: Der Suchtiscli II (l*er(|uirator). 81 Die Bewegunj^ von vorn nach liinten wird auch wie bei den gewöhnlichen Kreuztischen durch ein Triebwerk ausgeführt , die Spindelschraube (S) aber, welche die seitliche Bewegung bewirkt, ist mit einer Vorrichtung, welche aus zwei Zahnrädern besteht, ver- bunden, die es ermöglicht, das in den Apparat eingefügte Präparat durch Bewegung des Hebels // um ein bestimmtes Stück quer zu 1. Suchtisch II (Perquirator), ein beweglicher Objekttisch mit genauer Einstel- lung auf den Durchmesser des Sehfeldes beliebiger Linsen des Mikroskopes. Zu beziehen von W. u. H. Seibert in Wetzlar. verschieben. Durch verschiedene Feststellung des auf einer gra- duierten Kreisscheibe beweglichen Index J (Fig. 2) kann die Wirkung des Hebels so reguliert werden , daß er zwischen 1 bis 35 Zähne greift. Die Zahnräder sind nun so im Verhältnis zur Steigung der Schraube hergestellt, daß die Verschiebung um einen Zahn immer 0*1 mm beträgt. So ist es möglich, den Apparat annähernd für jedes beliebige Sehfeld, dessen Durchmesser zwischen O'l und 3"5 mm liegt, einzustellen, so daß dann bei jeder vollständigen Auf- und Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. b 82 Meyer: Der Suchtisch II (Perquirator). XXVI, 1. Abwärtsbewegung des unteren Hebels das Objekt fast genau um die Sebfeldbreite seitlich fortbewegt wird. Wenn die Sehfeldbreite ge- messen ist, so kann man die Einstellung durch Stellen der oberen scharfen Kante des Index auf die betreffende , die Millimeter be- zeichnende Zahl der Kreisteilung ohne weiteres ausführen. Ist der Durchmesser des Sehfeldes nicht bekannt, so kann man die Ein- stellung folgendermaßen ausführen. Man klemmt einen Objektträger mit irgendeiner kleinen Marke , eventuell auch einen Objektmikro- meter in den Apparat ein , und stellt die Marke so ein , daß sie genau von der linken Grenzlinie des Sehfeldes getroffen wird. Man dreht nun zuerst den Hebel H ganz nach vorn und unten, bis er den Stift ]ß (Eig. 2) berührt, stellt dann den anfangs in die mittlere Suchtisch II (Perquirator) von der Seite gesehen. Stellung gedrückten Knopf {F) , von dem wir noch reden werden, rechts, lockert das Schräubchen des Index und schiebt den letzteren dicht an den Hebel H heran. Nun bewegt man vorsichtig den Hebel H nach sich zu , indem man zugleich im Mikroskope die Be- wegung der Marke verfolgt. Hat diese die gegenüberliegende Grenze des Sehfeldes erreicht, so klemmt man den Index fest, und hat damit den Hebelspielraum für die Sehfeldbreite so genau eingestellt, wie es die Räder gestatten. Handelt es sich nur um die Verwendung des Perquirators zum Absuchen des Präparates , so ist diese Ein- stellung stets völlig genau genug. Wenn quantitative Bestimmungen mit dem Apparate ausgeführt werden sollen, so kann man die eventuell bleibende Differenz, die geringer als <)"1 mm sein muß, durch p]in- oder Ausschiebung des Tubus oder vorteilhafter durch eine im Okular angebraclite quadratische I r i s b 1 e n d e ausführen, die man nacli- XXVI, 1. Mcyur: Der Siiclitiscli II {Per(niiiator). 83 träglich auf die Größe der eingestellten Verschiebung einstellt. Das Okular mit der auch an sich für die quantitativen Bestimmungen sehr vorteilhaften Irisblende ist von Seibert für 20 Mk. zu beziehen. Des weiteren ist nun noch folgendes zu bemerken. Man sieht auf dem starken Hebelarm H^ welcher zum Fortschieben des Zahnrades bestimmt ist, ein kleines Knöpfchen F^ welches mit einem im Hebel // verborgenen kleinen federnden Hebel in V'erbindung steht. Letz- terer schnappt in drei Ruhelagen ein. In der mittleren sind die beiden Zähne z der hinter dem Hebel H liegenden Sperrvorrichtung vom Zahnrad abgehoben, so daß der Hebel H unwirksam ist. Stellt man das Knöpfchen F nach rechts, so greift der eine Haken % der Sperrvorrichtung in das große Zahnrad ein und bei jeder voll aus- geführten Bewegung des Hebels H von unten vorn nach oben hinten wird das Objekt , wenn der Index auf Sebfeldgröße eingestellt ist, um einen Sehfelddurchmesser nach rechts verschoben. Stellt man das. Knöpfchen F in die linke Ruhelage, so bewegt sich das Objekt nach links. Man sieht, daß sich die Konstruktion des Apparates an die des von Dr. Engel konstruierten Kreuztisches mit automatischer Ein- stellung (Diese Zeitschr. Bd. XXV, 1908, p. 60) anschließt, den Leitz in Wetzlar baut. Dieser ist zum Absuchen der Präparate geeignet, gestattet jedoch nicht das Präparat jedesmal um eine Seh- feldbreite weiter zu schieben. [Eingegangen am 15. Mai 1909.] 84 Wolff: Vhev ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. Über ein neues kleines Minot- Mikrotom, das noch für feinste histologische und embryo- logische Arl)eiten ausreicht, und über einen neuen Mikroskopiertisch. Von Dr. Max Wolff in Broinljerg. Hierzu fünf Textabbildungen. In einer Mitteilung „Über Gefriermethoden und Gefriermikro- tome usw." hatte ich vor kurzem in dieser Zeitschrift^ auf die außerordentlichen Vorzüge des Minot- ZiMMERjiANNSchen Mikrotoms, die es vor allen anderen Konstruktionstypen auszeichnen, mit Nach- druck hingewiesen, da sie mir speziell für Gefrierarbeiten bisher noch nicht genügend gewürdigt zu sein schienen. Ich nahm dabei Veranlassung, mich auch über einige andere Instrumente zu äußern, die zwar erhebliche prinzipielle Nachteile ihrem ganzen Konstruktionstyp nach bieten , von denen ich aber immerhin eines, das bekannte Jung sehe Studentenmikrotom (in seiner neuen Form) bei bescheidenen Ansprüchen in Anbetracht seines relativ sehr geringen Preises und seiner hinsichtlich der Methoden universalen Verwendbarkeit für weniger bemittelte Mikroskopiker doch nach wie vor als brauchbar und empfehlenswert bezeichnen zu müssen glaubte. Doch die Vorzüge der Minot- Modelle erschienen mir so erheblich, der Preisabstand dagegen des bisher gebauten kleinsten Instrumentes von Zimmermann (Modell I, s. Fig. 1) von den billigsten, noch für feinere Arbeiten überhaupt verwendbaren Modellen anderer Firmen war als so wenig beträchtlich zu bezeichnen (Preis des Zimmer- mann sehen Modell I 190 Mk.; eines — weit weniger leistungsfähigen — Schaukelmikrotoms von R. Jung, Heidelberg 14r75 Mk.), daß ich 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXV, 1908, p. 1G9— 184. XXVI, 1. Wolff: (jber ein Minot-Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch, gfo es unteriialim, die Konstruktion eines Modelles auszuarbeiten, das unter Wahrung aller Vorzüge des Minot- Zimmermann scheu Kon- struktionstyps, — vor allem sämtlicher Bestandteile der Konstruktion des Modell I, die die Exaktheit der von ihm geleisteten Arbeit be- dingen, — doch in allem übrigen soweit vereinfacht sein sollte, daß seine Herstellung zu einem für weniger bemittelte Private, kleine Institute usw. leicht zu erschwingenden Preise (der es eventuell größeren Instituten gestattet, den fortgeschritteneren Praktikanten 1. Mikrotom Minot -Zimmermann, Modell I: Grundplatte 17x17 cm, Gewicht (netto) 8"050 kg , maximale Schnittgröße 3-3 bis 4*2 cm x 5'5 cm , maximale Blockhöhe 35 cm. eigene Instrumente in die Hand zu geben) möglich wäre, der sich jedenfalls in der Höhe von nicht viel über 100 Mk., — wenn mög- lich weniger, — bewegen sollte. Als ich meine Vorschläge und Zeichnungen Herrn E. Zimmermann unterbreitete, erfuhr ich, daß er und seine Mitarbeiter bereits den- selben Gedanken durch ein anderes Modell zu verwirklichen im Be- griff waren. Da dies Modell jedoch, wie mir später mitgeteilt wurde, nicht den von der Firma gestellten Anforderungen entsprach, wurde unter Benützung meiner Entwürfe zum Bau eines neuen Instrumentes geschritten, das allen Anforderungen, die man an ein Präzisionsinstru- ment stellen muß, entspricht. Ich betone aber, daß einzelne mir ganz gß Wolff: i'ber ein Minot- Mikrotom n. einen Mikroskopiertisch. XXVT, 1. besonders wertvoll erscheinende Konstrnktionsteile, wie z. B. die ganz neue Einrichtung, die die automatische Einstellung der Schnittdicke be- wirkt, ausschließliches geistiges Eigentum der Firma Zimmermann sind, die den Gebrauchsmusterschutz für das Instrument angemeldet hat. Ich habe das Mikrotom (vgl. Fig. 2) eingehend in meinem Laboratorium geprüft und möchte, indem ich in nachfolgendem eine genaue Be- schreibung seiner Leistungsfähigkeit und seines Baues gebe, es als noch für feinste histologische und embryologische Arbeiten ausreichendes Pa- raffin- und Gefriermikrotom allen mit dem Mikrotom arbeitenden Biologen, nicht zuletzt den Medizinern, warm empfehlen. Das Instrument' kostet komplett und gebrauchsfertig (mit Messer) für die Paraffinmethode ausgerüstet in elegantem Schränkchen (mit Trag- bügel, nach Art der Mikroskopschränke) 87-70 Mk., mit Chloräthylgefrierkam- mer und einer Flasche Chloräthyl, also für Paraffin- und Gefriermethode aus- gerüstet, 98-20 Mk. Ohne Messer", G e fixier - tisch und Chloräthyl kostet das neue Mikrotom nur 8 5 Mk. Da das Mikrotom, trotz seiner außerordentlich kräftigen und stabilen, aber sehr kompendiösen Bauart, noch nicht ganz S'/o kg (genauer, — ohne Kittplatte und Messer, — 3325 g) wiegt, also für ein Instrument, das noch 5 /i- Schnitte durch ganze Hemisphären 6monatlicher mensch- **m.P / 2. Kleines Mikrotom Minot - Zim- mermann für Paraffin- u. Gefrier- schnitte: Grundplatte 9'5x 9 cm, Gewicht (netto) 3-325 kg, maxi- male Schnittgröße 25 bis 3-5 cm X 3-2 cm, max. Blockhöhe 2 cm. ^) Zu beziehen von der Firma E, Zimmermann, Leipzig, Emilienstr. 21. -) An Stelle der Rasiermesser von 5 mm Klingenstärke führt die Firma jetzt zwei sehr empfehlenswerte und sehr preiswerte „Normalmesser" mit 25 mm breiten, 7 resp. 8 mm starken und 8 resp. 12 cm langen Klingen. Die Messer genügen allen Anforderungen , die man an größere Mikrotom- messer zu stellen pflegt, obgleich sie nur 4- — resp. 9-75 Mk. kosten. Die schwarzen Schalen des kleineren und die abnehmbaren Metallschalen des größeren Messers ersparen ein besonderes Etuis und Grift'e zum Abziehen. Die Messer stellen also eine Art Verschmelzung von Rasier- und Mikrotom- messer dar. XXVr. 1. Wulff: über ein Minot-Mikrotom u. einen Mikroskopiertiscb. 87 lieber Foeten liefert (Sclnüttgröße : 32x23 mm), außerordentlich leicht und bequem transportabel ist, so haben wir damit, denke ich, endlich das Keisemikrotom, das uns in einer solchen Leistungsfähigkeit bis jetzt nicht zu Gebote stand, gefunden. Ich bemerke noch, daß das Instrument in seiner oben erwähnten kompletten Ausrüstung für beide Methoden und in seinem Schränkchen verpackt nur 5^3 kg wiegt, also ebensoviel resp. weniger als ein komplettes JuNosches Studentenmikrotom, das laut neuestem Katalog „4 bis 6 kg" mit Ver- packung wiegt. Die Dimensionen des Schränkchens, in dem das Instrument nach Abnehmen der Kurbel durch seine Tischklemme mit einem Griffe versandfähig sicher zu befestigen ist, und das außerdem die ganze sonstige Ausrüstung aufzunehmen vermag, sind 17X18X28 cm (breit X tief X hoch). Größe, Gewicht und sonstige Ausmessungen des neuen Instru- mentes verhalten sich zu denen des MiNOT-Modelles I wie folgt: Kleines Mikrotom Modell I Grundplatte : 9-5 X 9 cm 17 xl7 cm Höhe des Instrumentes über der Tischtläche: 14 cm 18 cm Gesamte auf dem Tisch beanspruchte Fläche (mit Rad und Kurbel): 15 X IG cm 20 X 24 cm Gewicht (netto): 3-325 kg 8-050 kg Schlittenhub : 4 cm 4-5 cm Nutzbarer Messerhalter- abstand : 3-2 cm 5-5 cm Trieb der Mikrometer- schraube : 3-5 cm 3 cm Maximale Distanz: Kitt- plattenfläche — Schneide : 2 cm 35 cm Maximale Schnittgrüße : 2-5 bis 3-5 cm x 32 cm 33 bis 4-2 cm x 5-5 cm Die von mir mit dem „Kleinen Mikrotom" geschnittenen Blöcke, die tadellose 5 /*- Serien gaben, hatten eine Schnittfläche von 3*2 cm (parallel der Schneide) X 3"5 cm (senkrecht dazu), — das ist die größte Schnittfläche, die das Instrument bei Einstellung auf 5 /i 88 Wolff: Über ein Minot-Mikrotoin u. einen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. noch bewältigt, — 3*2X2"3 und 3 X 2*2 cm. Die eingebetteten Objekte waren (in derselben Reihenfolge): Kopf einer jungen Ratte, und zwar ohne Haut, sagittal gesclniitten , als ein recht schwieriges Objekt; weiter die ganze Hemisphäre eines 6 monatlichen mensch- lichen Embryos, frontal geschnitten, und endlich die Calcarina des erwachsenen Menschen. Die Schnitte waren absolut gleichmäßig und die Schnittfläche der Blöcke spiegelglatt, ohne die bekannten feinen, der Schneide parallellaufenden Wellungen, die stets Zeichen dafür sind, daß Messer oder Objekt beim Schneiden nachgaben, und zwar so, daß eines von beiden in feine Vibrationen geriet. Ich mache also nochmals darauf aufmerksam, daß der Minot- ZiMMERMANNSche Mikrotomtyp in Beziehung auf äußerste Gleich- mäßigkeit der Bewegung auch beim Schneiden von geradezu un- verhältnismäßig großen Schnitten (man vergleiche Schnittgröße und Ausmessungen des angewandten Instrumentes in obiger Tabelle !) von keinem anderen, zum Schneiden größerer Objekte eingerichteten Typ erreicht wird (einzig und allein das bekannte Brodmann sehe Mikro- tom, das der vortreffliche Berliner Hirnanatom für seine Riesen- schnitte konstruiert hat, arbeitet ebenso präzise nach meinen Er- fahrungen, ist aber erheblich teurer als das der Blockgröße nach entsprechende, — d.h. noch größere, in maximo 11"5X19*5 cm- Schnitte liefernde ZiNMERMANNSche Modell VI). Die Schlitteumikro- tome leisten Ähnliches nur in ihren größeren und entsprechend teuren Modellen und lassen selbst dann noch bei hartem Material im Stich. Ich hatte meine Objekte, mit denen ich die oben erwähnten Ver- suche anstellte, in 60grädiges Paraffin eingeschmolzen. Die maximale Länge des Schnittes ist bei Benutzung der auto- matischen Schnitteinstellung größer, wenn die geringste Schnittdicke gewählt wird, — kleiner, wenn man auf größere Schnittdicke ein- gestellt hat, wie das auch in der oben gebrachten Tabelle aus- gedrückt ist. Schaltet man die automatische Einstellung aus, so kann man natürlich auch statt der sonst zulässigen Schnittlänge (die bei dem kleinen Mikrotom für 30 // 2*5 cm beträgt) die größte überhaupt zulässige (3*5 cm) schneiden. Man stellt dann eben frei- händig ein. Es ist das eine Eigentümlichkeit aller Mikrotome mit automatischer Vorwärtsbewegung der Mikrometerschraube. Sie be- ruht, wie leicht einzusehen, darin, daß der bewegte Schlitten, — je nach Konstruktion Objekt- oder Messerschlitten, — erst die Einstellung des Schnittes (Vorwärtsbewegung der MikrometerschraubeJ bewirkt XXVI, 1. Wolff: Über ein Minot-Mikrotoiu u. einen Milvroskopiertisch. 89 haben muß , bevor der Block die Schueide des Messers berührt. Ein Teil des Hubes wird also für die Einstellung verbraucht und geht für den eigentlichen Schnitt verloren, und zwar um so mehr, je weiter die Sperrklinke den gezähnten Kopf der Mikrometerschraube erst drehen muß, bevor sie von der, nach welchem Prinzip auch immer konstruierten Anschlagvorriclitung freigegeben wird. Jedenfalls wird ein Instrument, das bei automa- tischer Einstellung einer Schnittdicke von 5, 10 und 15 fx rund 3X3 cm große Schnitte in Bändern liefert, für alle feineren Arbeiten des Zoologen, Histologen, Embryologen, Arztes, des Botaniker s usw. vollkommen ausreichen. Sogar der Neurologe wird das Instrument außer für seine feineren histologischen noch für die meisten gröberen anato- mischen Studien mit vollstem Nutzen gebrauchen können. Die Oblon- gata kann noch in toto quer geschnitten werden , außerdem andere recht große Stücke, ganze Hemisphären nicht zu großer Gehirne, wie oben berichtet wurde. Dabei ist es sehr erheblich für das Arbeiten, daß das „Kleine Mikrotom" (das gilt auch von den größeren Modellen) keineswegs, wie den automatischen Mikrotomen sonst nicht mit Unrecht vor- geworfen wird , den Arbeitenden zwingt , alle Schnitte mit großer Schnelligkeit herunter zu hobeln. Will man aus irgendwelchen Gründen die Schnitte einzeln abnehmen und sehr langsam und be- hutsam schneiden, so ist das mit diesem Instrument genau so be- quem und sicher auszuführen, wie mit dem besten, mit mechanischer (Messer-) Schiitteuführung ausgerüsteten Schlittenmikrotom. Das hat seinen Grund darin, daß der Schlitten vom Schwungrad höchst genau ausbalanciert wird ; der Ansatz für den Handgriff und die Exzenter- kurbel sind um etwa 80° versetzt und der Handgriff hat obendrein die günstigste Stellung (für das Beherrschen der Bewegung) gerade dann, wenn das Messer den Block durchschneidet. Man kann also so langsam schneiden wie man will. Es ist ferner aus diesem Grunde möglich, bei freihändiger Einstellung der ]Mikrometerschraube noch Schnitte unter 2^1^ fx von jeder Größe, die Objekt und ver- wandtes Paraffin, Zimmertemperatur usw. erlauben, ebenso aber auch Schnitte in jeder beliebigen Dicke ü b e r 30 f.i h e r z u s t e 1 1 e n. Zieht man noch in Betracht, daß das Instrument das beste Gefriermikrotom ist, das man sich wünschen kann, 90 Wolff: Über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertiscb. XXVI, 1. so muß man in der Tat sagen, daß es eine Lücke im In- strumentarium des Biologen ausfüllt, die mancher, wie ich, bisher sehr oft schmerzlich empfunden hat. Man wird es daher wohl verstehen können, wenn ich, unbeschadet der Zuverlässigkeit und Objektivität meiner Prüfung, mein Urteil über das Instrument mit einiger Begeisterung abgebe. Nachdem ich die äußeren Dimensionen und die Leistungsfähig- keit des Instrumentes charakterisiert habe , gehe ich zur eigent- iBI!li.s Kleines Mikrotom Minot - Zimmermann mit Gefrierkammer. Geschnitten wurde mit einem kräftigen Walb sehen Rasiermesser. liehen Beschreibung seiner Konstruktion und einiger kleiner Neben- apparate über. Die Grundplatte des Instrumentes ruht auf drei Füßen, so daß sich ihre Oberfläche etwa S^j.-, cm über der Tischplatte befindet. Der an der Vorderkante (unter dem Messerhalter) befindliche Fuß wird von dem Oberteil der Tischklemme gebildet, die an die Grund- platte angegossen ist und es gestattet, das Instrument mit einem einzigen Grifi" unverrückbar fest auf dem Arbeitstische aufzustellen. Mit derselben Klemme wird das Instrument in seinem Schränkchen, das einen kräftigen Querboden hat, so sicher befestigt, daß es ohne XXVI, 1. Wolff: Über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. 91 weiteres transportiert und verscliickt werden kann. Die Schränkchen sind übrigens von jetzt ab so eingerichtet, daß die Türe sich an der Breitseite befindet, und daher der Handgriff vor dem Einscl)ieben des Instrumentes nicht abgenommen zu werden braucht. Der Grundplatte sind vorn die beiden sehr massiven Messer- halterpfeiler angegossen, — bei meinem Modell sind sie mit je zwei starken Schrauben befestigt, — seitlich erhebt sich der noch bedeutend massiver gehaltene Lagerblock der Achse des Antrieb- rades, der ebenfalls der Grundplatte angegossen ist. Im übrigen stellt die Grundplatte nicht eine volle quadratische Tafel dar. Hinter den Messerhalterpfeilern und seitlich vom Lager- block befindet sich vielmehr eine ganz beträchtliche Aussparung, in der der Vertikalschlitteu und die Exzenterkurbel auf und nieder gehen. Das an der, dem Lagerblock entgegengesetzten Seite der Aussparung stehende Vertikalschlitteuprisma ist au dem Prismen- halterpfeiler fest angeschraubt, der ebenfalls der Grundplatte an- gegossen ist. Durch diese Anordnung ist der sehr große, 4 cm be- tragende Exzenterhub ermöglicht, der wieder, bei kompendiösesten Ausmessungen, sehr lauge Schnitte zu fertigen erlaubt, weil das Prisma des Vertikalschlittens uuu bis unter die Grundplatte geführt und ihm somit eine ausreichende Länge gegeben werden konnte. Auch Messerhalterpfeiler (und der Lagerblock natürlich auch) sind dadurch sehr niedrig gehalten worden und haben mithin eine weit über ihre wirkliche Beanspruchung hinausgehende Stabilität erhalten. Die Messerhalterpfeiler sind genau so ausgerüstet, wie bei den größeren Instrumenten, d. h. die maulartigen Einschnitte am oberen Ende, die das Messer aufnehmen, tragen je zwei Schrauben, eine vordere größere, eine hintere feinere, von denen die vorn, zum be- quemen, leichten Drehen doppelt gerändelte, allein das Messer zu fixieren hat, während man dui^ch Verändern der Stellung der hinteren Schraube die Neigung der Schneide zur Schnittfläche auf das subtilste regulieren kann. Die Regulierbarkeit der Neigung des Messers ist Bedingung dafür, daß man unter allen Umständen mit querstehendem Messer (und zwar mit Messern von beliebiger Schlitffazette !) von allen Objekten gute Schnitte (einzelne, wie Bänder, dicke wie feinste!) erhält. Die Regulierbarkeit der Neigung eines querstehenden Messers ist in dieser Hinsicht wert- voller, als die Möglichkeit, dasselbe Resultat durch Schrägstellung des Messers (also nur für einzelne Schnitte) zu erreichen. Die Schrägstellung des Messers wird überflüssig. — In dieser Beziehung 92 Wolff: Über ein Minot-Mikrotoiu u. einen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. ist das neue, wie die übrigen Minot- Mikrotome, den meisten auto- matischen (z. B. dem Schaukelraikrotom) und den meisten Gefrier- und Schiitteumikrotomen überlegen. Die Messerhalter haben 3*5 cm Abstand. Dieser Abstand (der praktisch durch die Köpfe der Stellschrauben auf 3'2 cm verringert wird) bedingt die Breite des größten Schnittes, der mit dem In- strument hergestellt werden kann. Da alle schon beschriebenen Teile, ebenso aber auch der Vertikal- und der Objektschlitten eine weit über ihre wirkliche Inanspruchnahme hinausgehende Stabilität erhalten haben, könnte es befremden, daß durch die Wahl eines relativ geringen Pfeilerabstandes eigentlich die Leistung des Instru- mentes nicht voll ausgenutzt werden kann. Nun, ein anderer Punkt schien hier wieder wichtiger zu sein : daß es nämlich bei dem ge- ringeren Abstand der Pfeiler (und im allgemeinen wird man ja keine größereu Schnitte, als 3'2X3'5cm herstellen wollen, wenigstens ganz sicher nicht bei feineren Arbeiten) möglich ist, noch relativ kurze Messer in ihrer ganzen Länge ausnutzen zu können. Ich glaube, daß gerade die Kreise, denen in erster Linie das neue Instrument sich nützlich erweisen soll, hierauf größeren Wert legen werden, als auf die Erzielung noch größerer Schnitte. An und für sich würde das kleine Mikrotom, wenn die Pfeiler hart an die Kanten der Grundplatte gerückt würden, Schnitte von 5X3"5 cm Größe bequem hergeben können. Der Vertikalschlitten, der sich an dem Vertikalprisraa auf und ab bewegt, unterscheidet sich hinsichtlich seiner, die Präzision der Leistung bedingenden Einrichtungen in nichts von dem Schlitten des größeren Modells , dem es auch in den Dimensionen nur wenig nachsteht. Der Schlitten ist schwalbenschwanzförmig eingeschliffen. Gang- ungleichheiten sind bei der sorgfältigen Arbeit unmöglich. Eine dauernd gleichmäßig-zwangsläufige Bewegung ist dadurch garantiert, daß die eine Schlittenleiste dem Schlitten fest angegossen, die andere für sich nach vollendetem Einschleifen durch zwei starke Schrauben fixiert ist , und zwar so , daß nicht der geringste Zwischenraum zwischen dem Prisma und den Laufllächen des Schlittens besteht. Auch die minimalste Abnutzung würde hieran nichts ändern, da zwei rechtwinklig zu den schon erwähnten stehende Schrauben (Nach- stellschrauben) die Stellung der aufgeschraubten Schlitteuleiste so zu justieren gestatten, daß die Gleichmäßigkeit und völlige Zwangsläufig- keit der Bewegung stets erhalten werden kann. XXVI, 1. Wolff: tjber ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. 93 In derselben Weise ist der Objektschlitten eingerichtet, dessen Bewegung durch die Mikrometerschraube in liorizontaler Richtung erfolgt. Der Objektschlitten ist nur durch das Kopfstück, das den Ob- jekthalter (Kittplatte, Objektklammer oder Gefrierkammer) aufnimmt, von dem der größeren Modelle unterschieden. Das mit Klemm- schraube versehene Halterstück ist nämlich absichtlich wesentlich einfacher gehalten, was natürlich die Herstellungskosten herabmindert und zugleich das Instrument kompendiöser zu bauen gestattet. Der Verzicht auf die' Möglichkeit, die Kittplatte noch zu anderen Ebenen, als zu der Schnittebene, parallel orientieren zu können, schien mir um so angezeigter, als die beste und sicherste Orientierung des Objektes doch stets während des Einbettens, im noch geschmolzenen und daher durchsichtigen Paraffin vorgenommen, bei der Oefrier- methode aber stets ebenfalls ein Orientieren des schon gefrorenen Objektes vermieden wird. Der Geübte wird also sehr gut einer mehrachsigen Orientierungsvorrichtung eutraten können, und der An- fänger sollte von vornherein lernen , und wird auch wohl in den meisten Laboratorien stets dazu angehalten, seine Objekte gleich beim Einbetten so zu orientieren, wie sie nachher geschnitten werden sollen. Die den Objektschlitteu in seiner Aufangstellung von der Messer- schneide trennende Distanz beträgt bei steil zum Block stehendem Messer (von üblicher Breite), also in minimo, 2-5 cm ; da die Kitt- platten, die dem Instrument beigegeben werden, eine Höhe von 0*5 cm haben, können Blöcke von 2 cm maximaler Höhe geschnitten werden. Auch das dürfte für alle feineren und die meisten gröberen Arbeiten genügen. Die Kittplatten werden, beiläufig bemerkt, auch in einer sehr empfehlenswerten Form mit angepaßten Einbetträhmchen geliefert. Für die Objektklaramer und die Gefrierkammer ver- ringert sich die maximale Blockliöhe um 1 cm. Freilich werden Blöcke zum Gefrieren kaum über 0*5 cm hoch genommen werden. Und auf Holz oder gar Kork aufgekittete Blöcke sollte man auch stets so niedrig wie möglich halten, in Anbetracht ihrer doch ohne- hin an Starrheit recht zu wünschen übriglassenden Unterlage. Die Blöcke können von Anfang bis zu Ende ohne Unterbrechung ge- schnitten werden, da die Mikrometerschraube sehr lang, — länger, als die maximale Blockhöhe es erfordert, — gewählt worden ist. Das Gewinde ist .3 '5 cm lang. Das am Vertikal schütten durch kräftige Verschraubungen be- festigte Kugellager der Mikroraeterschraube, — ebenso die am Objekt- <) 1 Widtf: i'bcr ein Minot -Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. Schlitten befestigte Mutter, — ist durch einen mit Nachstellschraube verseheneu Schnitt geteilt. Also auch hier ist eine schiiflliche Ab- nutzung unmöglich gemacht worden. Das Kugellager ist mittels der erwähnten Schraube stets so eingestellt zu halten, daß einige Reibung besteht, damit die Sperrklinke das Zahnrad, das den Kopf der Mikrometerschraube bildet, nur vorwärtsnehmen kann (bei Be- ginn der Abwärtsbewegung des Vertikalschlittens) und es nicht beim Darüberliingleiten (während der Aufwärtsbewegung) etwa wieder zu- rückdreht. Hierauf ist bei allen Mikrotomen mit automatischer Schnitteinstellung zu achten, gleichviel welcher Konstruktion sie sind. Ich erwähne diesen Punkt nur, weil man ihn auffallend oft über- sieht, und dann unberechtigterweise darüber Klage geführt wird, daß das Instrument „Schnitte ausläßt". Das heißt: es gibt natürlich auch Mikrotome, gewöhnlich Nachahmungen guter Modelle, die infolge ungenauer Arbeit des Zahnrades ungleiche Schnitte liefern oder solche ganz auslassen. Die Zahnscheibe ist mit einer kleinen Kurbel versehen, um zu gröberer Einstellung des Blockes den Objektschlitten (zur Schonung der Klinke wird diese zuvor ausgeschaltet) schnell vor- und zurück- fuhren zu können. Beim Zurückführen des Objektschlittens ist darauf zu achten, daß, noch ehe die Mikrometerschraubenmutter das Kugel- lager berührt, der Bewegung des Schlittens durch die vordere Fixi- rungsschraube der Objektschlittenleiste halt geboten wird , da dann das Halterstück an sie anstößt. Die Difterenz beträgt etwa 0*5 mm. Da sie sonst leicht (eventuell zum Schaden von Gewinde und Mutter) übersehen werden könnte, wird jetzt oben auf der Führungsleiste und auf dem ihr zugewandten Teil des Halterstückes je eine Marke an- gebracht. Der Schlitten darf also nur soweit zurückbewegt werden, bis sich die Marken gegenüberstehen. Die Drehung der Zahnscheibe um einen Zahn entspricht einer Vorwärtsbewegung des Objektschlittens um 5 ^. Da die Zähne etwa 1'3 mm Abstand voneinander haben, so kann mau bei freihändiger Einstellung der Schnittdicke sehr gut noch (durch Anvisieren der vertikalen inneren Kante des zum automatischen Einstellungsmecha- uisraus gehörigen Exzenterstückes, das die Sperrklinke vom Rade abhebt) ^j^, ^/g und sogar noch ^j^ Zahnbreite beim Vorwärtsdrehen der Scheibe (das natürlich dann besser durch Fassen der gezähnten Peripherie, als etwa mit der Kurbel erfolgt) abschätzen, mithin f r e i h ä n d i g n c h s e h r g u t 2*5 ,a, 1*7 ^ u n d 1 "2 /^ e i n s t e 1 1 e n , s c li n e i d e n. XXVI, 1. Wulff: Über ein Minot-Mikrotuiu u. einen Mikroskopiertisch. 95 Das dürfte aber, da man nur sehr selten so dünne Schnitte mit der Schnelligkeit, die bei automatischer Einstellung prinzipiell möglich \v<äre, schneiden wollen und, — der Beschaffenheit des Ob- jektes nach, — können wird, vollkommen genügen, insbesondere, da man so feine Schnitte gewöhnlich einzeln behandeln wird, so daß es kaum ins Gewicht fällt, wenn es allerdings schon von der Geschick- lichkeit stark abhängt, daß Bänder, — die man natürlich auch bei freihändiger Einstellung dieser feinsten Schnitte noch sehr gut er- hält — , dann noch dieselbe mathematische Übereinstimmung der Dicke jedes einzelnen Schnittes aufweisen, die bei automatischer Einstellung (wie sie die größeren Modelle der Zimmermann sehen Mikrotome haben, die bis 1 f.i [Modell II], ja sogar bis ^U /^ [Modell III und das große Modell V] heruntergehen) solcher minutiöseu Schnitte erreicht wird und für differenzierende Färbungen erwünscht sein kann. Allerdings weiß jeder, der gezwungen gewesen ist, zu solchen Schnitten seine Zuflucht zu nehmen, wie sehr die Launen minimaler, schwer zu beherrschender Temperaturschwankungen, die fortwährend die Länge des Blockes verändern, auch bei automatischem Ein- stellen der Schnittdicke das Schneiden eines absolut gleichmäßigen 1 /z- Bandes erschweren können, obgleich das Instrument vollkommen exakt arbeitet. Es dürfte also wohl meistens genügen, daß man mit unserem kleinen Mikrotom überhaupt noch so feine Schnitte her- stellen kann. Dicht unter dem Objektschlitten und parallel zu seiner Bahn befindet sich die Querführung für den Schieber des Hubexzenters. Beide, Führung und Schieber, sind bei diesem Instrument (im Gegen- satz zu den größeren Modellen) zylindrisch gehalten. Der sehr leicht gehende massive Zylinder hat natürlich nur eine minimale Reibung in seiner Führung. Die Einrichtung ist daher nicht wenig an dem spielenden Gang des Mikrotoms und der Erzielung einer erheblichen Schwungkraft mit dem doch relativ kleinen Antriebsrad beteiligt. Der Schieber ist durch einen Zapfen mit dem außerordentlich massiven Hubexzenter verbunden, der auf der gleichfalls sehr starken (8 mm) Achse des Antriebsrades sitzt. Ganz neu ist die von der Firma dem Instrumente gegebene Einrichtung für die automatische Einstellung der Schnittdicke. Auf dem Vertikalprisma ist oben ein um seine vertikale Achse drehbarer voluminöser Schraubenkopf angebracht , in den ein Schraubengang von 12 mm Höhe eingeschnitten ist. Dieser Gang, der beiläufig 2 mm tief ist, führt einen Stift, der aus einem seitwärts von dem 9() Wolff: Über ein Minot-Mikrotoiu u. oinen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. Sohraubenkopf in einer besonderen doppelten , vertikalen Führung (die am Prisma angebracht ist) auf und nieder gehenden horizontalen Balken hervorragt. Dieser Balken trägt an seinem hinteren Ende die Sperrklinke, die von einer äußerlich nicht sichtbaren Feder seit- wärts gegen die gezähnte Scheibe der Mikrometerschraube gedrängt wird. Durch ein kleines Hebelchen kann die Klinke jedoch zurück- gezogen und arretiert werden, so daß man dann bequem freihändig grobe , wie feine Bewegungen mit der Mikrometerschraube aus- führen kann. Je nachdem nun vermittelst des erwähnten Schraubenkopfes die Sperrklinke eine höhere oder tiefere Stellung am Prisma erhalten hat, wird die Zahuscheibe von ihr, bei Beginn der Abwärtsbewegung von Objekt- (und Vertikal-) Schlitten, um eine größere oder kleinere Anzahl Zähne gedreht, bis die Klinke, — später oder früher, — gegen die Kante einer exzenterartig angebrachten Platte oder Spange (die am hinteren Ende des Vertikalschlittens angeschraubt ist) stößt und an ihr entlang fahrend, von dem Zahn, den sie gefaßt. hatte, ab- gleitet. Man sieht ohne weiteres ein, daß der ganze Mechanismus höchst einfach und sehr stabil und widerstandsfähig gebaut ist. Zu erwähnen ist noch ein kleines Schieberchen , das sich etwa in Iialber Höhe des Vertikalprisma befindet und eine Arretierung des Vertikalschlittens ermöglicht, was sehr bequem ist, wenn man den Block grob einstellen, beschneiden, oder Kittplatte, Gefrierkammer usw. einsetzen will, während das Messer im Halter eingespannt ist. Die eingestellte Schnittdicke wird mittels eines Zeigers (bei den neuen Modellen etwas modifiziert) auf einer geteilten Scheibe ab- gelesen, die dem Schraubenkopf, der den Kliukeubalken bewegt, auf- gesetzt ist. Die Peripherie dieser Scheibe ist sechsmal geteilt. Die Zahlen 1 bis 6 bedeuten, daß der Objektschlitten jeweils um 1x5, 2X5, 3X5 usw. bis 6 X 5 /* vorwärts bewegt wird. Die zu dem Instrument passende Gefrierkammer ist nach dem- selben Prinzip gebaut, wie die , welche ich für die größeren Instru- mente angegeben habe (vgl. meine Mitteilung „Über Gefriermetho- den usw." in Bd. XXV, 1908, dieser Zeitschrift). Sie ist nur in allen Dimensionen kleiner gehalten , und daher nur halb so teuer wie jene (6 Mk.). Die Kammer ist nur 1 cm hoch (die größere 2 cm), die Gefrierplatte hat nur einen Durchmesser von 2*7 cm (die der größeren 4 cm) und die Einspritzöftuungen sind aus Gründen der Solidität des Ringes nicht in dem schmalen Hartgummiring, der die Gefrierplatte isoliert (hier 9 mm breit gegen 14 mm bei XXVI, 1. Wolff: Über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. 97 der größeren Kammer), selbst, sondern in der Bodenplatte an- gebracht. Eine der fünf Einspritzöffnungen bleibt auch nach dem Einsetzen der Gefrierkammer in die llalterklemme des Objektschlittens für den Strahl des Chloräthylsprays zugänglich , so daß also auch während des Schneidens noch nachgekühlt werden kann. Im allgemeinen ist das aber nicht nötig. Bei einer Zimmertemperatur von 20® C ver- fuhr ich so , daß ich die Gefrierkammer (Gefrierplatte nach unten) in der Hand hielt und mit einer Dosis Chloräthyl beschickte, das ich mit dem Spray durch die Öffnungen in das Kammerinnere leitete. Es ist leicht einzusehen, daß hiervon nicht ein Tropfen verloren gehen kann. Das innen, dicht unter der Gefrierplatte befindliche Gewebe saugt sich ganz mit Chloräthyl voll. Das Verdampfen und damit den Abkühlungsprozeß kann man durch Anblasen leicht be- schleunigen. Sobald die Ober- (Außen-) Seite der Gefrierplatte sich mit Reif bezieht, drehe ich die Kammer herum, gebe das formol- fixierte (gut ausgewaschene) Objekt darauf, das sofort ohne weiteres festfriert, und bespritze noch den Block von oben mit etwas Cblor- äthyl, damit er schneller durchgefriert. Dann wird die Kammer in den Halter des Mikrotoms gebracht und geschnitten. Die Kammer arbeitet sehr sparsam. Ich brauchte für einen Block Lendenmark vom Kalb , der 2*5 mm hoch war und nicht ganz 2 qcm Schnitt- fläche haben mochte, 1*5 bis 2 g Chloräthyl, also im ganzen etwa für 4^/2 bis 6 Pfennige. Betonen möchte ich noch die vorzügliche Kon- sistenz des mit Chloräthyl zum Gefrieren gebrachten Blockes, die noch 5 /^- Schnitte durch das ganze Lendenmark herzustellen er- laubte. Die beiden Gefrierkammern, die zu den Zimmermann-Minot- Instrumenten jetzt geliefert werden, haben übrigens noch einen Vorteil vor den Kammern anderer Gefriermikrotome , auf den ich in Er- gänzung meiner früheren Mitteilungen (1. c.) noch hinweisen möchte. Während nämlich bei den Kammern, die mehr oder weniger fest mit dem Instrument während des Gefrierprozesses verbunden sein müssen und daher eine ganz bestimmt orientierte Lage der Einspritzöffnungen aufweisen (wie das z. B. beim Jung sehen Gefriermikrotom der Fall ist), der Chloräthylspray meist nicht zu Ende benutzt werden kann, weil das Fläschchen, um den Strahl von unten her gegen die Ge- frierplatte lenken zu können, schief gehalten werden muß, und das Röhrchen infolgedessen nicht mehr in das Chloräthyl eintaucht, wenn dieses nur etwa 1 cm hoch noch in der Hasche steht, — können die Kammern für die MiNOx-Mikrotome stets so gehalten werden, wie Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. < 98 Wolff: über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. es zum FAn- und Aufspritzen des letzten Cliloriithylrestes am be- quemsten ist. Dieser Vorteil macht sich bei längerem Arbeiten mit der Gefriermethode sehr angenehm bemerkbar. Da alle in der oben zitierten Abhandlung geschilderten Vorteile des Minot -Typs für Gefrierzwecke auch von dem neuen kleinen Mikrotom geboten werden , so stehe ich niclit an , nach sorgfältiger Prüfung zu behaupten , das es das beste und bequemste Instrument ist, daß wir jetzt für die beste, bequemste und billigste Gefriermethode, — die mit Chlor äthyl, — besitzen. Zum parallelkantigen Beschneiden der Paraffinblöcke empfehle ich als einfachsten und billigsten aller zu diesen Zwecken dienenden Apparate das von mir angegebene Definierlineal, das von der Firma Zimmermann zum Preise von 1*75 Mk. hergestellt wird. Nach- dem der aufgekittete Block mittels des Mikrotoms eine glatte Schnitt- fläche erhalten hat, wird das Definierlineal an Stelle des Messers eingesetzt und die automatische Schnitteiustellung ausgeschaltet. Vor- her hat man den Objektschlitten zur Vorsicht etwas zurückgekurbelt. Nach Einsetzen des Definierlineals dreht man den Schlitten wieder soweit vor , daß er vom Antriebsrade dicht an der oberen Kante des Lineals vorbei geführt wird. Man bringt den Block nun in zwei Positionen : einmal, daß die obere Kante gerade noch über dem Lineal hervorsieht, das andere Mal, daß die untere Kante gerade noch vom Lineal verdeckt wird. Jedesmal ritzt man die Schnitt- fläche des Blockes mittels einer am Lineal entlang geführten Prä- pariernadel an. Man hat auf diese Weise zwei ganz genau parallel- laufende gerade Furchen auf der Schnittfläche des Blockes eingegraben, mittels deren man den Block nun leicht genau parallelkantig be- schneiden kann, so daß die Schnittbänder vollkommen gerade ausfallen. Kleinere Blöcke wird man beschneiden, ohne sie mit ihrer Kittplatte dazu aus dem Halter zu entfernen. Größere und sehr große stellt man am besten aufrecht vor sich hin. Man versieht zu dem Zwecke einen Holzklotz oder wohl auch die Platte des Arbeitstisches mit einer Bohrung, die den Zapfen der Kittplatte gerade aufnimmt. Das Definierlineal ist mit einer genauen Millimeterteilung ver- sehen, um damit auch allerhand beim Mikrotomieren vorkommende Messungen (Messung der Schrumpfung des Objektes beim Entwässern und Einbetten, genaues Abmessen der Schnittgröße, um Deckgläser oder Objektträger möglichst vollständig ausnützen zu können u. a.) ausführen zu können. Die Teilung gestattet natürlich auch die An- XXVI, 1. Wolff: Über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. 99 bringung von Richtlinien znm Zwecke plastisclier Rekonstruktionen aus den hergestellten Schnittserien. Ich verfahre folgendermaßen und finde , daß meine Methode praktisch an Zuverlässigkeit der vortreff- lichen , aber ein kostspieliges Instrumentarium erheischenden Born- Peter sehen Methode nicht nachsteht. Ich kitte den Block umgekehrt, Grundfläche nach oben, auf, als wie er später geschnitten werden soll imd beschneide ihn in der eben angegebenen Weise parallelkantig und so, daß die Schnittflächen senkrecht zur Kittplatte stehen. Alsdann nehme ich ihn durch Er- wärmen des Zapfens der Kittplatte , oder auch direkt mit einem Messer wieder ab und kitte ihn mit der einen der eben geschnittenen Seitenflächen wieder auf. Jetzt ist die andere, gleichsam als Schnitt- fläche dem Definierlineal zugewandt. Sie stellt die Definierfläche dar und wird vom Mikrotom, wenn ich genau aufgekittet habe, in einer Ebene auf- und abbewegt, die parallel zu einer durch die Messer- schneide laufenden und parallel zur Vertikalbewegung des Blockes gerichteten Ebene orientiert ist. Einen Fehler könnte man durch Einspannen des Messers leicht beseitigen , indem man mit diesem so viel abhobelt, daß alle Punkte der dem Messer zugewandten Block- fläche , die die Definierliuien aufnehmen soll , wirklich in gleicher Entfernung am Messer vorbeigeführt werden. Dann wird die auto- matische Schnitteinstellung natürlich vor der Anbringung der Definier- linien wieder ausgeschaltet und das Messer wieder mit dem Defiuier- lineal vertauscht. Die Definierfläche wird mittels der Kurbel des Mikrometer- schraubenkopfes so weit an das Lineal heranbewegt, daß sie haarscharf an dessen Kante vorbeigeführt wird. Jetzt setze ich eine kantig zugespitzte Präpariernadel fest auf einen geeigneten Punkt der Millimeterteilung auf und lasse sie etwas über die Kante hervorsehen. Dann führe ich den Block durch Drehen des Antriebrades an der Kante vorbei. Dabei ritze ich eine Furche von bestimmter Tiefe ein. Hierauf setze ich die Nadel beim nächsten Teilstrich des Lineales auf und verfahre ebenso u. s. f. Liegt mir daran, daß alle Defiuier- furchen gleiche Tiefe haben, so kann ich einen Kork an der Nadel befestigen, der sie jedesmal gleichweit über die Kante des Definier- lineales hinausragen läßt. Anderseils wird es nicht immer erforder- lich sein , daß den Furchen annähernd gleiche Abstände , wie oben beschrieben, gegeben werden. Aber oft ist es sehr bequem, um bei schwachen Vergrößerungen ungefähre Anhaltepunkte für schätzungs- weise Messungen zu haben. 7* 100 Wolff: Über ein Minot-IMlkiotom u. einen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. Natürlich laufen die Definierfurclicn absolut genau parallel. Daß sie auch mit den sogenannten Definierrechen (die ich aber überflüssig finde) angebracht werden können, bedarf kaum besonderer P>wähnung. Anstatt sie durch besondere Vorrichtungen am Messer anzubringen, setzt man sie hier einfacli auf die Kante des Definier- lineals auf. Sind die Definierfurchen angebracht, so wird der Block wieder abgenommen und mit der gleich zu Beginn der ganzen Manipulation eben geschnittenen Grundfläche definitiv aufgekittet. Durch Drehen der Kittplatte um ihre Zapfenachse wird die Definierebene so ge- stellt, daß ihre Kante (mit der Schnittebene) senkrecht zur Kante des Definierlineals läuft. Alsdann werden mit Hilfe des Lineals die beiden anderen Kanten beschnitten. Man nimmt nun die Kittplatte mit dem Block aus dem Halter und gibt der Definierfläche in be- kannter Weise Anstrich und Paraffindecke. Ich halte es für über- flüssig, sämtliche vier Seitenflächen zu überziehen, wie empfohlen worden ist. Notwendig ist es natürlich, wenn, wie oben angedeutet wurde, die Definierfläche durch Abhobeln nachgerichtet werden mußte , daß man sich vor dem definitiven Auf kitten überzeugt, daß Grundfläche und Defiuierfläche im rechten Winkel sich schneiden. Wenn man, wie ich es geschildert habe, sich ohne Glas- Einbettungswinkel be- hilft, so gehört einige Übung dazu, den Block rechtwinklig zur Schnittfläche (oder in diesem Falle zur späteren Grundfläche) zu beschneiden. Bei gewöhnlichen Schnittserien ist das ja unnötig. Diese verlangen nur, daß die obere und untere Schnittkante parallel zur Messerschneide verläuft. Wie die Ebenen , denen beide an- gehören, sonst zur Schnittebene stehen, ist gleichgültig. Um die erwähnte Schwierigkeit kommt aber auch der An- fänger ohne große Ausgaben sofort herum , wenn er mit Glas- winkeln ein bettet. Solche liefert Zimmermann sehr präzise ge- arbeitet für 4*25 Mk. Das Instrumentarium kostet dann immerhin erst den zehnten Teil des BoRN-PETERScheu. Das umständliche Beschneiden fällt weg, da die Grundfläche und die Definierfläche gleich gegeben sind. Zum Schluß beschreibe ich noch kurz einen einfachen Mikro- skopiertisch, den die Firma Zimmermann, Leipzig, jetzt auf meine Anregung hin baut. Ich hoff'e , daß dieser Tisch sich besonders Ärzten und allen , die sich mit mehr oder weniger bescheidenen Mitteln für mikroskopische Arbeiten einrichten wollen, brauchbarer XXVI, 1. Wulff: Über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertiseh. 101 erweisen wird , als die Mikroskopiertischformen , die man von den größereu Firmen , für einen Arbeitsplatz am Fenster passend , an- geboten findet. Diese gleichen zum Teil allem anderen mehr, als einem Mikroskopiertisch, haben z. B. aus mir unerfindlichen Gründen in etwas unter Kniehöhe eine zweite Platte oder einen Querboden, der keinen anderen Zweck erfüllt, als dem Beobachter eine möglichst 4. Der neue Mikroskopiertiseh mit den nötigen Utensilien. Rechts neben dem Mikroskop ist die Üftnung zu sehen, unter der der K:isten mit der Spülflasche sich befindet. Das kleine Mikrotom ist wie in Figur 3 mit Ge- frierkamraer montiert. Der Aufnahme wegen war der Tisch vom Fenster abgerückt worden. Auf dem ausgezogenen Schieber (rechts) liegt der zum Verschluß der Spülvorriclitung dienende Deckel. Die Aufnahme gibt " die Verhältnisse ziemhch genau in ^/^o nat. Größe wieder. unbequeme Haltung seiner Beine aufzuzwingen oder sonst einen dauern- den Konfliktzustand mit dem Tische aufrecht zu erhalten. Oder sie scheinen für einen Chemiker bestimmt zu sein, niclit aber für Arbeiten, bei denen Licht und wieder Licht vonnöten ist. Denn vor dem Arbeitsplatz am Tische erhebt sich ein stattliches Regal für Reagen- tieu. Das Tageslicht zum Mikroskopieren muß also von der Seite genommen oder immer künstliches Licht verwendet werden. Eine 102 Wolff: Über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. XXVI, 1. dritte Form erscheint mir deshalb unpraktisch, weil der Beobachter nur vor der einen Hälfte des Tisches sitzen kann , nicht vor der anderen (die nach der Abbildung in dem betreffenden Kataloge den Platz zum Mikrotomieren bieten soll). Denn hier ruht die Platte auf einem Schränkchen , das mehrere Schübe und Kästen enthält, aber natürlich beim Sitzen vor dem Platze sehr im Wege ist. Für den gedachten Zweck kommt es nun gar nicht darauf an, Glasdosen-, Instrumenten- und sonstige Utensilienvorräte, womöglich auch noch Präparatensammlungen in dem Tische unterbringen zu Der neue Mikroskopiertiscli in ^/^q nat. Größe (Platte 100 x 50 cm). Die Einrichtung für die Spülflasche ist irrtümlich zu weit nach links gezeichnet. Die Nebenzeichnung deutet die Einrichtung zum Einhängen des Kastens an (von unten gesehen). Der Kasten kann in der Richtung der punktierten Linien herausgezogen und dann, zwecks Entleerung der Spülfiasche, ab- genommen werden. können. Für Glasdosen sind solche Kästen zum Beispiel ein unter allen Umständen ziemlich ungeeigneter Aufbewahrungsort, denn wenn man den Kasten aufzieht, fällt alles durcheiuander. Aber alle diese Dinge werden überhaupt viel besser und zweckmäßiger in einem Regal oder in einem Schranke für sich aufbewahrt. Der Mikro- skopiertisch soll die Lichtverhältnisse möglichst auszunützen erlauben und ein bequemes Mikroskopieren (dahin gehört auch das Färben und Fertigmachen der Präparate, das Zeichnen und ähnliches), sowie auch das Mikrotomieren mit einem nicht gerade zu großen Instrument gestatten. Selbstverständlich muß er auch Platz für feinere Präpara- tionsarbeiten bieten. Die Präparierinstrumente werden am besten, soweit sie ständig zur Hand sein müssen, in einem gläsernen Kasten mit Deckel auf dem Tisch verwahrt. Deckeldosen für Objektträger XXVI, 1. Wolff : Über ein Minot- Mikrotom u. einen Mikroskopiertisch. 103 und Deckgläser , Flaschen für destilliertes Wasser , Alkohol , Xylol, Balsam und sonstige wichtigste Reagentien finden natürlich auch auf dem ]\rikroskopiertisch bequem Platz. Dagegen gehören alle anderen Gerätschaften und die Mehrzahl der Reagentienflaschen auf einen besonderen, einfachen größeren Tisch, auf dem der Paraffiuofen und ein Wasserbad oder ein einfacher Drei- fuß zum Kochen steht und auf dem auch alle gröberen Präparationen vorgenommen werden. Diese Dreiteilung der Einrichtung : Mikro- skopiertisch , Präpariertisch und Aufbewahrungsregal oder -schrank läßt sich bei den beschränktesten Raumverhältnissen und mit den bescheidensten Mitteln durchführen und gewährleistet ein sauberes und bequemes Arbeiten. Der neue Mikroskopiertisch wird für 25 Mk. von Zimmermann in bester Ausführung geliefert und entspricht nach meinen Er- fahrungen den erwähnten Anforderungen auf das vollkommenste (vgl. Fig. 5). Die Tischplatte ist 100 cm lang und 50 cm breit, schwarz ge- beizt und hat einen ringsum laufenden, 1 cm überstehenden Bord. Etwas rechts von der Mitte der Tischlänge (in der Figur aus Ver- sehen in die Mitte des Tisches gezeichnet) verschließt ein Deckel einen in der Mitte der Tischtiefe angebrachten runden Ausschnitt von 15 cm Durchmesser, unter dem in zwei Falzen, so daß er nach links herausgezogen und abgenommen werden kann (vgl. die Nebenzeich- nung auf Figur 5 , die die Einrichtung an der Unterseite der Tischplatte andeutet), ein 32 cm hoher Kasten von 16X16 cm Bodenfläche hängt. In diesem Kasten steht eine 2^/2 Literflasche mit einem bis dicht unter den Deckel reichenden Trichter. Rechts davon kann man eventuell noch einen in der Figur angedeuteten Schieber anbringen lassen, der bisweilen zur Vergrößerung der Tischfläche bequem ist. Ich habe es sehr bequem gefunden, daß das Gefäß zur Auf- nahme von Spülwasser nicht auf dem Tische herum steht, sondern in der geschilderten Weise unter das Niveau der Tischplatte versenkt ist. Besonders wenn man feinere Färbungen auf einzelnen Objekt- trägern oder Deckgläsern vornimmt (wie sie für den Arzt fast aus- schließlich in Betracht kommen), bei denen die mikroskopische Kon- trolle der Wirkung difterenzierender Medien eine Rolle spielt, aber auch sonst , bei gewöhnlichen Präparationen , ist es außerordentlich angenehm, daß man quasi den Ausguß dicht vor und unter dem Mikroskope hat. 104 Pöschl: Eine neue Methode der Härtemessung. XXVI, 1. Daß der Tisch selir leicht transportabel ist, wird sicher eben- falls in den Kreisen , für die er bestimmt ist , als ein wesentlicher Vorteil begrüßt werden. Man kann eben nicht nur die natürlichen, sondern auch die künstlichen Lichtverhältnisse auf das vollkommenste ausnutzen. [Eingegangen am 8. Februar 1909.] Eine neue Methode der Härtemessung. Von Dr. Viktor Pöschl in Graz. Hierzu eine Textabbildung. Unter den zahlreichen bisher in Anwendung gekommenen Me- thoden^ der Härtemessung an Mineralien oder Metallen gibt es wenige, welche einen Anspruch auf große Genauigkeit und Exaktheit machen können ; die besten unter ihnen lassen sich nur mit Hilfe schwierig herzustellender Apparate (wie z. B. des Mikrosklerometers von Jaggar) realisieren , oder sind nur für einen Teil aller festen Körper an- wendbar, wie die von Auerbach" vorgeschlagenen absoluten Härte- messungen. Die gewöhnlichen Methoden sind von so vielen Umständen be- einflußt, daß ein verläßliches Resultat nur ausnahmsweise zu erhalten ist. Die Hauptfehler vieler bisher üblich gewesener Messungen scheinen mir darin ihren Grund zu haben, daß, wenn auch das an- gewandte Instrument noch so genau konstruiert war, zu viel dem Experimentator überlassen blieb, von dessen Ermessen die Feststellung des Eintrittes des richtigen Momentes zur Ablesung abhing. Die ^) Vgl. die ausführliche Zusammenstellung der Literatur bei T. A. Jaggar, Ein Mikrosklerometer zur Härtebestimmung (Zeitschr. f. Krist. Bd. XXIX, 1898, p. 262). '^) Auerbach, F., Gott. Nachr. 1890, p. 518. XXVI, 1. Pöschl: Eine neue Methode der Iläitemessung. 105 ältesten Meßmethoden beruhen auf der Deformation durch Kitzen. Diese Methode ist jedoch aus mehrfachen Gründen unjjenau : das Ritzen hängt nämlich von der Beschafleuheit der Fläche, noch mehr von der Substanz und dem Drucke des ritzenden Körpers ab; der Zeitpunkt des Erkennens des Auftretens eines Ritzes kann ferner von dem einen Beobachter früher , von dem anderen später als der 106 Pöschl: Eine neue Methode der Härtemessung. XXVI, 1. maßgebende augeseben werden. Die Bolirmetbode entbehrt (abgegeben von den anderen Umständen) aucb desbalb der Genauigkeit , da es unmöglicb ist, die Tiefe der Bolirlöcher absolut genau zu messen — einer äbnlichen subjektiven Beurteilung unterliegen auch andere Arten der Härtebestimmung. Ich habe mich bemüht, die Härtemessung von subjektiven Mo- menten möglichst frei zu machen und ging deshalb von folgender Überlegung aus. Wirkt die Spitze eines Körpers auf die Fläche eines anderen, so wird durch die Bewegung der belasteten Spitze eine Arbeit geleistet, welche für dieselbe Belastung für irgend zwei Körper unter sonst gleichen Verhältnissen konstant bleiben muß. Die Arbeit äußert sich in Deformationen beider Körper. Nimmt man uun den einen, etwa die ritzende Spitze, praktisch als unveränderlich an, so muß die Deformation nur auf dem zweiten zur Geltung kommen. Wenn es nun gelingt, die Deformation auf der geritzten Fläche genau zu bestimmen, so ist damit die Grundlage für die Aufstellung eines Maßes der Härte gefunden. Zur Prüfung dieses Problems war not- wendig: ein möglichst genaues Skierometer, mittels dessen die De- formation erzeugt wird und eine Vorrichtung, diese zu bestimmen, am nächstliegenden ein Mikroskop. Diese Vereinigung von Mikro- skop und Skierometer ist in vorstehender Figur dargestellt und wird unten ausführlicher beschriebeu werden. Diese Kombination hat, wie ich glaube, gegenüber den bisher üblichen Methoden hauptsächlich den Vorteil, daß man in der Lage ist, die erzeugten Ritze nicht bloß qualitativ, sondern auch quantitativ zu untersuchen und deren absolute Größe anzugeben, was für die Berechnung der durch Deformation geleisteten Arbeit , somit des Härtemaßes unerläßlich ist. Wie schon angedeutet, habe ich mich zunächst für die Ritz- methode entschieden. Es gilt nämlich ein möglichst einfaches Instru- ment anzuwenden, um die Messungen bequem durchführen zu können. Ich benutze ein Sklerometer, das im Prinzip dem SEEBECKSchen Apparate^ und dem von Grailich und Pekarek" modifizierten ähnlich ist. ^) Dr. A. Seebeck, „Über Härteprüfung an Kristallen"; eine physik. Abb. z. Prüfungsprogramm des Realgymnasiums, Berlin 1833. ^) Grailich u. Pekärek, Das Sklerometer, ein Apparat zur genauen Messung der Härte der Kristalle (Sitzungsber. d. math.-naturw. Klasse d. kaiserl. Akad. d. Wiss. Wien, Bd. XIII, 1854, p. 410). XXVI, 1. Pöschl: Eine neue Methode der Härtemessung. 107 Auf drei mit Stellschrauben versehenen Füßen ruht eine Zink- platte , welche mit Hilfe einer angeschraubten Libelle (in der Figur am vorderen Teile der Platte sichtbar) leicht horizontal gestellt werden kann , wodurch auch gleichzeitig die Achse des Hebels in die hori- zontale Lage kommt. Dieser ruht auf einer an der Platte fest- gemachten Säule , kann beliebig gehoben und mittels der an der Säule sichtbaren Schraube fixiert werden. Der Hebel trägt an einem Ende die ritzende Spitze , die nach Bedarf durch Abschrauben ent- fernt und durch eine andere ersetzt werden kann. Jede Spitze trägt gleichzeitig die Schale zur Aufnahme der Gewicht6. Das Horizontal- stellen des Hebels geschieht durch eine (in der Figur links siclitbare) Schraube. Der Balken wird in eine solche Lage gebracht, daß die Spitze bei der Horizontalstellung des Hebels gerade die zu unter- sucliende Fläche des Körpers berührt. Dieser ist auf einem Wagen derart befestigt, daß die zu prüfende Fläche horizontal liegt. Um dies zu erreichen , macht man den Körper mit Kleb- wachs fest, Tegt eine Dosenlibelle auf die Fläche und dreht das kleine Tischchen, das den Körper trägt, in einem Kugelgelenke, bis der Körper die gewünschte Lage hat (in der Figur ist ein Topas- kristall zu sehen, der zur Bestimmung der Härte auf dem basischen Piuakoid eingestellt ist). Für unregelmäßige Körper verwende ich mit Vorteil eine Schale als Träger , die mittels eines angesetzten Gewindes bequem in der Kugel des Gelenkes eingeschraubt werden kann. Zur Untersuchung der Härte an den schmalen Ebenen von Plättchen schraube ich in die Kugel einen kleinen Schraubstock ein, der in einfacher Weise die Plättchen festklemmt. Das Kugelgelenk ist samt den daran befestigten Teilen auf dem Wagen mittels einer Quer- und Längsführung beweglich 5 mittels zweier Schrauben kann jede beliebige Stelle eines Körpers in das Zentrum einer Kreisscheibe gebracht werden , welche konzentrisch zur Grundplatte des Wagens drehbar ist. Mit Hilfe einer weiteren Schraube kann man die Platte, die die Gradeinteilung trägt, in jeder Lage feststellen. Der Wagen ruht auf drei Rädern, die auf Stahl- schienen laufen. Er besteht hauptsächlich (mit Ausnahme der Schrauben) aus Magnalium, ist also sehr leicht gebaut und beweglich. Die Säule, Füße usw. des Instruments sind aus Messing verfertigt. Der Wagen wird mit Hilfe einer Schnur, die über eine Rolle gelegt ist, mit der Hand oder durch Gewichte angezogen , die auf eine am Schnurende befindliche Schale gelegt werden. Mit dem Instrument allein kann die Härte auf verschiedene Weise gefunden und definiert werden, und zwar : 108 Pöschl: Eine neue Methode der Härtemessung. XXVI, 1. 1) Konstante (kleine) Belastung der Spitze. Härte wird be- trachtet als proportional der Anzahl der Abnutznugsbewegungen, bis ein (sichtbarer) Ritz auftritt. 2) Konstante (große) Belastung der Spitze. Härte umgekehrt proportional dem Gewicht, welches das Mineral zieht. 3) Härte proportional dem Gewicht, welches auf die Spitze wirkt. Ich will der dritten Methode aus leicht begreiflichen Gründen bei weitem den Vorzug geben ; denn hierbei läßt sich das Mikroskop am besten zur Untersuchung des Ritzes und somit zur Erhöhung der Genauigkeit der ganzen Messung heranziehen, und zwar nach folgen- den Voraussetzungen : Makroskopisch kann man nur feststellen, wann der Ritz sichtbar wird und welche Belastung der Spitze hierzu nötig ist. Daß dieses Sichtbarwerden in höchstem Grade ein subjektiver Begriff ist , liegt auf der Hand — und auch die Untersuchung auf mikroskopischem Wege ändert daran nichts. Denn auch hierbei tritt bei fortwährender Verringerung des aufgelegten Gewichtes der Fall ein, wo man schwer das Vorhandensein eines Ritzes als sicher aussprechen kann. Es ist klar, daß das kleinste Gewicht, das auf eine harte (z. B. Diamant-) Spitze wirkt , auf einem Kristall (z. B. Steinsalz) eine wenn auch kaum sichtbare Deformation erzielt. Wenn es bei den gewöhnlichen Vergrößerungen auch nicht gelingt, diese nachzuweisen, so muß man doch annehmen, daß ein ideales Instrument selbst die kleinsten Ritze sichtbar machen kann. — Es gibt nun den Ausweg, daß wir ein (beliebiges, aber genau anzugebendes) Gewicht auf die Spitze wirken lassen und die Breite und Tiefe des Ritzes genau mess en. Ich betrachte nun die Härte als umgekehrt proportional der Größe der Furche und benutze diese als Grundlage eines Maßes für die Härte. Die Messung ist frei von Subjektivität, denn auf mikroskopischem Wege kann man die Dimension der Furche bis auf einige /* genau messen. Das Instrument, welches ich hierzu benutze, ist ein Metallniikroskop aus der Firma C. Reichert, Wien^, nach Prof. Dr. A. Rejtö in Budapest. Die am Fuße angebrachte Schraube wird zurückgedreht, die Säule um die Achse des Mikro- skops um 180^, der Tisch außerdem um 90*^ gedreht, die Säule mit einer Schraube am Fuße wieder befestigt. In diesem Zustand wird 1) Vgl. Zentral-Zeitg. f. Optik u. Mechanik, 1897, No. 17. XXVI, 1. Pöschl: Eine neue Methode der Hürteinessung. 109 nun das ]\[ikroskop so seitlich dem Sklerometer genähert, daß der Wagen , nachdem er unter der Spitze weggezogen (und der Hebel mittels einer Schraube arretiert) wurde , die zu prüfende Fläche in das Gesichtsfeld des Mikroskops gebracht hat. Um dies zu erreichen, arbeitet man zunächst mit der schwachen Vergrößerung : mit Hilfe der Spitze wird ein Ritz gemacht , der Wagen seitwärts geschoben und das Mikroskop so gerückt, daß der Ritz das Gesichtsfeld halbiert. Hierauf wird der Fuß des Mikroskops zum Zwecke der Vermeidung einer Verschiebung beschwert (in der Figur nicht dargestellt). Für die schwache Vergrößerung (Reichert, Objektiv 2) reicht die Be- leuchtung im auffallenden Lichte hin. — Zum Zwecke der Ausführung von Messungen benutze ich eine starke Vergrößerung (Reichert, Objektiv 5) und zur Aufhellung des Gesichtsfeldes einen Beleuch- tungsapparat, der an Stelle des Okulars in den Auszug des Tubus eingesetzt wird. Als Lichtquelle dient ein Auerbrenner, der in einer Entfernung von etwa ^j^ m vom Mikroskop aufgestellt, von einem Tonzylinder umgeben ist, das Licht durch einen zylindrischen Ausatz austreten und in die Linse des Beleuchtungsapparates hineingelangen läßt. (In der Figur ist das Gehäuse des Beleuchtungsapparates als Kubus unterhalb des Okulars zu sehen ; das Licht hat man sich als von links kommend zu denken.) Das Prinzip des Beleuchtungsapparates sei kurz erwähnt. Durch die Linse (deren Fassung in der Figur links am schwarzen Gehäuse zu erkennen ist) werden die Licht- strahlen konvergent gemacht und durch die um 45^ gegen die Achse des Mikroskops geneigte Glasplatte in die Richtung der Tubusachse gelenkt. Die Lichtstrahlen beleuchten so das Objekt und werden von der Oberfläche des Körpers (die ja, wie oben bemerkt, horizontal gestellt wurde) wieder in der Richtung der Mikroskopachse reflektiert und gelangen so ins Auge. Für alle Objekte ist die Beleuchtung bei der Anwendung des Objektivs 5 in jeder Weise vorzüglich, für Objektiv 8 noch ausreichend. Nach Einstellung mit starker Vergrößerung wird der Ritz als Band sichtbar: seine Breite kann mit Hilfe eines Okularmikrometers (Okular 4), die Tiefe mittels der Mikrometerschraube auf 2 bis 3 jn genau gemessen werden. Handelt es sich um mehrere Härtemessungen nach einer Richtung, so braucht nur durch Drehen der Schraube am Support der Körper um ein Stückchen parallel verschoben werden. Wird dann durch Zurückschieben des Wagens , Niedersenken der Spitze und Ziehen des Wagens mit der Hand ein neuer Ritz erzeugt, 110 Pöschl: Eine neue Methode der Härtemessung. XXVI, 1. so erscheint dieser an derselben Stelle wie der frühere im Gesichts- felde des Mikroskops. Um für die Vergleichung verschiedener Kristalle ein brauch- bares Resultat zu erzielen, muß die Diamantspitze vollständig unver- ändert bleiben, wovon man sich durch genaue Untersuchung (mittels des Metallmikroskops) überzeugen kann. Ich habe bis jetzt haupt- sächlich weichere Kristalle untersucht und selbst nach mehrstündigen Versuchen nicht die geringste Änderung der Diamantspitze wahr- genommen , da die Ritze so schwach sein können , daß man sie mit freiem Auge kaum erkennen würde. Für die Bestimmung der Härte ist ferner vorteilhaft, daß die Größe des Ritzes von der Geschwindig- keit des Wagens ohne merkbaren Einfluß ist, und daß infolge des geringen Druckes der Spitze der störende Einfluß der Spaltbarkeit nicht zur Geltung kommt. Ich glaube daher, daß nur die Härte des Körpers die Ursache der Größe des Ritzes ist, die, schier unbeein- flußt von anderen Momenten , nur als Folge des molekularen Zu- sammenhanges der Teilchen erscheint. Anderseits können wir aus der Größe des Ritzes einen sicheren Schluß auf die Härte des Körpers ziehen. Auf dieser Grundlage wird es, wie ich hoffe, möglich sein, ein geeignetes Härtemaß aufzustellen, wenn man ein reiches Unter- suchungsmaterial zur Verfügung haben wird. Darüber und über noch auszuarbeitende Details gedenke ich in Bälde ausführlich zu berichten. Graz, K. K, Handelsakademie. [Eingegangen am 16. Februar 1909.] XXVI, 1. Scheffer: Spiegel-Reflex-Camera f. mikrophotogr. Aufnahm, m Über eine Spiegel -Reflex -Camera für mikrophoto- graphische Aufnahmen. Von Dr. W. Scheffer in Berlin. Hierzu drei Textabbildungen. Die Aufgabestellung für die Konstruktion dieser Camera war: Eine mikrophotographische Camera zu schaffen, die es ermöglicht, in bequemer Körperhaltung zugleich die Vorgänge auf der Matt- scheibe zu beobachten und alle am Mikroskop und der Beleuchtungs- einrichtung notwendigen Hantierungen auszuführen. Weiter sollte die Beobachtung der Vorgänge auf der Mattscheibe bei bereits geöffneter Kassette geschehen , so daß zwischen der Beobachtung des Matt- scbeibenbildes und der Aufnahme kein nennenswerter Zeitraum liegt. Figur 1 zeigt schematisch die Lösung dieser Aufgabe. In einem Holzkasten sind zwei Spiegel eingebaut: Ä und B. Das von dem Mikroskop durch kommende Licht wird durch 2malige Spiegelung durch die Spiegel Ä und B auf die Mattscheibe M geworfen. Das Okularende des Mikroskopes ist mit durch das bekannte Trichter- stück lichtdicht verbunden. In V ist ein Schlitzverschluß , der aus- gelöst wird, wenn der Spiegel A aus der Stellung DE in die Stellung D E' um die Achse D gedreht wird. Der Verschluß wird erst dann ausgelöst, wenn die Endlage DE' erreicht ist. Wenn der Ver- schluß V sich öffnet , geht das Licht vom Mikroskop geradlinig im Sinne des Pfeiles zu der freiliegenden, lichtempfindlichen Platte P, die in der Kassette C liegt. Der Raum vor P ist vollkommen dunkel, wenn der Schlitzverschluß V gespannt oder abgelaufen ist. Wenn man den Schlitzschluß aus der Camera herausnimmt, genügt der Spiegel Ä in der Stellung D E^ um alles vom Mikroskop kommende Licht auf 31 zu werfen und die Platte P vollkommen vor Licht zu schützen. Dies ist wichtig für die Herstellung länger andauernder Zeitaufnahmen. ll^ Scheffer: Spiegel-Reflex-Camera f. mikrophotogr. Aufnahm. XXVI, 1. Figur 2 zeigt die praktische Ausführung einer derartigen Camera in Verbindung mit der großen Zeiss sollen mikrophotographischen Camera. Der vordere konische Teil der Camera ist ersetzt durch die hier beschriebene Neukonstruktion. Wie die Figur zeigt, läßt sich dieselbe ohne weiteres in die große raikrophotographische Camera von Zeiss einbauen. Bei ist das Trichterstück zu sehen, welches die lichtdichte Verbindung mit dem Mikroskop bewirkt und bei M die Mattscheibe. Bei H sieht man den Hebel, mit dem der Spiegel A (Fig. 1) gehoben wird. K ist ein Knopf, mit dem der Spiegel A in J Q d 11 •-! £J ■M Ul J^ Q A- W 1. & -y^ der Stellung D E' festgehalten werden kann. Bei V liegt der Schlitz- verschluß. Die Verbindung des hinteren Balgenteiles mit dem Holz- kasten ist genau dieselbe wie die der beiden Teile der großen mikrophotographischen Camera. Die Spiegel-Reflex-Camera kann also ohne weiteres gegen den üblichen konischen Vorderteil ausgewechselt werden. Bei C liegt die Kassette. Natürlich muß die Anordnung so getroffen werden , daß der optische Weg von bis M gleich lang ist demjenigen von bis C. Bei dieser Anordnung kann man bei ungezwungener Körperhaltung die grobe und die feine Tubus- bewegung, den Kreuztisch, den Abbe sehen Beleuchtungsapparat, die Beleuchtungsvorrichtungeu auf der optischen Bank mit der rechten Hand verstellen und zugleich die Wirkung dieser Manipulationen auf XXVI, 1. Scheffer: Spiegel-Reflex-Camera f. mikrophotogr. Aufnahm. 1]3 das Mattsclieibenbild beobachten. Um eine mikrophotograpliische Auf- nahme zu machen, spannt man zuerst den Schlitzverschluß, setzt bei C die Kassette mit der lichtempfindlichen Platte ein und zieht den Schieber der Kassette auf. In dem Moment, in dem man belichten will, drückt man den Hebel H mit der linken freien Hand lierunter und die Aufnahme geschieht ohne irgendwelchen Zeitverlust. Ursprünglich wurde dieser Apparat konstruiert, um Aufnahmen von rasch beweglichen Objekten herzustellen. In der Tat gelang es, sowohl in durchfallendem Licht wie bei Dunkelfeldbeleuchtung, mit Sicherheit auch schnell bewegte Objekte scharf aufzunehmen und ihr Bild auch in die Mitte der Platte zu bringen. Es stellte sich b^ld 2. heraus, daß dieser Apparat nicht nur für Momentaufnahmen, sondern für alle Aufgaben der Mikrophotographie, sowie auch für die Kine- matographie mikroskopischer Objekte erhebliche Vorteile bietet. Die Möglichkeit, die Einstellung bis zum Moment der Aufnahme zu beobachten , ist von großem Nutzen. Veränderungen der Ein- stellungen kommen ja leider ziemlich häufig vor und jeder Mikro- photograph hat wohl schon mit dieser Schwierigkeit zu kämpfen gehabt. Wenn man z. B. eine Diatomee mit stark schiefer Beleuch- tung aufnehmen will, kann man durch Herunterlassen des Spiegels während der Exposition die Einstellung kontrollieren. Für längere Zeitaufnahmen gerade dieser Art, bei denen es auf besonders genaue Einstellung ankommt, ist diese Einrichtung recht zweckmäßig. Der Einwand , daß man bei diesem Apparat nur mit einer bestimmten Auszugslänge arbeiten kann, ist nach unseren Erfahrungen nicht Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. 8 114 Scheffer: Spiegel-Reflex-Camera f. mikrophotogr. Aufnahm. XXYI, 1. stichhaltig. In unserem Laboratorium haben wir seit über einem Jahre alle überhaupt vorkommenden Aufnahmen der mannigfach- sten Art mit der festen Balgenlänge von einem Meter gemacht, wir waren noch nicht einmal in der Lage, uns einen veränderlichen Balgenauszug zu wünschen. Die konstante Auszugslänge hat den Vorteil, daß man späterhin bequem die Vergrößerung angeben kann. Das erste Modell einer solchen Mikro- Spiegel -Reflex -Camera wurde nach einer Zeichnung des Verfassers von der Firma A. Stegemann, Berlin , ausgeführt. Dasselbe ist seit über einem Jahr in unserem Laboratorium in häufiger Benutzung, und es hat während der ganzen Zeit ohne irgendwelche Störung zu unserer Zufriedenheit funktioniert- Für die Momentaufnahme lichtempfindlicher Objekte wurde zu diesem Apparat noch eine Zusatzvori'ichtung gebaut. Figur 3 zeigt > 12 3 5 Der 44 Seiten lange Absclinitt, der den Untersuchiingsmethoden pathologischer Gewebe und Flüssigkeiten gewidmet ist, soll An- fängern zur Einführung dienen. Ein kurzes Kapitel ist der Unter- suchung frischer Objekte gewidmet. Dann folgen Anweisungen zur Fixierung, Härtung, Entwässerung, Entkalkung, Einbettung in Paraffin und Celloidin, Handhabung der Mikrotome und Einschluß der Schnitte. Eine reiche Auswahl von Methoden findet sich in dem Kapitel über die Färbung. Neben den einfachen Karmin- und Hämatoxylinfärbungen sind kompliziertere Strukturdetails darstellende und differenzierende Methoden geschildert, so für Protoplasmagranulationen, für Fibrin, Fett, Hyalin, Amyloid, Glykogen, Schleim, elastische Fasern, Pig- mente, Mast- und Plasmazellen, Blut, Markscheiden, Achsenzylinder, Neuroglia, Nervenzellen und Neurofibrillen. Die wichtigsten Bak- terienfärbungen sind zum Schluß in einem kleinen Kapitel beschrieben. Die Darstellung ist übersichtlich. 0. Levy (Leijjzig). Korauyi, A. v., u. Richter, P. F., Physikalisehe Chemie und Medizin. Ein Handbuch unter Mitwirkung von Dr. J. Bence, Prof. Dr. Boruttau, Prof. Dr. F. Bottazzi, Dr. F. Frankenhäüser, Dr. R. Höber, Prof. Dr. A. v. KoRANYi, Prof. Dr. A. Loewy, Prof. Dr. L. Michaelis, Dr. Oker-Blom , Prof. Dr. P. F. Richter , Dr. M. Roloff, Prof. Dr. C. Spiro und Prof. Dr. H. Strauss herausgegeben. Bd. I. Mit 27 Abbildungen. 575 pp. Leipzig (G. Thieme) 1907. 16 M.; geb. 19 M. Daß sich die für den Biologen geschriebenen Handbücher der physikalischen Chemie mehren — ich erinnere an das bereits in zweiter Auflage vorliegende Lehrbuch Höbers, an Hamburgers Hand- buch über osmotischen Druck und Formenlehre in den medizinischen Wissenschaften, — ist ein erfreuliches Zeichen für das steigende Interesse der Naturwissenschaftler und Mediziner an den Fragen der physikalischen Chemie. Das neue Handbuch von Koranyi und Richter bringt in seinem ersten Bande eine „physikalisch chemische Einleitung und Methodik", welche Roloff geschrieben hat; sie orientiert in kürzester Form über Materie und Energie , Atom- und Molekular- theorie , die Aggregatzustände der Materie, über die Theorie der Lösungen , chemische Reaktionen , elektrolytische Dissoziation und Elektrochemie; diese Einführung mit ihrem vielseitigen die neuesten Errungenschaften berücksichtigenden Inhalt wird vielen Biologen sehr willkommen sein. 126 Referate. XXVI, 1. Deu Interessen unserer Zeitschrift entsprechend sei besonders auf den Inhalt des von Oker-Blom abgefaßten Aufsatzes über „Das Blut in physikalisch -chemischer Beziehung" hingewiesen. Weiterhin bringt der erste Band folgende Aufsätze: A. Loewy, Respiration; R. Höber, Die physikalische Chemie in der Physiologie der Resorption, der Lymphbildung und der Sekretion; H, Boruttau, Muskel- und Nervenpliysiologie; F. Bottazzi, Die Regulation des osmotischen Druckes im tierischen Organismus. Küster (Kiel). Schurig, W., Biologische Experimente nebst einem An- hang: Mikroskopische Technik. Ein Hilfsbuch für den biologischen Unterricht, insbesondere für die Hand des Lehrers, Studierenden und Naturfreundes. Leipzig (Quelle u. Meyer) 1909. 180 pp. 2*40 M. ; geb. 2*80 M. Dem Lehrer und dem Studierenden wird das vorliegende Büch- lein, das eine Reihe pflanzen- und tierphysiologischer und -biologischer Versuche schildert, gewiß nicht immer genügen. An verschiedenen Stellen sind mir Ungenauigkeiten aufgefallen. Der die „Mikrosko- pische Technik" behandelnde Abschnitt gibt Anweisung zum Betäuben, Töten und Konservieren der Tiere , Anfertigung, Färbung und Auf- bewahrung zoologischer Präparate u. a. m. Küster (Kiel). 2. Präparationsmethoden im allgemeinen. Boiiney, V., Eine neue und sehr schnelle Dreifach- Färbung (Virchows Arch. Bd. CXCHI, 1908, H. 3, p. 547 —549). Verf. hat im Jahre 1906 eine neue Methode einer Dreifach- Färbung veröft'entlicht mit Safranin , Methylviolett und Orange G ^. Jetzt hat er diese Methode derartig modifiziert, daß sie einfacher und sicherer geworden ist und statt einer Stunde nur 5 Minuten beansprucht. Methode: Lösung I: Methylviolett 25-0 Pyronin 10 Destilliertes Wasser ad 1000 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 155—156. XXVI, 1. Referate. 127 erwärmen bis zur Lösung und filtrieren. Lösung II: Zu 100 cc Aceton füge mau langsam , Tropfen für Tropfen , aus einer Tropfflasche, eine 2prozentige wässerige Lösung von Orange G (erwärmt bis zur Lösung und filtriert) liinzu. Wälirend man die Farblösung hinzufügt, rühre man das Gemisch energisch mit einem Glasstabe um. Sobald die Flüssigkeit eine zartgelbe Farbe bekommen hat, tritt eine leichte Trübung auf. Weiterer Farbzusatz macht dieselbe stärker, bis sich ein flockiger Niederschlag gebildet hat. Setzt man nun noch weiter Orange G, Tropfen für Tropfen, zu, so löst sich dieser Niederschlag bald. Jetzt filtriere man in eine Flasche und signiere „Orange- Aceton". Es ist wichtig, die Orange G-Lösung sehr langsam zu- zusetzen, da sonst der Niederschlag nicht erscheint. Nach 24 Stunden hat sich ein kristallinischer Niederschlag gebildet, der mit der Zeit noch zunimmt, aber die Wirksamkeit der Lösung nicht beeinträchtigt. Ausführung der Färbung: 1) Das Material wird fixiert in einer Mischung von Eisessig einen Teil , absoluter Alkohol 2 Teile, Alkohol oder Sublimatlösung, Chromsäureverbindungen und Formol machen die Methode unbrauchbar , wenn nicht unmittelbar nach der Färbung die Schnitte mit oxydierenden Agentien behandelt werden. 2) Färben in Lösung I während 2 Minuten. 3) Schnelles Ab- spülen in Wasser und Abwischen des Objektträgers „mit Ausnahme des Schnittes". 4) Übergießen des Objektträgers mit Orange- Aceton. Es bildet sich eine dunkle Farbe. Abspülen und Wieder- übergießen bis keine Farbe mehr herauskommt. 5) Schnelles Waschen in reinem Aceton. 6) Übertragen in Xylol, Balsam usw. Da das Aceton sehr flüchtig ist, achte man darauf, daß die Schnitte nicht eintrocknen. Die ganze Färbung dauert 5 Minuten oder weniger. Ist die Färbung zu stark oder zu schwach geworden, so bringe man die Schnitte durch Aceton in Wasser und beginne von neuem , bis der gewünschte Farbenton erzielt ist. Die ganze Chro- matinsubstanz wird durch das Methylviolett gefärbt , wobei Mitosen und Kerne sehr deutlich hervortreten. Keratin färbt sich violett. Lymphocyten, deren Kern aus Chromatin besteht, färben sich eben- falls violett. Das Protoplasma aller Zellen wird verschieden stark rot durch das Pyronin. Der Körper der Plasmazellen ist lebhaft gefärbt , ebenso der der Epithelzellen , besonders in den tieferen Lagen eines Plattenepithels. Das Protoplasma der fixen Binde- gewebs- und Endothelzellen ist weniger stark gefärbt. Die binde- gewebige Grundsubstanz nimmt durch das Orange G ebenso wie die Interzellularsubstanz zwischen Epithelzellen eine gelbe Farbe an. 128 Referate. XXVI, 1. Diese ausgesprochene Differenzieriiuj? der einzelnen Oewebselemente hat einen besonderen Wert bei Untersuchungen mit starken Ver- größerungen. Die Metliode verdient, auch bei gewohnliclien Unter- suchungen infolge ihrer Schnelligkeit und Einfachheit statt des Hämatoxylins angewandt zu werden. Die Färbung ist beständig und kann auch mit der Weigert sehen Färbung für elastische Fasern verbunden werden. Zur Färbung der Plasmazellen steht sie der Pappeniieim sehen Färbung gleich, doch differenziert sie die Mastzellen nicht so deutlich. Anderseits aber gibt sie gute Kon- traste zwischen den verschiedenen Typen der Zellen , was die Pappenheim sehe Färbung nicht leistet. Für Blutpräparate ist die Methode nicht geeignet. Arbeitet man mit künstlichem Lichte , so empfiehlt sich die Verwendung einer blauen Scheibe. Schiefferdecker {Bonn). Oelsner, L., Praktisches Gefäß zur völligen Entwässe- rung nicht gänzlich absoluten Alkohols (Deutsche med. Wochenschr. Jahrg. XXXIV, 1908, No. 47, p. 2034). Verf. beschreibt ein durch eine Abbildung erläutertes Glasgefäß, das er besonders den mit Paraffin arbeitenden Histologen und patho- logischen Anatomen empfiehlt. Dasselbe soll die folgenden Vorteile haben: 1) Vermöge seiner Konstruktion erlaubt es die Unterbringung einer größeren Anzahl verschiedener Objekte und schließt eine Ver- wechslungsmöglichkeit aus. 2) Ohne Lüftung des Deckels kann völlig wasserfreier Alkohol dem oberen Hahne des Gefäßes entnommen werden. 3) Das in einem Einsätze untergebrachte ausgeglühte Kupfer- sulfat ist durch Filtrierpapier so vom Alkohol abgeschlossen , daß bei reinlicher Hantierung während des Einfüllens ein Übergehen des Pulvers in die Flüssigkeit nicht vorkommt. 4) Der bei Umrandung mit Vaseline in eine Nute eintauchende Deckel schließt luftdicht ab. Betreffs der näheren Beschreibung und Gebrauchsanweisung wird auf das Original verwiesen. Der Apparat wird nach Angaben des Verf. von der Firma M. Schaerer, A.-G., in Bern gebaut. Schiefferdecker {Bonri). Hornowski, Gleichzeitige di ff eren zielte Färbungs- methode des Bindegewebes, der Muskelfasern und der elastischen Fasern (Przegl. lekarski No. 44, 1908, Ref. n. Ber. in Deutsche med. Wochensch. Jahrg. XXXIV, No. 49, 1908, p. 213.5). XXVI, 1. Referate. 129 Man braucht drei Lösuiif^en : Lösung I II; III; Hämatoxylin, kristallisiert . . . 0-20 s Resorcin-Fuchsin (Grübler) . . . 0-02 „ Alkohol, TOprozentig . . . . 100-00 cc Liquor ferri sesquichl. Pharm. • 1-00 „ Salzsäure, konzentriert, rein . . 2-00 „ Säurefuchsin . 010 g Pikrinsäure, konzentrierte, wässe- rige Lösung . . 100-00 cc Vor jedesmaliger Verwendung wird auf je 5 cc der Lösung I ein Tropfen der Lösung II zugesetzt , wodurch die Lösung I etwas dunkler wird, und in dieser Mischung wird das Präparat 12 bis 24 Stunden laug gefärbt. Dann schnelles Abspülen, Übertragen für eine halbe Minute in die Lösung III schnelles Abwaschen mit 96prozen- tigem Alkohol, ebenso mit Karbol-Xylol (1:3), dann Xylol, Balsam. Resultat : Bindegewebe rot , Muskel gelb , Zellkerne dunkelgrau, elastische Fasern fast schwarz. Schiefferdecker [Bonn). 3. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. A, Niedere Tiere, Awerinzew, S., Über ein parasitisches Infusor aus dem Darm von Ophelia limacina (Rathke) (Zeitschr. f. wiss. ZooL Bd. XC, 1908, p. 334—342 m. 1 Tfl.). In erster Instanz wurde das in Frage stehende Infusor natür- lich im lebenden Zustande entweder einfach in einem Tropfen Darm- saft oder zusammen mit dem Darmiuhalt von Ophelia limacina untersucht, wobei im letzteren Falle mit Seewasser oder physio- logischer • Kochsalzlösung verdünnt wurde. Bei der Anfertigung von Dauerpräparaten wurde fast ausschließlich mit dem von Schaudinn empfohlenen Gemisch von einem Teil wässeriger konzentrierter Sublimat- lösung und 2 Teilen absoluten Alkohols fixiert und mit Delafields Hämatoxylin oder Eisenhämatoxylin nach Heidenhain gefärbt. Bei einigen Präparaten wurde auch noch die Färbung mit eosinsaurem Methylenblau mit nachfolgender, sehr kurz dauernder Differenzierung in Aceton angewendet, der Einschluß derselben muß nach Passieren Zeitschr. f. wiss. Mikrcslcopie. XXVI, 1. 9 130 lleferate. XXVI, 1. von Aceton -Xylol und reinem Xylol in neutralem Kanadabalsam er- folgen. Näheres über diese Methode, die hauptsächlich beim Studium der Anordnung der Kernelemente in der Zelle mit Erfolg angewendet werden kann , verspricht Verf. in einer späteren Arbeit zu geben. E. Schoebel (Neapel). Tschachotin, S., DieStatocyste derHeteropoden (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XC, 1908, p. 343—422 m. 15 Figg. u. 5 Ttln.). Außer dem Studium der Statocysten in situ an lebendem Ma- terial werden selbstverständlich in weitgehendem Maße Untersuchungen an fixierten Objekten vorgenommen. Als Fixierungsmittel wurde ver- wendet Formol , Sublimat - Formol , Sublimat , Sublimat - Essigsäure, Per^nyis Flüssigkeit, Flemmings Gemisch, Osmiumsäure einprozentig und O'lprozentig, Hermann sehe Mischung und einprozentige wässerige Lösung von Kaliumbichromat. Die mit den letzten vier Reagentien behandelten Objekte konnten zum Teil ungefärbt untersucht werden, während nach den übrigen mit Boraxkarmin, Delafields Hämatoxylin, Ilämalaun und besonders Eisenhämatoxylin gefärbt wurde. Außer- dem kam noch Apathys Vorvergolduugsmethode und die vitale Me- thylenblaufärbung mit Erfolg zur Anwendung. — Weiter wurden Zerzupfungs- und Mazeratiouspräparate hergestellt, wobei das Hert- wiGsche Osmium -Essigsäure -Gemisch die besten Dienste leistete. Schließlich wurden die Objekte auch auf Schnitten studiert, die mit Boraxkarmin Bleu de Lyon, Boraxkarmin-Osmiumsänre-Holzessig oder Boraxkarmin-Hämatoxyliu-Kaliumchromat-Hämalaun-Eosin oder schließ- lich mit Eisenhämatoxylin gefärbt waren. Physiologische Unter- suchungen wurden entweder an isolierten Statocysten unter dem Deckglas oder in situ in einem eigens für diese Zwecke konstruierten Gestell zum Festhalten des Tieres gemacht. Letzteres besteht, wie nachstehende Figur veranschaulicht , aus zwei Holzplatten a und /;, die miteinander durch zwei starke Metalldrähte c und d verbunden sind, und zwar derart, daß jene auf letzteren gegeneinander ver- schoben werden können. Die eine der beiden Holzplatten (b) besitzt in der Mitte ein größeres Loch, in welchem ein Glasrohr R steckt. In dieses wird das Tier T hineingeschoben und mittels eines Kaut- schukschlauchstückes K am Herausschlnpfen verhindert ; der Rüssel des Tieres wird durch ein kleineres Loch o in der Platte a gezogen und hier mit einer Fadenschlinge am Stift 7i festgebunden. Das Gestell samt dem Tier wird in eine mit Seewasser gefüllte Schale O XXVI, 1. Referate. 131 gelegt und alles zusammen dann auf den Objekttisch des Mikroskopes gebracht. Durch Drehen des Rohres R um seine Längsachse kann das Tier bequem in jede beliebige Lage eingestellt werden, um die Statocysten von allen Seiten zu beobachten. Ein oder beiderseitige Exstirpation des Organes und verschiedene Nerven- oder Ganglien- durchschneidung zusammen mit der vitalen Methj'^lenblaufärbung gaben die Möglichkeit, die Grundzüge des Faserverlaufes im Cerebral- ganglion zu ermitteln. Zur Feststellung der chemischen Natur der Statolithen wurden schließlich eine Reihe mikrochemischer Reaktionen nach dem Lehrbuch der mikrochemischen Analyse von H. Behrens ausgeführt. E. Schoehel {Neapel). Stantschinsky, W., Über den Bau der Rückenaugen und die Histologie der Rückenregion der Oncidien (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XC, 1908, p. 137—180 m. 1 Fig. u. 3 Tfln.). Zur Untersuchung lag nur älteres, wohl ausschließlich in Alkohol konserviertes Sammlungsmaterial vor. Große Schwierigkeiten bot in- folgedessen die Färbung. Brauchbar erwies sich Delafields Häma- toxylin, Säurefuchsin- Pikrinsäure nach van Gieson, Jod-Jodkali-Gold- chlorid-Anilinwasser nach Nabias und Eisenhämatoxylin kombiniert mit Orange. Schließlich kam noch Tinktion mit Boraxkarmin und nachfolgende Methylenblaufärbung zur Differenzierung drüsiger und schleimiger Elemente zur Verwendung. Eingebettet wurde in Paraffin. E. Schoehel {Neapel). Döring, W., Über Bau und Entwicklung des weiblichen Geschlechtsapparates bei myopsiden Cephalo- poden (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XCI, 1908, p. 112—189 m. 59 Figg.). 9* 132 Referate. XXVI, 1. Zur Untersiiclnnif? diente Material , das im wesentlichen mit Sublimat oder Formol fixiert war ; für Embryonen scheint aber Pikrin- säure bessere Resultate zu geben. Als Färbemittel bewährte sich neben Säurekarmin und Hämalaun vor allem noch Ehrlich s Häma- toxylin und IIeidenhains Eisenhämatoxylin. Das Ausspringen des Dotters beim Schneiden wurde durch Überstreichen des Blockes mit sehr verdünntem Mastixkollodium leicht vermieden. E. Schoebel (Neapel). PliiliptsclienkO, J. , Beiträge zur Kenntnis der Aptery- goten. 2. Über die Kopf drüsen d er Thy sanur en (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. XCI, 1908, p. 93—111 m. 2 Figg. u. 2 Ttln.). Ein Teil des Untersuchungsmaterials (Machilis , Ctenolepisraa) wurde mit heißer Sublimat-Essigsäure , ein anderer (Campodea) mit heißer Jodjodkaliumlösuug fixiert. Gefärbt wurden die Schnitte mit Hämatoxylin, Safranin, Thionin u. a. E. Schoebel (Neapel). Moiitgomery, Th. H. jr., On the Maturation of Mitoses and Fertilization of the EggofTheridium (Zool» Jahrb., Morph. Abt., Bd. XXV, 1907, p. 237— 250 m. 2 Tfln.). Die Eier wurden dem geöff"neten Kokon entnommen und direkt in die Fixierungsflüssigkeit getan, immer die eine Hälfte in das GiLSONSche Gemisch (gesättigte Lösung von Sublimat in gleichen Maßteileu von absolutem Alkohol, Eisessig und Chloroform), die andere in das TowERSche (95 Teile gesättigter Sublimatlösung in 35prozen- tigen Alkohol, 2 Teile Eisessig und 3 Teile Salpetersäure). Letztere Flüssigkeit wurde heiß, erstere kalt verwendet. Das Tower sehe Geraisch gibt sehr gute Resultate vor der Furchuug, aber nur selten solche von späteren Stadien. Gilsons Flüssigkeit dagegen gibt aus- gezeichnete Fixierung von den Keruteilungsfiguren aller Stadien und hat den weiteren Vorteil die Eihülle so vom Ei zu trennen, daß sie bequem abpräpariert werden kann , dafür aber den Nachteil , die Eiform weniger gut zu erhalten und die äußere Dotterschicht von der inneren abzuspalten, speziell während der ersten halben Stunde nach der Eiablage. Vor dem Färben und Einbetten wurde die äußere Eimembran immer entfernt. Die Entwässerung der Eier im Alkohol wurde rasch vollzogen und dabei dem absoluten Alkohol etwas Eosin zugesetzt, um die Eier leichter sichtbar für die Paraffin- einbettung zu machen. Gefärbt wurden die Schnitte mit Delafields XXVI, 1. Referate. 133 Hämatoxylin kombiniert mit Eosin. Auch Totulprä parate wurden angefertigt und ebenfalls mit Delafields Hämatoxylin gefärbt. E. Schoebel {Neapel). B, Wirbeltiere, Golodetz, L., u. Uliua, P. G., Zur Chemie der Haut (Monatsh. f. prakt. Dermatol. Bd. XLVH, 1908, p. 1—17 m. 1 Tfl.). Verf. behandelt in dieser Arbeit den mikrochemischen Nachweis des Cholesterins in der menschlichen Haut. Man darf die Haut vorher nicht mit Lösungsmitteln des Cholesterins in Berührung bringen: Eine Fixierung in Alkohol und Einbettung in Celloidin ist daher aus- geschlossen. Ferner ist es ratsam, das subkutane, stets cholesterin- haltige Fett, wenigstens größtenteils vorher zu beseitigen. Die Haut kann der Leiche entnommen werden, am besten der Kopfhaut, der Achselhöhle und Fußsohle. Das Hautstück wird frisch mit Chloräthyl vereist und in der Richtung von der Hornschicht zur Subcutis ge- schnitten, indem man dafür sorgt, daß nach jedem Zuge das fettig gewordene Messer durch Abwischen mit Äther oder Benzin gut ge- reinigt wird. Die Schnitte läßt man auf Objektträgern einzeln an- trocknen, dann bringt man einen Tropfen des Reagenz von Golodetz auf ein Deckglas, bedeckt damit das Präparat und untersucht sofort. Das genannte Reagenz besteht aus einer Mischung von 5 Teilen konzentrierter Schwefelsäure und 2 Teilen Formalin (30 Prozent). In dieser Mischung werden die Schnitte nur sehr wenig angegriffen, es tritt eine schwarzbraune Farbenreaktion ein. Diese beginnt schon nach einer bis 2 Minuten. Schieferdecker (Bonn). Ciliano, P. , Eleidin (Monatsh. f. prakt. Dermatol. Bd. XLVI, 1908, p. 435—441). Verf. hat versucht, die chemische Natur des Eleidins zu er- forschen, und zwar vorzugsweise unter Zuhilfenahme chemischer Reagentien resp. mikrochemischer Reaktionen. Nach dem, was bisher über Eleidin bekannt geworden ist, konnte dieses entweder eine Eiweißsubstanz sein oder ein Glyzerinfett oder ein Lipoid oder eine Mischung dieser Substanzen. Es ergab sich, daß das Eleidin ein genuines Eiweiß, und zwar ein Albumin ist. Hieraus ergibt sich dann auch, wie die Hautstücke, die zur Darstellung des Eleidins 134 Referate. XXVI, 1. gebraucht werden sollen, am besten fixiert werden: Es darf keine albuminlösende Substanz verwendet werden , wohl aber fettlösende Substanzen. Als bestes Ilärtungsmittel empfiehlt Verf. einen koch- salzhaltigen starken Alkohol (0'2 Prozent Kochsalz in 96prozentigem Alkohol). Die gewöhnliche Celloidineinbettung mit Alkohol und Äther kann benutzt werden. Wenn sich das Eleidin in Hautstücken , die lange in Alkohol konserviert waren, manchmal nicht mehr nachw^eisen läßt, so liegt das nicht an dem Alkoholgehalte der Flüssigkeit, son- dern an ihrem Wassergehalte. Man hat also bis zur Färbung des Eleidins , welche an und für sich eine Art von Fixierung desselben bewirkt, vor allem einen längeren Aufenthalt in wässerigen Flüssig- keiten zu vermeiden (z. B. in verdünntem Alkohol). Gefärbt wurden die Schnitte in einer O'öprozentigen wässerigen Lösung von Nigrosin (20 bis 30 Minuten oder länger), dann Alkohol, Bergamottöl und Kanadabalsam. Schiefferdecker {Bonn). Oavazzeili, G. A. , Trichohyalin (Monatsh. f. prakt. Dermatol. Bd. XLVIl, 1908, p. 229—242). VÖRNER hat im Jahre 1903 festgestellt, daß die Körnchen des Haarmarkes und der Wurzelscheide weder mit Keratohyalin noch mit Eleidin identisch sind. Färberisch sind große Unterschiede fest- zustellen. Verf. hat nun durch seine Untersuchungen die am besten zur Färbung geeigneten Farbstoffe festzustellen versucht. Die besten Färbungen auf Trichohyalin geben folgende Farbstoffe bei langer Färbung (eine Nacht und länger) in sehr verdünnten Lösungen (0*1 bis 0*5 : 1000), z. B. einen bis 2 Tropfen der einprozentigen Farb- lösung auf ein Schälchen Wasser: a. Basische Farbstoffe: Safranin, Brillantgrün, Fuchsin, b. Saure Farbstoffe: Eosin, Pikrinsäure, Orange, Crocein (die Lösung muß farbstärker sein), Ponceau (die Lösung muß wieder farbstärker sein) , Karmine (be- sonders Alaunkarmin und Lithioukarmin) : diese zeigen Keratohyalin und Trichohyalin in kontrastierenden Nuancen von rot. Als Kontrast- färbungen zwischen Trichohyalin und Keratohyalin werden die folgen- den empfohlen: a. Hämalaun-Safranin-Tannin- Methode (Unna) : Starkes Hämalaun eine Stunde ; Wasser (lange Einwirkung) ; Safraninlösung (oder Safranin-Anilin-Lösung); 2prozentige wässerige Lösung 5 bis 10 Minuten; Wasser; gesättigte wässerige Tanniulösung 15 bis 30 Minuten; Wasser; Alkohol bis zu fast völliger Entfärbung, b. Häm alaun-E osin-Me tho de : Hämalaun eine halbe bis eine Stunde ; Wasser, lange Einwirkung ; Eosin (2 Tropfen einer einprozen- XXVI, 1. Referate. 135 tigen wässerigen Eiosinlösuug in eine l'i:Tiii-Scliale mit Wasser) 24 bis 48 Stunden; iu Wasser gut abspülen; Alkohol, Öl, Balsam, c. Häm- alau n-Pikrinsäure-Methode (Gavazzeni) : Hämalaun, eine Stunde lang ; Wasser , sehr lange Einwirkung ; Alkohol ; gesättigte alkoholische Pikrinsäurelösung 2 Minuten ; Alkohol , Öl , Balsam, d. Hämalauu-Pikroindigokarmin- Methode (Gavazzeni): Hämalaun eine Stunde ; Wasser, lange Einwirkung ; Pikroindigokarmin 5 bis 10 Minuten ; in Wasser gut abspülen ; Alkohol , bis Farbstoff abgeht, Öl, Balsam. Statt des Hämalaun (Mayer) kann jede gute Alaun-Hämatein-Lösung benutzt werden. Schiefferdecker (Bonn). Lundahl , Gr. , Beitrag zur Kenntnis der sogenannten Grenzfibrilleu der Epithelzellen (Anat. Hefte, H. 112 [Bd. XXXVH, H. 2], 1908, p. 201— 215 m. 3 Tfln.). Die Untersuchungen wurden ausgeführt an dem Verdauungsrohre von Crustaceen (Maja squinado und Langusta) , von Lumbricus ter- restris und von Proteus anguineus. Fixiert wurde iu Carnoy scher Flüssigkeit, gefärbt mit: Weigert s EIastinfärbung,Toluidin-Erythrosin, Säurefuchsiu-Anilinblau-Orange (Schmorl , G. , Die pathologisch-histo- logischen Untersuchungsmethoden 1905), Eisenalaun-Hämatoxylin, kom- biniert mit Säurefuchsin-Orange, Eosin, Thiaziu, van Giesons Pikro- fuchsin.- Schiefferdecker {Bonji). Alaglia, Gr., Über einige eigenartige Zellen in der Gau- mentonsille eines Hundes und über ihre wahr- scheinliche Bedeutung (Virchows Arch. Bd. CXCIV, 1908, H. 1, p. 46—51 m. 1 Tfl.). Verf. fand in der Gaumentonsille eines Hundes eigenartige Zellen, die iu breiten Bindegewebssepten lagen. Sie färbten sich mit To- luidin und Eosin intensiv blau. Bei Hämalaun-Eosin-Färbung trat eine geringe Kernfärbung ein. Bei Eisenhämatoxylin zeigten die in dem Protoplasma der Zellen befindlichen, zarten, bläschenartigen Ge- bilde eine feinkörnige Umhüllung. Mit Toluidin und Eosin sieht man in den Zellen dunkelblaue Scholleu. Schiefferdecker {Bonn). Dantschakoff , W. , Untersuchungen über die Entwick- lung des Blutes uud Bindegewebes bei den Vögeln. I. Die erste Entstehung der Blutzellen beim Hühnerembryo und der Dottersack als 136 Referate. XXVI, 1. b 1 u t b i 1 d 6 n d e s r g a n (Anat. Hefte, H. 1 1 3 [Bd. XXXVII, H. 3], 1908, p. 473—589 m. 4 Tflii.). Die Eier wurden in üblicher Weise in einer Glaswanne mit ausgehöhltem Wachsboden unter körperwarmer, physiologischer Koch- salzlösung (O'S^Iq) geöffnet. Nach Entfernung des Eiweißes über der Keimscheibe wurde dieselbe umschnitten und vom Dotter vor- sichtig abgelöst. Bis zum Stadium von 3 Tagen wurde der Keim stets mit dem ganzen ihn umgebenden Gefäßhofe zusammen fixiert. Wurden Flächenpräparate gewünscht, so ließ Verf. die Keimscheibe zu- erst sich auf der konvexen Fläche eines Uhrgläschens unter der Kochsalz- lösung ausbreiten, nahm sie dann aus der Kochsalzlösung mit dem Glase heraus und tröpfelte einige Tropfen der Fixierungsflüssigkeit darauf. Nach einigen Sekunden ist die Keimscheibe mit ihrem Gefäßhofe tadellos in ausgedehntem Zustande fixiert, und sie kann dann in einer mit der Fixierungsflüssigkeit gefüllten Schale durch vorsichtiges Schwenken von der Oberfläche des Uhrgläschens abgelöst werden. P'ür Schnittpräparate ist diese Methode des Fixierens nicht vorteil- haft, für sie ist es besser, die Keimscheibe in die Fixierungsflüssig- keit mittels eines kleines Hornspatels zu überführen. In den Stadien von 3 bis 6 Tagen wurde ein Teil der Embryonen ebenfalls im Zusammenhange mit dem Gefäßhofe fixiert, andere wurden heraus- geschnitten und der Gefäßhof wurde besonders fixiert. Bis zum siebenten Tage wurden die Embryonen zusammen mit Amnion und Allantois fixiert. Später, wenn die großö Allantois den Embryonal- körper schon mit ihren Schichten bedeckt, löste Verf. zuerst ihren Rand ab, ließ den Embryo mit dem Amnion heraustreten und zer- schnitt die Verbindung zwischen ihm und dem Dottersack zwischen zwei kleinen Klemmpinzetten , um den Austritt des Blutes von beiden Seiten her zu verhindern. Vom siebenten Tage an soll man, um eine gute Fixierung der inneren Organe zu erzielen, die vordere Rumpfwand der Länge nach aufschneiden und außerdem auch die Schädeldecke mit dem Oberkiefer abnehmen. In noch späteren Stadien muß man alle Organe einzeln fixieren. Der Dottersack wurde vom siebenten Tage an nach Zerteilung in einzelne Stücke ebenfalls in ausgedehntem Zustande mit Hilfe eines Uhrgläschens fixiert ; es ist dabei vorteilhaft , den Dotter durch physiologische Kochsalzlösung möglichst vollständig zu entfernen und die mit zottenähnlichen Auswüchsen versehene innere Oberfläche nach außen zu kehren , damit sie unversehrt bleibt. Waren Schnittpräparate erwünscht, so wurde der ganze Dottersack mit der Innenfläche nach XXVI, 1. Referate. 137 außen umgestülpt, der Dotter wurde abgespült, die Wand in einzelne Teile zerschnitten und in die Fixierungsflüssigkeit gebracht. Fixiert wurde mit ZENKEu-Formol (Helly^), ferner für besondere Zwecke mit absolutem Alkohol und gewöhnlicher ZENKERScher Flüssigkeit: Ersterer für Mastzellen , die letztere in späteren Stadien zur Fixierung des lockeren Bindegewebes. Das Formol wurde zu der Zenker sehen Stammflüssigkeit immer vor dem Gebrauche zugesetzt und das Gemisch wurde dann vor der Fixierung auf 38 Grad er- wärmt. Fixierungsdauer für ZENKER-Formol je nach der Dicke der Objekte 15 Minuten bis 4 Stunden. Bei diesen zarten embryo- logischen Objekten wurde das Auswaschen in Wasser besonders vor- sichtig vorgenommen: Die jungen Keimscbeiben wurden einfach von Gefäß zu Gefäß in destilliertes Wasser übertragen. Die größeren Embryonen wurden in fließendem Wasser ausgewaschen , nachdem sie vorher mit Mull umwickelt waren. Für die vorliegende Unter- suchung war die Wahl der Einbettungsmasse von ganz besonderer Wichtigkeit: Paratfin erwies sich auch bei der vorsichtigsten An- wendungsweise als ganz unbrauchbar 5 Celloidin war sehr gut ; die Einbettung wurde ausgeführt nach Rubaschkin "^ ; Verf. hat einige Modifikationen vorgenommen, über die vor kurzem berichtet worden ist^. Schnittdicke 5 bis 7'5 fx. Das Celloidin wurde stets durch Alkohol -Äther entfernt. Zur Färbung wurden benutzt: Eosin -Azur- Mischung nach NocHT (1 cc einer Lösung von Eosin w. g. 1 : 1000 wird mit 10 cc Wasser verdünnt und dann wird 1 cc einer Lösung von Azur II von 1 : 1000 hinzugesetzt, Färbung 2 bis 24 Stunden), die Lösung von Giemsa (2 Tropfen auf einen cc Wasser, Färbung etwa 2 bis 4 Stunden), die Lösung von Dominici: Eosin -Orange -Toluidinblau- Mischung (zuerst Färbung in einer Lösung von 0"3 g Orange G und 0*25 g Eosin, wasserlöslich, in 50 cc Wasser; Färbuugsdauer 24 Stunden. Auswaschen in 60grädigem Alkohol, Schnitte junger Embryonen 3 bis 5 Sekunden , älterer bis zu 3 bis 5 Minuten. Dann Färbung in einer Lösung von 0*25 g Toluidinblau in 50 cc Wasser während 0"5 bis 5 Minuten. Dann Differenzierung in 60grädigem Alkohol, längere Zeit für jüngere Embryonen, deren Zellen überhaupt weit stärker basophil sind , und kürzere Zeit für ältere Embryonen. Dann in gewöhnlicher Weise absoluter Alkohol, 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XX, 19U3, p. 413—415. 2) RuBASCHKiN, Anat. Anz. Bd. XXXI, 1907; vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 428—430. ^) Dantschakopp, Folia haematologica Jahrg. IV, 1907. 138 Referate. XXVI, 1 Xylol und neutraler, reinster Xylol-Balsam). Für die Flächenprä- parate der Keimsclieiben und des Dottersackes wurde ausschließlich die Färbung von Dominici gebraucht ; sie leistet hier ganz Aus- gezeichnetes , während die beiden anderen Niederschläge erzeugen. Während die gefärbten Celloidinschnittserien in allen Fällen sich als äußerst dauerhaft erwiesen , entfärbten sich die nach Dominici ge- färbten Flächenpräparate der Keimscheiben mit dem Gefäßhofe und Stücke der Dottersackwand im Balsam sehr rasch. Es geschieht dies namentlich in solchen Flächenpräparaten und an solchen Stücken derselben, wo sich große mit Blut gefüllte Gefäße der Dottersack- wand oder im Entoderm große mit Eosin gefärbte Dottermassen be- finden. Es ist deshalb ratsam, nach der Eosin-Orange-Färbung das Präparat sehr gründlich mit 60grädigem Alkohol auszuwaschen und erst dann mit Toluidinblau nachzufärben. Am besten ist es, die Stelleu mit vielem Dotter und mit großen Gefäßen aus der Dotter- sackwand ganz herauszuschneiden. Verf. hebt noch besonders her- vor, daß man für alle Präparate, die nach den angegebenen Methoden gefärbt worden sind, nur den reinsten, neutralen Kanadabalsam ge- löst in ganz reinem Xylol verwenden darf, da die Färbung sonst schon nach einigen Tagen verbleicht. Mastzellen wurden nach Alko- holfixierung mit alkoholischer Lösung von Kresylechtviolett oder mit Thioninlösung gefärbt. Die erstere wurde mit etwas Essigsäure an- gesäuert, die zweite mit Sodalösung alkalisch gemacht. Schiefferdecker (Bonn). SaigO, T. , Die PuRiciNJESchen Muskelfasern bei Er- krankung des Myokards (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XLIV, 1908, H. 2, p. 296—310, m. 1 Tfl.). Das Herz wurde nach der Krehl sehen Methode senkrecht zur Längsachse in Scheiben von einem bis 1*5 cm Dicke zerlegt, die erst in Formol, dann in steigendem Alkohol fixiert wurden. Von so gehärteten Herzen wurden Herzspitze, Papillarmuskeln beider Ventrikel, hintere Wand des linken Ventrikels , Septum ventriculorum , der Konusteil des rechten Ventrikels, Teile des rechten und linken Vor- hofes in Paraffin eingebettet. Die Schnitte wurden mit den ver- schiedenen Färbemethoden : Hämatoxylin - Eosin , Methode von van GiESON, Safranin (Iprozentige Lösung), mit Thiacinbraunvorbeizung (1 Prozent), Eisenhämatoxylin (Heidenhain) behandelt, außerdem wurden Frostschnitte mit Sudan auf Fett untersucht. Die HEiDENiiAiNSche XXVI, 1. Referate. 139 Methode wurde in folgender Weise angewendet : Die Schnitte wurden in der 2"5prozentigen Lösung von P^isenamraoniumoxyd eine bis 2 Stunden gebeizt und dann nach Abspülen mit Wasser in 0"5prozentiger wässeriger Häniatoxylinlösung 6 bis 20 Stunden gefärbt ; dann Ab- spülen mit Leitungswasser und DiÖerenzieren in der zur Beizung be- nutzten Lösung von schwefelsaurem Eisenammoniumoxyd , bis das Bindegewebe mit Ausnahme der Kerne vollständig entfärbt ist. Der Ausfall der Färbung ist ein sehr verschiedener, je nachdem die Schnitte länger oder kürzer mit Eisen und Ilämatoxylin behandelt werden. Bei kurzer Einwirkung (eine halbe bis eine Stunde) ist der Farbenton blau, die Kernstruktur sehr deutlich, bei längerer Beizung und Färbung werden die Kerne intensiv schwarz , ebenso die kon- traktilen Substanzen der Muskelfasern , und das Sarkoplasma bleibt farblos. Bei der Diflerenzierung kommt es sehr häufig vor, daß die Purkinje sehen Muskelfasern sich früher entfärben als das Myokard, was auf den geringeren Gehalt an kontraktilen Substanzen zurück- zuführen ist. Das zur Untersuchung kommende Material muß frisch sein. Schiefferdecker {Bonn). Kroh , F. , Studien über den Bau der Synovialmembran und die Resorption des Gelenkinhaltes unter dem Einflüsse variabler mechanischer Momente (Deutsche Zeitschr. f. Chirurgie Bd. XCIV, 1908, H. 3, 4, p. 215—240). Die fötalen Kniegelenke entstammten dem dritten bis achten Embryonalmonate. Technik : Fixierung in Formalin , Entkalkung in Salpetersäure , wenn erforderlich , Paraffineinbettung ; Sagittalschnitt bei Untersuchung des ganzen Gelenkes neben Oberflächenschnitt und Querschnitt bei Verarbeitung besonderer Gelenkteile , Färbung nach VAN GiESON. Bei den älteren Präparaten, die teils im Querschnitte, hauptsächlich aber im Oberflächenbilde untersucht wurden , kam es darauf an, zu entscheiden, ob die Gelenk-Innenschicht als Endothel oder überhaupt endothelähnliches Gebilde anzusprechen sei. Die beiden zur Entscheidung gangbaren Untersuchungswege gingen aus von dem Nachweise des Zellprotoplasmas in Form einer charakteri- stischen Färbung (benutzt wurden: Alauukarmin, Hämatoxylin nach Hansen, Eosin) und dem spezifischen Nachweise der Interzellular- substanz unter dem Einflüsse imprägnierender Mittel: Silbernitrat: Leichtes Ausschwenken der durch Schere oder Rasiermesser ab- getragenen Teile in physiologischer Kochsalzlösung, Auftragen einiger 140 Referate. XXVI, 1. Tropfen einer O'öprozentigen Lösung von Silbernitrat, deren Ver- wendung sich stets bewährte und keine Trugbilder (Verätzung) lieferte ; nach einer Sekunde Abspülen in Kochsalzlösung zur Verhütung einer Tiefenwirkung, Bestrahlung mit Sonnenlicht bis zu leichter Braun- färbung, Untersuchung in Glyzerin oder Kanadabalsam, nach Härtung in steigendem Alkohol und nachträglicher Kernfärbung. — Um das Saftkanalsystem nachzuweisen , injizierte Verf. zunächst eine einpro- zentige Lösung von Berlinerblau in die subsynoviale Schicht , doch wurden so nur tiefe, unter der Oberfläche gelegene , stets von Blut- kapillaren überkreuzte Lymphgefäße gefüllt und ungefähr mit diesen in gleicher Höhe verlaufende Saftspalten. Um die Frage betreffs des Übertrittes des Gelenkhöhleninhalts in die Lymphbahn zu studieren, eignet sich besonders eine Tuscheaufschwemmuug : Freilegung der Kniegelenkkapsel vom lateralen Bauche des Quadriceps aus , die Kapselöff"nung wurde sofort nach Injektion von 1 cc der sterilisierten Tuscheaufschwemmuug wieder unterbunden , die zur Verhütung for- cierter Bewegungen in tiefer Narkose gehaltenen Tiere wurden in Zeiträumen von 2 bis 4 bis 6 bis 10 Minuten nach Einverleibung des Farbstoffes abgetötet. Narkotisiert wurde stets mit Äther-Chloro- form , Tropfmethode. Die Synovialmembran zeigte sich dann , ab- gesehen von Gelenk- und Quadricepsknorpel, in ganzer Ausdehnung schwarz imprägniert. Schiefferdecker (Bonn). Di Christina , Gr. , Die sekretorischen Funktionen der Magendrüseu unter abnormen Bedingungen der Innervation und Kanalisation des Organs (Vir- CHOws Arch. Bd. CXCIV, 1908, H. 1, p. 32—46 m. 1 Tfl.). Verf. stellte zunächst Untersuchungen über die Absonderung unter normalen Bedingungen an: Gesunde Tiere, die 2 oder 3 Tage lang regelmäßig ihre Nahrung erhielten, ehe sie dem Experimente unter- zogen wurden. Nach dieser Zeit erhielten sie das Versuchsfutter, das aus Brot und Wasser oder aus Fleisch, Brot und Milch bestand. Die Tiere wurden entweder auf dem Höhepunkte dieses Verdauungs- prozesses (2 oder 3 Stunden lang nach der Fütterung) oder im Hungerzustande durch Verblutung getötet. Die Schleimhaut wurde sogleich in Altmann scher Flüssigkeit fixiert. Bei der Paraffineinbet- tung Erwärmung bis höchstens 45 Grad. Färbung mit der Methode von Galeotti. — Sodann wurde der Einfluß des Vagus auf den Vorgang der Erzeugung und Ausscheidung der Sekretionsgranula untersucht. Es wird wegen der hierbei angewendeten mehr physio- XXVI, 1. Referate. 141 lügischen Technik auf das Original verwiesen. Dasselbe gilt von dem dritten Teile der Arbeit. Schiefferdecker {Bonn). Nag^eotte, J., Technique rapide pour colorer les fibres ämyeline des nerfs, de la moelle et du cerveau [Formol simple ou sulfate, congelation, hema- teine alunee] (C. R. Soc. Biol. Paris t. LXV, 1908, no. 31, p. 408—410). Verf. beschreibt eine Methode zur Färbung der markhaltigen Nervenfasern, welche auf derselben Basis beruht, wie die von Weigert, aber erheblich kürzer und einfacher ist. Nerven, Rücken- mark und die weißen Teile des Gehirns können in lOprozentigem Formol fixiert werden ; durch diese Fixierung werden aber die feinsten Rindenfasern verändert. Um eine ganz vollkommene Fixierung zu erhalten, setzt Verf. daher noch schwefelsaures Natrium hinzu und empfiehlt die folgende Mischung: Wasser 900 Teile Formol 100 „ Schwefelsaures Natrium . 10 — 70 „ Diese Mischung fixiert die anderen Elemente ebensogut, wie die einfache Formollösung, sie hindert weder die Methode von NissL noch die von Bielschowsky. Die starken Lösungen haben den Vorteil, schwerer zu sein als das Gehirn, das daher schwimmt und sich nicht deformiert, sie haben aber den Nachteil, daß die Gewebe stärker schrumpfen und viel langsamer fixiert werden , als in der einfachen FormoUösuug. Verf. vermag nicht anzugeben, ein wie starker Zusatz von schwefelsaurem Natrium die besten Resultate ergibt, er kann nur sagen, daß der Zusatz dieses Salzes nützlich ist. Man fertigt dann Frostschnitte an, überträgt sie in Wasser und ent- fettet sie vor der Färbung mit Alkohol : es genügt, sie mit absolutem Alkohol zu benetzen , wenn sie auf dem Objektträger ausgebreitet sind : auf diese Weise verändern sie nicht ihre Form. Ein längerer Aufenthalt im Alkohol schadet der Färbung nicht, läßt aber die Schnitte schrumpfen , besonders die des Rückenmarkes. Die Ent- fettung geht um so leichter vor sich, je besser die Stücke fixiert sind. Färbung mit Hämalaun (P. Mayer). Man färbt am besten auf dem Objektträger , indem man einige Tropfen auf den Schnitt heraufgießt in einer feuchten Kammer im Ofen eiue halbe Stunde lang. Rückenmarkschnitte kann man auch über einem 142 Referate. XXVI, 1. Bunsenbrenner erwärmen, bis Dämpfe aufsteigen (etwa eine Minute). Die von den Schnitten wieder abgegossene Farblösung kann wieder verwandt werden. Nach Auswaschen in Wasser wird der Schnitt differenziert in der Borax-BlutlaugensaIz-L<)sung von Weigert, die man mehr oder weniger stark verdünnt, dann Abwaschen und Auf- heben in üblicher Weise. Man muß sorgfältig auswaschen und kann mit Vorteil eine Spur Ammoniak dem Wasser zusetzen. Die Differenzierung nach Pal gibt nicht so gute Resultate. — A n- wendung auf große Gehirnschnitte. Man kann das Ge- hirn durch bestimmte Mikrotome in Scheiben von 1 cm Dicke zer- legen, solche Scheiben frieren und schneiden sich leicht; die günstigste Temperatur liegt zwischen ein und zwei Grad. Man kann die ge- wonnenen Schnitte mit Hilfe eines Pinsels aufheben und in Wasser übertragen und mit Pinsel und Nadel in beliebiger Weise weiter be- handeln. Um sie zu färben läßt man sie, damit sie sich entfalten, auf Wasser schwimmen, fängt sie auf einem gut gereinigten Objekt- träger auf, benetzt sie mit absolutem Alkohol und läßt sie von neuem in Wasser schwimmen , fängt sie wieder mit einem Objekt- träger auf, läßt abtropfen, übergießt sie mit Farbstoff, nachdem man sie mit Hilfe eines heißen Drahtes mit einem dünuen Paraffin- rahmen umgeben hat, der die Farbflüssigkeit vor dem Abfließen schützt. Nach einem halbstündigen Aufenthalt in der feuchten Kammer im Ofen können die Schnitte differenziert werden. Man muß darauf achten , daß sie infolge der Durchträukung mit dem Farbstoffe hart und brüchig geworden sind. Durch die Differen- zierung werden sie aber wieder weich und können aus einem Ge- fäße in das andere übertragen werden. Schiefferdecker {Bonn). Collin, R. , Les variations de structure ä l'etat normal du noyau de la cellule nerve use somatochrome chez le Cobaye (C. R. de l'Assoc. des Anat. 10. reunion, Marseille, 1908; Bibliogr. Anat. Suppl. 1908, p. 21 — 29 av. 5 figg.). Fixierung in lOprozentigem Formol oder in Formol-Pikrinsäure- Essigsäure. Färbung mit Eisenhämatoxylin nach Heidenhain, mit der HELDSchen Methode (Er3^throsin , Nissl - Färbung) , Toluidiublau, Safraniu-Lichtgrün, Eosin-Lichtgrün, mit der Silbermethode von Cajal; die Doppelfärbung mit Eosin und Glychämalaun ergab sehr scharfe und besonders interessante Bilder. Schiefferdecker {Boim). XXIVI, 1. Referate. 143 Schütz, Die Silberimprägnation der Neurofibrillen nach BiELsciiowsKY (Neurol. Zentralbl. Jahrg. XXVII, 1908, No. 19, p. 909—911). Verf. hat bei seinen Untersuchungen mit der Fibrillenmethode von BiELscHOwsKY stcts negative Erfolge in Bezug auf die Fibrillen- färbung erhalten , trotzdem er sich genau an die von Bielscuowsky gegebenen Vorschriften gehalten hat. Er hat durch Versuche ge- funden , daß die Zeiten , die in den Vorschriften für die einzelnen Abschnitte des Verfahrens angegeben sind , zu kurz bemessen sind. Methode des Verf.: 1) Verf. imprägniert nur die Querschnitte, die sich mit Hilfe der Kohlensäuremikrotome in einer Dicke von 5 bis 10 /< sehr leicht anfertigen lassen. Die zu diesem Zwecke aus dem in lOprozentigem Formalin (Scherinci) gehärteten Gehirne herausgeschnittenen Blöcke können eine ziemliche Größe besitzen und werden vor dem Schneiden eine bis anderthalbe Stunde lang gewässert. Die Schnitte selbst werden nochmals 2 bis 3 Stunden lang in destilliertem Wasser ausgewaschen. 2) Die Schnitte kommen 24 Stunden lang in eine 2prozentige Lösung von Argentum nitricum (MERK-Darmstadt). 3) Bevor die Schnitte nun in die ammoniakalische Silberlösung kommen , wässert Verf. sie in destilliertem Wasser nochmals 24 Stunden aus. In der ammoniakalischen Silberlösung selbst verbleiben die Schnitte 30 bis 40 Minuten. 4) Nach raschem Durchziehen durch destilliertes Wasser kommen die Schnitte 24 Stunden lang in eine 20prozentige Formollösung, die mit Wasserleitungswasser herzustellen ist. Das im Handel befindliche Formalin von Schering hat in der angegebenen Verdünnung bis jetzt gute Resultate geliefert. 5) Zur Gewinnung von Dauerpräparaten kommen die Schnitte jetzt 10 Minuten lang in Eisessigwasser (Wasser 10 cc, Eisessig 2 Tropfen) und dann 30 bis 45 Minuten lang in eine Mischung von destilliertem Wasser 10 cc mit 3 Tropfen einer einprozentigen Goldchloridlösung (MERK-Darmstadt). Die Schnitte nehmen einen grau-schwärzlichen Farbenton an. Einen rötlich- violetten Farbenton, wie Bielschowsky es verlangt, hat Verf. nie erhalten. 6) Zur Entfernung des ungenügend reduzierten Silbers kommen die Schnitte 3 bis 5 Minuten lang in eine Öprozentige Lösung von Natriumthiosulfat, dem einige Tropfen einer konzentrierten Lösung von saurem schwefligsaurem Natrium zugesetzt sind (auf 10 cc der Lösung von Natriumthiolsulfat einen Tropfen der Lösung von saurem schwefligsaurem Natrium). 7) Auswaschen der Schnitte in destilliertem Wasser (24 Stunden) , Entwässerung in steigendem 144 Referate. XXVI, 1. Alkohol (12 Stunden), Aufhellung in Karbolxylol, Einbettung in Kanadabalsara. Es dürfen bei dem Verfahren nur Glasinstrumente gebraucht werden. Die Glasschalen müssen vollkommen sauber sein und die Glasstäbe müssen stets abgetrocknet werden, bevor sie mit einer zweiten Flüssigkeit in Berührung kommen. Ist das zu im- prägnierende Material alt und überhärtet , so genügen die hier vor- geschriebenen Zeiten auch nicht mehr , sondern müssen verlängert werden. Man muß den Farbeuton , den die Schnitte nach den ein- zelnen Abschnitten besitzen müssen , kennen , um die Zeitdauer da- nach einzurichten. Auch die Benutzung einer stärkeren als 2pro- zentigen Lösung von Argentum nitricum kann nötig werden , wenn die Schnitte nach einem bis 2 Tagen den bräunlichen Farbenton durch- aus noch nicht annehmen wollen. p]s empfiehlt sich dalier, für den Anfang, frisches Material zu imprägnieren, das etwa 14 Tage lang in lOprozentigem Formalin gehärtet worden ist. Die Methode wird dann keine großen Schwierigkeiten bereiten. Die so erhaltenen Präparate haben einen dunkelblauen, etwas in dunkelbraun hinüber- greifenden Farbentou. Wie lange sie haltbar sind , vermag Verf. noch nicht anzugeben. Sehiefferdecker (Bonn). Dueslberg, J., La Spermatogenese chez le rat [Mus decumanus Fall., va riete albinos] (Inaug-Diss. Leipzig, Wilhelm Engelmann, 1908, 102 p. m. 2 Tfln. ; Sep. aus Arch. f. Zellforschung Bd. I u. II). Die dem eben getöteten Tiere entnommenen Hoden werden vorsichtig von ihrer Albuginea befreit, was bei der Ratte leicht ge- lingt. Es geschah dieses unter einer geringen Menge der verdünnten Fixierungsflüssigkeit. Dann kommt das Organ in die Fixierungs- flüssigkeit entweder ganz , oder nachdem es mit der Schere in kleine Stücke zerlegt ist. Im ersten Falle entnahm Verf. dem Hoden , nachdem er eine Zeitlang gehärtet war , eine dünne oberflächliche Schicht, die dann allein weiter fixiert und später verwandt wurde. Zur Fixierung wurden benutzt Eisessig-Sublimat (5 Prozent und die FLEMMiNGSche und Hermann sehe Flüssigkeit (eine bis 6 Wochen) ; die letzteren ergaben die besten Präparate. Die Mitochondria wurde nach der Methode von Benda in der Modifikation von Meves und dem Verf. angewendet. (Diese Modifikation besteht hauptsächlich in der Anwendung einer frisch zubereiteten Lösung von Kristallviolett anstatt der von Grübler nach den ersten An- gaben von Benda gelieferten Lösung.) Die Mitochondria wurde XXVI, 1. Referate. 145 gleichfalls gut gefärbt in bestimmten Präparaten nach Flemminc; scher Lösung und nach Sublimat bei Färbung mit Eisenhämatoxylin. Schnitte durch den Nebenhoden mit den dort befindlichen Sperma- tozoon wurden mit der Goldchloridmethode von Ranvier (Zitronen- saft, einprozentige Goldchloridlösung, angesäuertes Wasser), be- handelt, bei der besonders der Spiralfaden gut hervortritt. Die er- wachsenen Spermatozoon wurden entweder lebend in physiologischer Kochsalzlösung untersucht, oder nach Antrocknung, oder nach Fixierung durch die Dämpfe einer 2prozentigen Osmiumsäurelösung: nach dieser Fixierung mitunter P^ärbung mit Alaunkarmiu (24 Stunden) oder Eisenhämatoxylin. Mazeration der Spermatozoon wurde ausge- führt nach Jensen und Ballowitz. Schieferdecker {Bonn). Ogushi , K. , Zur Herstellung von Demonstrationsprä- paraten des Amphibieneies (Anat. Anz. Bd. XXXIII, 1908, No. 15, p. 381—382). Verf. verfährt folgendermaßen : Er zieht einen dicken , hohen Ring stark erhitzten Kanadabalsams auf dem Objektträger, wie man es beim Einschließen der Knochen- oder Zahnschliffe zu tun pflegt. Dann bringt er das Stück des Laiches, das vorher mit Chromessig- säure oder auch mit Zenker scher Flüssigkeit oder auch mit Sublimat allein behandelt worden ist, nachdem es ausgewaschen worden und in einer O'öprozentigeu Formaliulösung konserviert worden ist, in dieser Lösung in den Innenraum des Balsamringes. Hierbei muß man genau aufpassen, daß die Größe der Gallertmasse dem Inhalte des Balsamringes gleichkommt , weil sonst verschiedene Übelstände eintreten können , wie z. B. große Luftbläschen , die sich auch bei der Verflüssigung der Gallerthüllo entwickeln. (Die Gallerthülle löst sich in der O'öprozontigen Formaliulösung im Laufe etwa eines halben Jahres von selbst auf.) Nun legt man ein schwach erhitztes Deckglas auf den Balsamring und drückt es nur leicht an. Nach- dem das Ganze abgekühlt ist, wird die erstarrte Oberfläche des Balsams lackiert, um das Deckglas sicher zu fixieren ; hierzu wird schwarzer Firnis verwandt. Die so hergestellton Präparate werden dann, vor Staub geschützt, ein halbes Jahr oder noch länger ruhig hingelegt, damit die Gallerte inzwischen die „Reifung" erlangt und von selbst vollkommen flüssig wird. Die eingeschlossenen Eier schwimmen dann in einer Flüssigkeit und lassen sich nach allen Richtungen rollen. Schrumpfung tritt nicht ein. Schiefferdecker {Bonn). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. 10 146 Referate. XXVI, 1. C. Mikroorganis^neiu Barber , M. A. , The rate of multiplication of Bacillus coli at different temp erat ii res (Joiirn. of infect. diseases vol. V, 1908, no. 4, p. 379). Der Apparat, den sich Verf. zur mikroskopischen Isolierung einzelner Bakterien konstruiert hat, besteht aus folgenden Teilen. Auf dem beweglichen Objekttisch wird eine gläserne feuchte Kammer plaziert, derart, daß sie durch den Mechanismus des Objekt- tisches hin- und hergeschoben werden kann. Über der feuchten Kammer liegt ein breites sterilisiertes Deck- glas ; imten in der Kammer steht etwas Wasser , die Seitenwände sind inwendig mit feuchtem Filtrierpapier bedeckt. Auf der Unter- seite des Deckglases hängen einige Tropfen steriler Nährbouillon (oder Gelatine oder Agar) und ein Tropfen der bakterienhaltigen Flüssigkeit. Von links kann eine sehr feine Pipette , deren Spitze in ein nach oben gebogenes Kapillarröhrchen ausgezogen ist, ein- geführt werden. Das andere Ende der Pipette ist mit einem Gummi- schlauch verbunden und ruht in einem Halter, der durch einen eigenen Schraubenmechanismus gehoben und gesenkt werden kann. Man bringt den Tropfen bakterienhaltiger Flüssigkeit mit Hilfe des beweglichen Objekttisches ins Gesichtsfeld des Mikroskops und hebt die Pipette so weit, daß die Spitze einen kleinen Teil der Flüssigkeit aufsaugt. Je nach dem Bakterienreichtum der letzteren werden einige oder auch nur ein einzelner Mikroorganismus in die Kapillare eindringen. Nötigenfalls führt man mit einem der am Deckgläschen hängenden Tropfen eine Verdünnung des Bakterienmaterials aus. Wegen der Einzelheiten der Konstruktion des Apparates ist auf die Originalabhandlung zu verweisen. Küster {Kiel). Nuttall, G. H. F., a. Graham -Smith, G. S., The develop- ment of Piroplasma cauis in culture (Parasitology vol. I, 1908, no. 3, p. 243—260). Piroplasma canis kultivierten die Verff. in einer Mischung von 0*5 cc defibriuiertem Blut und 0'5 cc einer 0'6- oder O'Sprozentigen Salzlösung; statt letzterer kam auch die gleiche Quantität folgender Lösung zur Verwendung: XXVI, 1. Referate. 147 Chlornatriuiii 0-95 Prozent Chlorkaliura 0-025 „ Chlorcalcium 0-02 „ Natriumkarbonat 0'15 „ Dextrose Q-l „ Destilliertes Wasser 100 cc. Küster (Kiel). Manicatide, Diagnostic bacteriologique de lameningite tuberculeuse (Compt. Rend, Soc. Biol. t. LXV , 1908, p. 523). Es wird folgende Methode zur Konstatierimg der Tuberkel- bazillen bei tuberkulöser Meningitis empfohlen. Mau füllt eine große Menge von stei'ileu Reagenzgläsern ä 20, 40, 80 cc mit Riicken- markflüssigkeit ; nach 10 bis 12 bis 24 Stunden erhält man in den Gläsern ein leichtes, manchmal spinnengewebeartiges Gerinnsel. Das frische Gerinnsel wird vorsichtig mit einer sterilen Platinnadel heraus- genommen , auf einen Objektträger ausgebreitet , in feine Fibrillen auseinandergelöst, dann fixiert man und färbt nach den gewöhnlichen Methoden. Die Bazillen sind manchmal leicht zu finden, manchmal liegen sie aber isoliert ; es ist daher zu raten , von vielen Reagenz- gläsern Präparate anzufertigen. G. Seliber {Paris). Brückner , J. , Sur la fermentatiou des sucres par le meningocoque et le micrococcus catarrhalis (Compt. Rend. Soc. Biol. t. LXIV, 1908, p. 765). Verf. gebraucht Ascites -Bouillon mit Neutralrot, um Meningo- coccus von Micrococcus catarrhalis zu unterscheiden; die Bouillon soll ein wenig alkalisch auf Lackmus reagieren. Neutralrot wird zu Ascites -Bouillon hinzugesetzt; diese behält eine leicht gelbliche Färbung. Die Rassen Meningococcus II und M. III geben dann in Bouillon mit ein Prozent Maltose am zweiten Tag eine kirschrote, leicht fluoreszierende Färbung, die dann in Rubinrot übergeht; mit Glukose erscheint am zweiten Tage eine kanariengelbe Färbung mit grüner Fluoreszenz, die in den folgenden Tagen stärker wird, andere Zuckerarten geben keine Färbung. Rasse Meningococcus I gibt dieselbe Reaktion mit Maltose, aber erst nach 5 Tagen, in Glukoseuährlösung erhält man eine kirschrote Färbung , die kaum fluoresziert ; in Lackmusnährlösuug wird weder Glukose nach Maltose von dieser Rasse angegriffen. Die beiden 10* 148 Referate. XXVI, 1. Catarrhalisrassou führen keine Veränderungen in Ascites- Bouillon mit Neutralrot herbei. Wenn sich diese Reaktion für eine größere Menge von Rassen bestätigen sollte, so kann sie zur Differenzierung von Meningococcus und Micrococcus catarrhalis dienen. G. Seliber {Paris). Escallon, J., et Sigre, A, , Recherche de 1' i n d o 1 d a n s 1 e s cultures microbiennes ä l'aide du furfurol (Compt. Rend. Soc. Biol. t. LXV, 1908, p. 507). Zu 10 cc Kultur fügt man ebensoviel von einer frischen alko- holischen Furfurollösung (1 auf 50} , dann Tropfen nach Tropfen reiner HCl hinzu ; enthält die Kultur Indol , so bekommt man eine orangegelbe Färbung; die Färbung erscheint sogleich nach dem Zu- fügen von HCl, aber es wird empfohlen, so lange mit dem Zufügen fortzufahren, bis die Färbung nicht mehr intensiver wird. Bei Er- wärmung geht die Reaktion schneller. Es wurden auf Indol Coli- bazillen, Choleravibrionen und Diphtheriebazillen untersucht. G. Seliber (Paris). Buard , G. , Recherche de l'indol dans les cultures microbiennes (Compt. Rend. Soc. Biol. t. LXV, 1908, p. 158). Zu 10 cc der Kultur in Peptonwasser (nach 15 bis 20 Stunden im Thermostaten) fügt man 5 bis 6 cc absoluten Alkohol, man mischt und gibt 1 cc alkoholischer Vanillinlösung (0'02 Prozent) zu und endlich 3 cc reiner Salzsäure. Mit Indol erhält man eine Rosafärbuug, die nach einigen Stunden in Magentarotfärbung oder Rotviolettfärbung übergeht; bei leichter Erwärmung geht die Reaktion schneller vor sich. Pepton-DEFRESNE gibt Rosafärbung mit Safrannuance. Diese von Deniges empfohlene Reaktion ist nach dem Verf. derjenigen von NoNNOTTE und Demanche ^ vorzuziehen. — Pepton Witte und Defresne geben die besten Resultate. G. Seliber (Paris). a Sigre, A., Au sujet du rouge neutre comme indice du Colibacille (Compt. Rend. Soc. Biol. t. LXVI, 1909, p. 153). Verf. prüft, ob Bouillon von Sauvage (vgl. Braun, Le rouge neutre et le diagnostic rapide de la souillure des eaux de boisson 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXV, 1908, p. 361. XXVI, 1. Referate. 149 par le coli bacille; Bull, de l'Inst. Pasteur 1906, p. oG3) mit Glukose, Laktose oder Dextrose n 1 Prozent zur Dürerenzierung' von Colibazillen zu gebrauchen ist. Es wird gefunden , daß B. pyo- cyaneus, Paratyphus (SchottmIjlleu und Saquei'i5e) u. a. rait Neutral- rot eine gelbe Fluoreszenz geben ; wenn diese nicht die charakteristische kanariengelbe Färbung des Colitypus ist, so verhalten sich viele Coli- bacillusstämme aus Wasser und Fäces ebenso. Neutralrot kann dalier nicht als spezifisches Reagenz für Colibazillus angesehen werden. Um als Colibazillus sicher erkannt zu werden, muß ein Bazillus auch die anderen üblichen Reaktionen zeigen. G. Seliber (Paris). Harrisoii, F. C, a. Van der Leck, J., Aesculin bile salt media f o r w a t e r a n a 1 y s i s (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 2, Bd. XXII, 1909, No. 18/23, p. 547). Harrison, F. C. , a. Yan der Leck, J. , Aesculin bile salt media for milk aualysis (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 2, Bd. XXII, 1909, No. 18/23, p. 551). Aesculin wird durch bestimmte Mikroorganismen hydrolytisch gespalten, derart, daß Zucker und Aesculatin entsteht. Das letztere gibt mit Eisen (zitronensaurem) eine dunkelbraune Verbindung. VertF. stellen sich ihre Nährböden folgendermaßen her : Pepton (Witte) 1—2 Prozent Taurocholsaures Natrium 0"5 „ Aesculin 0"1 „ Eisen, zitronensaures 005 „ Wasser 100 cc. Die Reaktion, welche z. B. unter dem Einfluß von B. coli und B. lactis aerogenes eintritt, wird durch folgende Gleichimg veranschaulicht : AescuUn Zucker Aesculatin. Die Kolonien der wirksamen Bakterienspezies bekommen auf den Aesculinnährböden einen schwärzlichen Hof. Verff. benutzen die Nährböden auch zur bakteriologischen Prü- fung von Milch. Küster (Kiel). Fontes , A. , Untersuchungen über die chemische Natur der den Tuberkelbazillen eigenen Fette und Wachsarten und über das Phänomen der Säure- resistenz. Differentialdiagnose der Tuberkel- und Pseudotuberkelbazillen. Tuberkelbazillen- 150 Referate. XXVI, 1. granulationen (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 1, Orig. Bd. XCIX, 1909, H. 3, p. 317). Verf. empfiehlt zur Unterscheidung der echten von den unechten Tuberkelbazillen folgendes Verfahren: 1) Färben der Präparate mit Zieiils Karbolfuchsin. 2) Waschen in Leitungswasser. 3) Etwa 2 Minuten in Karbolkristallviolett färben. 4) Behandlung mit Lugol, bis sich kein Metallspiegel mehr bildet ; Behandlung mit Acetonalkohol (Aceton und Alkohol in gleichen Teilen). 5) Waschen in Leitungswasser. 6) Färben mit Methylenblaulösung. Die Tuberkelbazillen erscheinen rot gefärbt und enthalten im Innern stark violett gefärbte , durch Zwischenräume getrennte Granulationen; die Pseudotuberkelbazillen erscheinen violett gefärbt und ohne roten Saum und weisen dichtere Granulationen auf. Küster {Kiel). Outzeit, E., Die Bakterien im Kreislauf des Stoffes in der Natur und im Haushalt des Menschen. [Aus Natur- u. Geisteswelt, 233. Bändch.] Leipzig (B. G. Teubner) 1909. Mit 13 Abbild, u. 138 pp. Das Büchlein, das als populäre Einleitung in die Bakteriologie und insbesondere die technisch-bakteriologischen Fragen sehr empfohlen werden kann , behandelt im zweiten Kapitel die Methoden der Bak- terienzüchtung. Küster {Kiel). D. Botanisches. Müller, G., Mikroskopisches und physiologisches Prak- tikum der Botanik für Lehrer. Zweiter Teil: Kryp- togamen. Mit 168 vom Verf. entworfenen Figuren. Leipzig u. Berlin (B. G. Teubner) 1908. 165 pp. geb. 4 M. Was über den ersten Teil des Werkchens seiner Zeit gesagt worden ist\ kann bei Erscheinen des neuen, zweiten, ebenfalls gut redigierten Teiles wiederholt werden. Es werden von den Pterido- 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXIV, 1907, p. 208. XXVI, 1. Referate. 151 pliyten bis zu den Bakterien alle Gruppen der Kryptogamen nach ihrer Anatomie , nach Zelleuform und Zelleninhalt besprochen und ihre Physiologie , insbesondere ihre Ernährungsphysiologie und die Methoden ihrer künstlichen Züchtung behandelt. Küste?' {Kiel). Nestler, A., Ein einfaches Verfahren zum Nachweise der Benzoesäure in der Preißelbeere und Moos- beere (Ber. d. d. bot. Ges. Bd. XXVII, 1909, H. 2, p. 63). Eine einzige Preißelbeere (Vaccinium vitis Idaea) genügt, um mit Hilfe des Nestler sehen Sublimieruugsverfahrens den Gehalt der Frucht an Benzoesäure nachzuweisen. Eine getrocknete Beere wird zerkleinert, die Stückchen werden auf dem Boden eines Uhrschälchen (etwa 7 cm Durchmesser, 1 mm dick) zu einem Häufchen vereinigt ; man bedeckt das Schälchen mit einer runden Glasplatte von etwa 10 cm Durchmesser und 1*5 mm Dicke und erhitzt mit einer ungefähr ^/^ cm langen Mikroflamme, deren Spitze etwa 12 cm vom Drahtnetz unter dem Uhrschälchen entfernt ist. Auf der Glasplatte trägt man außen zur Kühlung etwas Wasser auf: genau über dem in der Uhrschale befindlichen Objekt eine größere Menge , einige kleine Tropfen im Kreise herum. Nach 7 bis 10 Minuten erhält man aus der Preißel- beere einen starken Beschlag : „Zahlreiche Aggregate mit öfters sehr langen , flachen , prismatischen Bildungen , die am Ende zerschlitzt sind , ferner Einzelkristalle , die sowohl nach ihrer Form wie nach den sonstigen Eigenschaften (in Natronlauge gelöst und durch Salz- säure abgeschieden) als Benzoesäure charakterisiert sind." Die durch Sublimation erhaltenen dünnen Beschläge von Benzoesäure verdunsten bei Zimmertemperatur in wenigen Stunden vollständig. Auch die Moosbeere (Vaccinium Oxycoccus) enthält Benzoesäure, allerdings nicht so reichlich wie die Preißelbeere. In der Heidel- beere (V. Myrtillus) und der Rauschbeere (V. uliginosum) konnte keine Benzoesäure nachgewiesen werden. — Die vom Verf. vorgeschlagene Methode ist auch zum Nachweis geringer Mengen Benzoesäure in Essig-Marmeladen oder Fett oder in Benzoeharz und Tolubalsam geeignet; bei Verarbeitung des letz- teren schlägt sich außer Benzoesäure auch noch Zimtsäure nieder. Küster {Kiel). Zijlstra, K. , Die Gestalt der Markstrahlen im sekun- dären Holz (Recueil Travaux botau. Neerlandais vol. V, 1908). 152 Referate. XXVI, 1. Verf. sägt aus Querscheiben alter Baumstämme , um den Ver- lauf der Markstrahlen zu erforschen, in radialer Richtung rechteckig prismatische Stücke heraus, derart, daß die kleinen Endflächen der Rinde bzw. dem Mark zugewandt sind , die Anzahl der Jahresringe in dem Prisma wird bestimmt, dann wird es mit der Säge in kleine, zu den Endflächen parallele Scheibchen zerlegt. Die der Rinde zu- gewandte Flächen werden durch Abhobeln und Abreiben mit Sand- papier geglättet; die Markstrahlen treten alsdann deutlich auf dunklem Hintergrund hervor. Auf der dem Kambium zugekehrten Endfläche wählte Verf. mehrere Markstrahlen aus, bezeichnete jeden mit einem Buchstaben und ebenso in den folgenden soliden Flächen die entsprechenden Markstrahlspuren. Liegen zahlreiche Markstrahlen dicht beieinander, so bringt die regelmäßige Form und gleiche Größe der Scheibchen Aushilfe , da man die Koordinaten des Ober- und Unterendes des Markstrahles in mehreren Scheibchen bestimmen kann. Küster {Kiel). Stoklasa, J. , u. Ernest, Ad., Beiträge zur Lösung der Frage der chemischen Natur des Wurzel- sekretes (Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XXXVI, 1908, H. 1, p. 55). Die Nährlösung, in der die VertF. ihre Versuchspflanzen auf- zogen (Hordeum, Zea) enthielt auf einen Liter destillierten Wassers : Calciumnitrat 1 g Kaliumchlorid 0'25 „ Magnesiumsulfat 0'25 „ Dikaliumphosphat 075 „ Ferrophosphat O'IO „ Calciuuisilikat 025 „ Küster {Kiel). Benecke , W. , Die von der CRONEsche Nährsalzlösung (Zeitschr. f. Bot. Bd. I, 1909, No. 4, p. 2.35). Kritische Nachprüfung der von v. d. Crone-^ veröffentlichten Angaben über die verschiedenen bisher üblichen Nährsalzlösungen und die von ihm selbst zusammengesetzte neue Mischung ergaben folgendes. ^) Dissertation Bonn, 1904. XXVI, 1. Referate. 153 In allen Nälirlösiingcn, in welclicn die Versuchsobjekte des ge- nannten Autors zur Clilorose ueij^ten , besteht eine verminderte Lös- lichkeit des Eisens im Vergleich zu solchen Lösungen, in welchen gesunde Pflanzen erzogen wurden ; insonderheit bedingt Zufuhr lös- licher Pliosphate, auch des sauren Kaliumphosphates, zu Nährlösungen, welche Eisenphosphat als Eisensalz führen, eine verminderte Löslich- keit des Eisens. Die Annahme , daß Phosphate an sich eine von der Eisenzufuhr unabhängige Chlorose hervorrufen können, läßt sich nicht stützen. Ein Verzug der v. d. Crone sehen Nährlösung besteht darin, daß in der neutralen Flüssigkeit, die Ferro- und Tertiärcalcium- phosphat als einzige Fe- und P-quellen enthält, die Wurzeln vieler Pflanzen besser gedeihen als in angesäuerten Lösungen, vorausgesetzt, daß das der Pflanze zugängliche Eisen ihr genügt. Wegen der physiologischen Ergebnisse der Arbeit muß auf das Original verwiesen werden. Küster {Kiel). Yoilk, VaL, Laub färbe und Chloroplastenbildung bei immergrünen Holzgewächsen (Sitzber. d. K. Akad. Wiss. Wien, mathem.-naturwiss. Kl,, Bd. CXVII , Abt. 1, Dezember 1908, p. 1337). Zum Untersuchen von Chlorophyllkörnern bediente sich Verf. der von Zimmermann vorgeschlagenen Methoden. Als Fixiermittel bewährte sich Sublimat-Pikrinsäure — wässerige gesättigte Lösungen von Sublimat und Pikrinsäure zu gleichen Teilen gemischt — , in welcher die Objekte 12 bis 24 Stunden oder noch länger verbleiben; dann Auswaschen mit Wasser, Alkohol steigender Konzentration bis zu 75 Prozent. Die Handschnitte werden nach Zimmermanns Ver- fahren mit „Säurefuchsin B" gefärbt; Jodgrünfärbung erwies sich als weniger brauchbar. Vor der Eintragung in die wässerige Säure- fuchsinlösung wurden die Schnitte in Alkohol abnehmender Konzen- tration übertragen; in der Farblösung blieben sie 48 Stunden, oft noch länger; dann Auswaschen mit Wasser (2 bis 4 Minuten), Ent- wässern durch Phenol oder Alkohol steigender Konzentration, Nelkenöl, Kanadabalsam. Küster {Kiel). Buhlaud, W., Beiträge zur Kenntnis der Permeabilität der Plasmahaut (Jahrb. f. wiss. Bot., Bd. XLVI, 1908, H. 1, p. 1—54). Verf. prüfte die Permeabilität der Plasmahaut zahlreichen Farb- stoffen und nichtgefärbten Verbindungen gegenüber; uns interessieren 154 Referate. XXVI, 1. hier besonders die durch die Untersuchungen mit Farbstoffen ge- wonnenen Resultate, welche zur Beurteilung der intravitalen Färbung wichtige neue Beiträge bringen. Die von Overton aufgestellte These^, nach welcher ein weit- gehender Parallelismus zwischen der Schnelligkeit der Aufnahme organischer Farbstoife und der Leichtigkeit, mit welcher diese durch Lösungen von Cholesterin usw. gelöst werden , bestehen soll , läßt sich nach Ansicht des Verf. nicht aufrecht erhalten : basische Farbstoife werden unabhängig von dem Grad ihrer Lipoidlöslichkeit in die Zellen aufgenommen ; das in Lipoiden sehr schwer lösliche Malachitgrün und Thionin werden mit großer Schnelligkeit, das sehr leicht lösliche Rhodamin wird ungemein langsam aufgenommen ; mit großer Schnelligkeit wird Methylengrüu, das absolut lipoidunlöslich ist, aufgenommen. Die Säure-, speziell die Sulfosäurefarbstoffe werden im allge- meinen nicht aufgenommen ; eine Beziehung zur Lipoidlöslichkeit ist auch hier nicht vorhanden: „so konnten mehrere sehr leicht fett- lösliche Sulfosäureverbindungen (Wollviolett usw.) namhaft gemacht werden , welche absolut nicht eindringen , im Gegensatz zu andern, so gut wie unlöslichen oder völlig unlöslichen, welche regelmäßig oder doch in einzelnen Fällen aufgenommen werden. Interessant ist z. B., daß von Phthaleineu nur das Rhodamin, wenn auch sehr langsam aufgenommen wird, welches basische Eigenschaften hat, daß dagegen die übrigen Phthalei'ne , die zum Teil leicht fettlöslich sind, die aber nur sauren Charakter haben, nicht eindringen." Eine Erklärung für den Unterschied im Verhalten der basischen und der sauren Farbstoffe kann Verf. nicht geben. Den Eintritt von Neutralsalzen in Spirogyrazellen weist Verf. folgendermaßen nach : überträgt man die Algenfaden aus einer sehr verdünnten Toluylenrotlösung , bevor es zum Ausfallen des Tannats kommt, nach gründlichem Abspülen in die verdünnte Lösung einer der im folgenden genannten Neutralsalze , so findet infolge der aus- salzenden Wirkung in kürzester Frist das Ausfallen des Tannats statt, in 0'2- bis 0'5prozentigen Lösungen KNO3 oder NaNOg schon nach Bruchteilen einer Minute ; ähnlich wirken die entsprechenden Sulfate ; die Chloride wirken etwas langsamer, besonders CaCl2 ; auch Ca(N03)2 wird offenbar langsamer als die Alkalinitrate aufgenommen. „Noch schöner als mit Toluylenrot kann man diese Reaktionen mit einem ») Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 334. XXVI, 1. Referate. 155 so außerordeDtlich schwer eindringenden Farbstoff wie Rhodamin er- halten. Dagegen ist z. B. Methylenblau nicht geeignet, weil hier der Salpeter den in den Wandungen gespeicherten Farbstoff verdrängt und dadurch möglicherweise auch dem Zellinnern weiteres freies ^Methylenblau zuführen könnte, was dann ebenfalls zur Ausfällung führen würde." Küster {Kiel). Rubland, W., Die Bedeutung derKolloidalnatur wässe- riger Farbstofflösungen für ihr Eindringen in lebende Zellen (Ber. d. d. bot. Ges. Bd. XXVIa, 1908, H. 10, p. 772). Die Lösungen zahlreicher organischer künstlicher Farbstpfie sind durch ihr Verhalten bei Pergamentdialyse wie durch ihre Elek- trolytfällbarkeit als kolloidal erkannt worden: die Sulfosäurefarbstoffe werden als negativ geladene Kolloide durch ein-, zwei- und drei- wertige Rationen (H+, Na+, Ca++, Ni++, Cu+^-, Fe+++, A1 +++), einige positive basische Farbstofte mit 0H~ ausgeflockt^. Ein weiteres Hilfsmittel zur Erforschung der kolloidalen FarbstoÖ"lösungen gibt das Ultramikroskop an die Hand: manche Farbstoffe liefern homogene Lösungen, andere kolloidal-heterogene. Mit der Aufnahme der Farbstoffe in lebende Zellen hat der Grad derKoUoidität nach Verf. nichts zu tun. Unter den basischen Farbstoffen werden gerade manche kolloidale mit besonderer Geschwindigkeit aufgenommen, die mäßig- kolloidalen Toluylenrothydrochlorid , Dahlia und Nilblau, der stark- kolloidale Prune pure und die hochkolloidale Toluylenrotbase dringen rasch in die Zelle ein. Von den Sulfosäurefarbstoffen dringt z. B. die hochkolloidale Methylorangelösung in manche Zellen ein, während echt- gelöste Farbstoffe wie Wollviolett, Erioglaucin u. a. nicht eindringen. Küster {Kiel). Strigl, M., Der Thallus von Balanophora, anatomisch- physiologisch geschildert (Sitzungsber. d. K. Akad. Wiss. Wien, mathem.-naturw. KL, Bd. CXVH, 1908, Abt. 1, p. 1127). Die Handschnitte wurden durch Behandlung mit Äther vom Balanophorin befreit. Küster {Kiel). 1) Vgl. Teague, 0., u. BuxTON, B. H., Die Agglutination in physi- kalischer Hinsicht. IV. Die Ausflockung von Anilinfarben (Zeitschr. f. physik. Chemie Bd. LX, 1907, p. 469). 15G Referate. XXVI, 1. Nokazawa, K. , Zwei Saccliaromyceten aus Sakehefe (Zeiitrnlhl. f. Bakteriol. Abt. 2, Bd. XXII, 1909, No. 18/23, p. 529). Verf. kultivierte Hefen auf folgenden Lösungen: 1) Ungehopfte Bierwürze von 12 Prozent B. 2) Neutrales Hefenwasser nach Will^ mit 5 Prozent Saccharose. 3) Peptonlüsung, welche 0-5 g CaHPO^ 4-55 ,, KH2PO4 2-1 ,, MgSO, 20*0 „ Pepton Witte im Liter enthält. 4) Die gleiche Peptonlösung mit Zusatz von 5 Prozent Saccharose. 5) Nährlösung nach Kossowicz^ von folgender Zu- sammeusetzung : 5 Prozent Saccharose 0-4 „ KCl 0-4 „ (NHJ„HP0, 0-4 „ MgSO, 0-04 ,, CaHPO^. Küster {Kiel). Welimer, C, Nachweis des Hausse hwammes (Merulius) auf kulturellem Wege (Zentralbl. f. Bakteriol. Abt. 2, Bd. XXII, 1909, No. 18/23, p. 652). Aus dem Holz, das auf Merulius geprüft werden soll, läßt man im feuchten Raum Myzel hervorwuchern, von welchem Proben auf 2prozentigen Nähragar übertragen werden. Von einer einwandfreien reinen Kultur werden Überimpfungen auf lOprozentige Wurzelgelatiue oder -agar und gekochte Kartoffeln gemacht (Reagenzglaskulturen) und dann bei 20^ C der weiteren Entwicklung überlassen. Die auf pilzkrankem auftretenden Arten, die mit Merulius verwechselt werden könnten , unterscheiden sich von diesem durch ihr charakteristisches Verhalten auf den genannten Nährböden. „Merulius zeichnet sich durch eine vielfach größere Wachs- tumsschnelligkeit unter den gewählten Bedingungen aus, die Kulturen sind durchweg schneeweiß (voluminöser , watteartiger Myzel) nach ^) Will, H., Hefenwasser zur biologischen Analyse (Zeitschr. f. ges. Brauwesen Bd. XXIV, 1901, p. 289). -) Vgl. Zeitschr. f. d. landwirtscb. Versuchswes. in Österreich 1903. XXVI, 1. Referate. I57 einigen VVoclien zusammenfallend; Gelbfärbung fast nur bei Substrat- hyphen (Agar, Gelatine)." „Coniophora: Myzel stets gelblich (creme- bis hell lehm- farben), nie schneeweiß, nicht watteartig, sondern locker anliegend. Pigmentbildung! (gelbbraun bis hellbraun)." „Polyporus vaporarius: Kultur stets schneeweiß (wie Merulius), auch Substrathyphen auf Gelatine und Agar stets farblos ! Wachstum weit träger, auch nach langer Zeit (Wochen, Monate) wenig ergiebig, selten über die ganze Oberfläche sich ausdehnend. Etwas besser in Erlenmeyer -Kolben auf Fließpapier, mit Zucker- lösung getränkt, fortkommend, hier auch kleine Fruchtkörper ent- stehend , stets alles schneeweiß (Coniophora bildet hier feine bräun- liche Stränge)." Besonders charakteristisch ist das Verhalten der Pilze auf Kar- toffel: „Coniophora bedeckt die Stücke mit dichtem, hell creme- farbenen Überzug, Merulius umwächst sie rasch mit schneeigem, watteartigem Geflecht, Polyporus wächst ausnehmend kümmerlich in kleinen , weißen , sehr langsam sich ausdehnenden Rasen oder geht kaum an." „Gelatine wird von allen dreien nach einiger Zeit verflüssigt, am trägsten wieder von Polyporus, hier ohne jede Verfärbung ins Gelbliche , etwas schneller von den beiden anderen (Gelbfärbung !), aber selbst der besser wachsende Merulius erweicht dieselbe erst allmählich , ist also in den ersten ein bis 2 Wochen gewöhnlich noch ohne Wirkung; die verflüssigte Masse ist schließlich hell- bis dunkler gelbbraun. Anscheinend treten die Enzyme erst aus toten Zellen aus." Küster {Kiel). Overton, J. B. , On the Organization of the Nuclei in the p ollen mothercells of certaiu plants, with especial reference to the permanence of the chromosomes (Ann. of Bot. vol. XXIII, 1909, p. 19). Bei Untersuchung der Pollenmutterzellen von Thalictrum pur- purascens gaben Essigsäure-Alkohol und Essigsäure-Alkohol-Chloroform nach Carnoy die besten Resultate. Verf. erhielt von allen post- synaptischen Stadien gute Bilder. Flemmings Chrom-Osmium-Essig- säure war für Untersuchung der Prophasen geeignet, war aber wertlos für die Untersuchung postsynaptischer Stadien. Gute Resul- tate erhielt Verf. bei Fixierung der Antheren in Flemming scher (stärkerer) Flüssigkeit nach Vorbehandlung nach Carnoy. Flemmings 158 Referate. XXVI, 1. Flüssigkeit in ihrer stärkereu Modifikation lieferte bei Untersuchung von Calycauthus floridus und Richardia africana gute Resultate. — Bei Untersuchung von Thalictrum wurde auch einprozentige Lösung von Platinchlorid benutzt. Nach Beizung in 2prozentiger Lösung von Kaliumpermanganat wurden die Schnitte mit Flemmings Dreifarbeugemisch oder mit Heidenhains Eisenhämatoxylin gefärbt. Küster {Kiel). Beer, R., On Elaioplasts (Ann. of Bot. vol. XXIII, 1909, p. 63). Mikrochemisches Verhalten der vom Verf. in den Haaren von Gaillardia gefundenen Elaioplasten. Küster (Kiel). Brenchley, W. E., On the streng th and development of the grain of wheat [Triticum vulgare] (Ann. of Bot. vol. LXXXIX, 1909, p. 117). Gute Resultate erhielt Verf. , wenn er die Schnitte 5 Stunden oder länger mit sehr verdünnter Hämatoxylinlösung (nach Delafield) überfärbte, in Wasser wusch , mit sehr verdünnter Salzsäure über- spülte (5 Tropfen Salzsäure auf 100 cc TOprozentigen Alkohol) und dann bis zur Blaufärbung in Leitungswasser stellte ; hierauf Färbung mit Orange G , Entwässerung, Nelkenöl, Xylol , Kanadabalsam. — Auch Eisenhämatoxylin nach Heidenhain bewährte sich sehr gut. Küster {Kiel). Senn , G., Die Gestalt- und Lageveränderunng der Pflanzenchromatop hören. Mit einer Beilage: Die Lichtbrechung der lebenden Pflanzenzelle. Leipzig (W. Engelmann) 1908. Mit 83 Textfiguren und 9 Tfln. ; XV und 397 pp. 20 M. Die Peristromialfortsätze, mit welchen sich nach der Auffassung des Verf. die Chlorophyllkörner in den Zellen vorwärtsbewegen, sind an lebendem Material oft schwer zu sehen. „In frischem Zu- stande haben die Chloroplasten bekanntlich eine meist abgerundete, jedenfalls scharf umgrenzte Gestalt; in fixierten und gefärbten Prä- paraten dagegen, und zwar gerade in den besten, die absolut nicht ge- schrumpft sind, erscheinen sie sternförmig ausgezackt. Ihre Zipfel gehen in mehr oder weniger deutlich sichtbare Stränge über." Verf. schlägt vor, Stücke von Laubblättern in siedendem Alkohol oder in alkoholischer Sublimatlösung zu fixieren und mit Säure- XXVI, 1. Referate. 159 fuchsin zu färben : Verf. beliaudelte die Mikrotomschnitte mit einer Lösung des Farbstofts in Qßprozentigem Alkohol, dem behufs rascherer Wirkung etwas .Todalkohol zugesetzt war; die sehr stark überfärbten Schnitte lassen sich durch eine gesättigte Lösung von Jod in .SOpro- zentigem Alkohol sehr rasch so stark differenzieren, so daß nur noch die Chromatophoren und die Zellenkerne gefärbt bleiben. Die Pseudopodien der Chromatophoren treten alsdann aus dem um- gebenden Protoplasma sehr deutlich hervor. Mit dem Dreifarbengemisch erhielt Verf. nach Fixierung mit Flemmings Gemisch in den Blattstielen von Menyanthes trifoliata eine deutlich grauviolette Färbung der Chloroplasten und der von ihnen ausgehenden Plasmastränge ; das übrige Protoplasma blieb farblos oder färbte sich schwach grau. „Aber auch mit dieser Methode konnte ich keinen deutlichen Farbenunterschied zwischen dem Stroma und dem dieses umschließenden Peristromium erzielen. Die einzige konstatierbare Differenz zwischen diesen beiden Organen be- stand darin , daß die Färbung der zum Peristromium gehörenden Teile rascher (in etwa 2^2 Jahren) verblaßte als das Stroma." Jod färbt das Peristromium gelb, und zwar intensiver gelb als das umgebende Protoplasma und minder intensiv als das Stroma ; das Peristromium der mit Jod behandelten Zelle kann daher nur dann vom Stroma scharf unterschieden werden, wenn letzterer noch sein Chlorophyll enthielt. Der letzte Abschnitt des Buches enthält neben anderem Anwei- sungen zur optischen Untersuchung der Zellen. Küster {Kiel). Knoll, Fr., Über netzartige Protoplasmadifferen- zierungen und Chloroplastenbewegung (Sitzungs ber. d. K. Akad. Wiss. Wien, math.-naturw. Kl., Bd. CXVIl, 1908, Abt. 1, p. 1227). Die von Senn — vergleiche das vorangehende Referat — ge- schilderte Sternform fixierter Chloroplaste, aus welcher Senn auf das Vorhandensein von Pseudopodien schließt, hält Verf. für Artefakte, die namentlich der Behandlung mit ungeeigneten Fixierungsmitteln (kochender Alkohol) ihre Entstehung verdanken. Verf. empfiehlt die von LiDFORss^ vorgeschlagene Methode — Einwirkung von Osmium- dämpfen und nachfolgende Behandlung mit Alkohol steigender Kon- ^) Über kinoplasmatische Verbindungsfäden zwischen Zellkern und Chromatophoren (Lunds Univ. Arsshrifter, N. F., Bd. IV, No. 1). 160 Referate. XXVI, 1. zentration: die Cblorophiötcu schrumpfen ctwji um ein Viertel, oluie ihre ursprüngliche Form zu verlieren; Sternform tritt niemals auf; das Peristromium ist gut erkennbar. Küster {Kiel). Nemec, B., Zur Mikrochemie der Chromosomen (Ber. d. d. bot. Ges. Bd. XXVII, 1909, H. 1, p. 21). Die Cbromosome der vom Verf. untersuchten Pflanzen sind in heißem Wasser leicht löslich. Taucht man lebendige Wurzelspitzen von Vicia faba oder Allium Cepa in Wasser von 96 bis 99® C und läßt sie in diesem 5 Sekunden, so zeigt sich bei nachfolgender Untersuchung in Wasser (bzw. nach Fixierung in Alkohol oder Flemming scher Lösung), daß die Chromosome stark gequollen oder aufgelöst sind, meist sind allerdings nur ihre peripheren Teile gelöst oder stark vakuolisiert ; die zentralen sind zwar noch erhalten, färben sich aber mit den sog. Kernfarbstoffen sehr schwach. Ruhende Kerne werden nicht angegriffen, Spireme verhalten sich wie schon differenzierte Chromosome. Läßt man das heiße Wasser 10 bis 30 Sekunden einwirken, so löst sich der ganze Inhalt der Chromosome restlos : „An Wurzel- spitzen, die gleich nach Behandlung mit heißem Wasser in Wasser oder Glyzerin untersucht werden, findet man ihre hyalinen, struktur- losen, deutlichen Abdrücke, ähnlich denen, welche Oes^ nach auto- lytischer Lösung der Chromosome gefunden hat. An fixierten Prä- paraten sind allerdings in diesen Abdrücken noch spärliche Körnchen oder Lamellen zu finden, die vielleicht erst bei der Fixierung entstehen." Nach 3 bis 5 Minuten währender Heißwasserbehaudlung er- scheinen an nicht fixierten Objekten an Stelle der Chromosome vakuolenförmige Höhlungen in dem kernig - vakuoligen oder fast homogen koagulierten Cytoplasma. An fixierten Objekten erscheinen im Innern der Chromosomennegative spärliche kernige oder lamellen- artige Strukturen ; daneben findet man völlig homogene , leere Ne- gative. Ruhende Kerne der meristematischen Zellen sind höchstens an der Peripherie vakuolig, die Kerne der Dauergewebe sind un- verändert und färben sich kräftig. Alkoholmaterial (Wurzeln) verhält sich ähnlich wie frisches Material ; die Chromosomen bleiben löshch ; jedoch muß man sie um so länger der Einwirkung des heißen Alkohols aussetzen , je länger sich das Material in Alkohol befand. Die Chromosome des Alkohol- 1) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXV, 1908, p. 127. XXVI, 1. Referate. 161 materialö quellen bei der Heißwasserbeliamllung iiiclit so stark auf wie die des frischen Materials. Bei Allium Cepa (Wurzelspitzen) wurden nach einstündiger Behandlung mit 96prozentigem Alkohol und 30 bis 60 Sekunden währender Einwirkung von heißem Wasser (96 bis 99*^ C) die Chromosome ganz ausgehöhlt, Avährend die ruhenden Kerne gar nicht angegrift'en wurden. Bei den Nukleinkörpern der Zellenkerne von Cucurbita Pepo zeigte sich, daß sie in heißem Wasser unverändert bleiben, während die Chromosome ausgehöhlt und gelöst werden. Verf. kommt zu dem Schluß, daß die Chromosome substantiell von dem Kernreticulum (wo keine Chromatinkörper vorhanden sindj ebenso wie von den Chromatinkörperchen verschieden sind. „Wenn sich der Kern zur Mitose vorbereitet, so beginnen in seinem Fadeiv- werk Substanzen aufzutreten, welche in heißem Wasser löslich sind. Offenbar erfährt die Substanz des Kernreticulums eine chemische Veränderung, welche schließlich zu seiner Verwandlung in ein in heißem Wasser lösliches Chromatin führt." „Zuweilen wird das sog. achromatische Kerngerüst (Liuin- Karyoplastin) mit dem Cytoplastiu d. h. mit der als Plastin be- zeichneten im Magensaft nicht verdaubaren Grundsubstanz des Cyto- plasmas identifiziert. Man kann sich leicht überzeugen , daß das unrichtig ist. Mit Alkohol- , noch besser aber mit Pikrineisessig- schwefelsäure fixierte und mit Alkohol entfärbte Objekte sind zu diesem Nachweis am besten geeignet. An Objektträger aufgeklebte Schnitte kommen auf 24 Stunden in eine einprozentige wässerige Lösung von KOH. Das Cytoplasma erscheint dann gleich wie die Nukleolen ungelöst , ebenso die Fasern der Teilungsspindel , der sonstige Kerninhalt verschwindet aber vollständig. Auch die Chromo- somen lösen sich ganz oder bis auf einen kleinen Rest auf." Küster {Kiel). Gomont , M. , Conseils aux voyageurs pour la pre- paration des algues (Journ. de Bot. t. XX, 1906, p. 18). Einige Winke , betreffend die Präparation kleiner und großer Algen. Bei der Konservierung von Algen, die zu mikroskopischen Untersuchungen dienen sollen, vermeide man Formol; 90prozentiger Alkoliol ist zu empfehlen, Cyanophyceen werden durch ihn allerdings sehr geschädigt. Pikrinsäure gibt bei Konservierung grüner Süßwasseralgen Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 1. 11 162 Referate. XXVI, 1. gute Resultate ; man verwende sie in konzentrierten Lösungen. Dem Alkohol setzt man vorteilliafterweise etwas Glyzerin zu. Küster {Halle a. S.). E. 3Iineralog isch - Petrographisches, Physikalisches, Wright, F. E., Measurement of Extinction Angles in the Thin S ection (Americ. Journ. of Science vol. XXVI, 1908, p. 349—390). Der Verf. gibt zunächst eine ausführliche Theorie für das Problem: Wann zeigt eine Kristallplatte im Polarisationsmikroskop Dunkelheit und wie ändert sich die Lichtintensität bei kleinen Ab- weichungen von dieser Lage der vollkommenen Auslöschung? Neu ist besonders hinsichtlich des zweiten Teils dieses Problems die Dar- stellung der Intensität des aus dem Analysator austretenden Lichtes mittels eines Diagramms, welches diese Intensität als Funktion des Winkels der Polarisatoreu angibt (für Abweichungen bis zu 1*^ von der gekreuzten Stellung) sowie auch als Funktion von der Ein- stellung des Objekttisches am Mikroskop; letztere Abhängigkeit wird für Abweichungen bis zu 2*^ von der Auslöschungslage des Prä- parates graphisch dargestellt. Aus den Kurven geht hervor, daß für alle Punkte zwischen 89° 4' und 90® 56' die Platte vollkommen dunkel unter dem Mikroskop erscheinen muß , daß aber für größere Abweichungen eine Auf- hellung des Gesichtsfeldes nachweisbar sein muß. Zur Feststellung dieser Aufhellung werden in dem nunmehr folgenden mehr praktischen Teil neue Hilfsmittel beschrieben und auch eigene Prüfungen der früheren Konstruktionen (sensitive Farben- platte, Brav Ais' Stöberplatte, Wrights Kombinationskeil, Calde- RONS Kalzitplatte, Traube s Glimmerplatte, Sommerfeldts Gips- Zwillingsplatte, Quarzzwilliugsplatte , Binikolokular, BERTRAND-Platte, Nakamuras Halbschattenplatte, Kobells und Brezinas- Kalzitplatten) mitgeteilt. Die neuen Hilfspräparate des Verfassers teilen das Gesichtsfeld des für paralleles Licht eingestellten Mikroskops in vier Quadranten durch eine im Präparat befindliche Teilungslinie (Zwillingsgrenze einer natürlichen oder durch Kitten erzeugten künstlichen Zwillingsplatte), XXVI, l. Referate. 163 während die andere auf der ersten senkrechten Teilungslinie dureli Interferenz , ähnlich wie ein Streifen in einem Rabinetkonipensator zustande kommt. Z. B. entsteht ein solches Ililfspräparat, wenn man eine Gipszwillingsplatte keilförmig schleift (Keilschneide senk- recht zur Zwillingsgrenze) und aufkittet auf eine Kristallplatte, welche an einer Stelle den mittels des Keiles allein erzeugbaren Gangunter- schied gerade kompensiert, so daß dort bei genau gekreuzten Nikols ein schwarzer Streifen quer zur Zwillingsgrenze verläuft, welcher in die Mitte des Gesichtsfeldes gebracht wird. Daher vereinigt dieses Präparat das Prinzip der Halbschatten- vorrichtungen mit demjenigen des SoLEiL-Kompensators und kann zu einer äußerst genauen Justierung des petrographischen Mikroskops benutzt werden, denn sowohl die Gleichheit der Helligkeit zu beiden Seiten der Zwillingsgrenze als auch die Form des KompensationS' Streifens ändert sich schon bei geringen Fehlern des Instruments, (Vgl. auch d. folgende Referat.) E. Sommerfeldi {Tübingen). Wright, F. E., The Bi-Quartz Wedge Plate applied to Polarimeters and Sacharimeters (Amer. Journ. of Science vol. XXVI, 1908, w. 4 ügg.). Als Ersatz für die Kristallpräparate, welche bei polarimetrischen Beobachtungen zur Vergrößerung der Genauigkeit angebracht werden, empfiehlt der Verf. eine mit einem Quarz-Doppelkeil verkittete Platte. Beide Keile sind senkrecht zur optischen Achse geschnitten und von vollkommen gleichen Dimensionen, jedoch der eine aus Rechtsquarz, der andere aus Linksquarz ; sie werden aneinander auf eine Kristall- platte von solcher Dicke gekittet, daß die (in diesem Fall zirkuläre) Doppelbrechung (vgl. das vor. Ref.) für einen Streifen des einen Keils und für den in die Verlängerung desselben fallenden Streifen des zweiten Keils kompensiert wird. Vor und nach Einschaltung des auf sein Drehungsvermögen zu prüfenden Präparats müssen zu beiden Seiten der „künstlichen Zwillingsgrenze" des Doppelkeils die Helligkeiten gleich groß sein, sowie auch die Kompensationsstreifen genau senkrecht auf dieser Grenze stehen und koinzidieren. Es werden die Vorteile, die dieses Präparat vor dem Lippich scheu Halbschattennikol besitzt, genauer angegeben. E. Sommerfeldt (Tübingen). IV 164 ' Neue Literatur, XXVI, 1. Neue Literatur, 1. Lehr- und Handbücher. Böhm, D. H., Treatise on Histology witli Additions liy Dr. Huber. M. Fig. 2. Edition. Philadelphia 1907. 18 M. Braun, M., u. Luhe, M., Leitfaden zur Untersuchung der tierischen Para- siten der Menschen und der Haustiere für Studierende, Ärzte und Tierärzte. Würzburg (C. Kabitzsch) 1909. 186 pp. 100 Figuren im Text. 6 M. Dahlgren, U., a. Kepner, W. A., A Textbook of the Principles of aniraal Histology. M. Fig. London (Macmillan). 16 M. Daunerth, F., Methods of textile Chemistry. New York (John Willy a. Sons) and London (Chapman a. Hall) 1908. VIII u. 164 pp. Hahn, H., Handbuch für physikalische Schülerübungen. Mit 340 Textfigg. Berlin (Jul. Springer) 1909. 20 M.; geb. 22 M. V. Kahlden s Technik der histologischen Untersuchung pathologisch-anato- mischer Präparate von Edg. Gierke. 8. umgearb. Aufl. Mit Technik der Untersuchung des Nervensystems von Spielmeyer. Jena (Fischer) 1909. XI, 220 pp. 80. 4 M. Koränyi, A. v. , u. Richter, P. F., Physikalische Chemie und Medizin. Ein Handbuch unter Mitwirkung von Dr. J. Bence, Prof. Dr. Boruttau, Prof. Dr. F. Bottazzi, Dr. F. Frankenhäuser, Dr. R. Höber, Prof. Dr. A. v. Koränyi, Prof. Dr. A. Loev^^y, Prof. Dr. L. Michaelis, Dr. Oker-Blom, Prof. Dr. P. F. Richter, Dr. M. Roloff, Prof. Dr. C. Spiro und Prof. Dr. H. Strauss herausgegeben. Bd. I. Mit 27 Abb. 575 pp. Leipzig (G. Thieme) 1907. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXVI, 1909, p. 125.) 16 M.; geb. 19 M. Macfadyen, A., The Cell as the Unit of Life and other Lectures delivered at the Royal Institution, 1899—1902. London. 398 pp. 8°. 7-80 M. Pardi, F., Compendio di istologia (dottrina della cellula e dei tessuti). 2 Tfln. u. 74 Figg. Pisa (Guidi-Buffarini) 1909. XII, 174 pp. 8o. XXVI, 1. Neue Literatur. 165 Pizon, A., Anatomie ot Physiologie humaines. Suivies de l'etude des principaux groupes zoologiques. o. edition, auguiontee. 535 figg. Paris. 650 pp. 8». 6-80 M. Schmitl, B. , Biologisches Praktikum für höhere Schulen. Mit 75 Abbild, im Text u. 9 THn. Leipzig u. Berlin (B. G. Teubner) 1909. 71 pp. 2 M.-, geb. 2-50 M. Sehueider, K. C, Histologisches Praktikum der Tiere für Studierende und Forscher. 434 Figg. Jena (G. Fischer). IX, 615 pp. 8». 15 M. Schurig, W., Biologische Experimente nebst einem Anhang: Mikroskopische Technik. Ein Hilt'sbuch für den biologischen Unterricht, insbesondere für die Hand des Lehrers, Studierenden und Naturfreundes. Leipzig (Quelle u. Meyer) 1909. 180 pp. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXVI, 1909, p. 126.) 2-40 M.; geb. 2-80 M. Steinhaus, J., Grundzüge der allgemeinen pathologischen Histologie. Mit über 150 ^likrophotogrammen auf 25 Tfln. Leipzig (Akadem. Verlags- gesellschaft) 1909. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XXVI, 1909, p. 124.)' 10 M.. Tourueux, P. , Precis d'Embryologie humaine. 2. edition, augmentee. 248 tigg. Paris. 600 pp. 7 50 M. 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. a. Neue Mikroskope. Stead, J. E., A Workshop microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1909, pt. 1, p. 20). Reichert's Demonstration microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1909, pt. 1, p. 95; vgl. Reichert s Katalog No. 36, 1908, p. 46). Watson's „Standard" Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1909, pt. 1, p. 95; vgl. Watson a. Sons's Catalogue 1909, p. 54—55). Watson's „Club" Portable Microscope (Journ. R. Microsc. Soc. 1909, pt. 1, p. 97; vgl. Watson a. Sons's Catalogue 1909, p. Gij). b. Beleuchtungsapparate. Stead, J. E., A simple raethod of illuminating opaque objects (Journ. R. Microsc. Soc. 1909, pt. 1, p. 22). XßO Neue Literatur. XXVI, 1. c. Mikrometer. (J. D.,) Microscopic measurenients (Journ. R. Microsc. Soc. 1909, pt. 1, p. 100; vgl. Engl. Mechanic vol. LXXXVIII, 1908, p. 356). d. Objekttisch. Walker, G. , A new Device for Maintaining a uniform Temperature of a warm Stage for microscopic Work. 1 fig. (Anat. Record vol. II, no. 9.) e. Verschietlenes. Boeke , H. E. , Vorriclitung für mikroskopische Beobachtungen bei tiefen Temperaturen (Zeitschr, f. Instrumentenkde. Bd. XXIX, 1909, H. 3, p. 72). (Bühler, H.,) Ein einfacher Quadratnetzzeicliner (Zeitschr. f. Instrumentenkde. Bd. XXIX, 1909, H. 1, p. 20; vgl. Zeitschr. f. Yermess. Bd. XXXMI, 1908, p. 587). Reichel, C. , Das Mikroskop als Hilfsmittel in der Werkstatt (Deutsche Mechan.-Zeitg. 1909, H. 1, p. 1). Rohr, M. V., Beiträge zur Geschichte des optischen Glases (Zeitschr. f. Instrumentenkde. Bd. XXIX, 1909, p. 50). Bifocal and ruultifocal lenses (Journ. R. Microsc. Soc. 1909, pt. 1, p. 98; vgl. Engl. Mechanic vol. LXXXVIII, 1908, p. 367— 3G8). 3. Mikrophotographie und Projektion. Fuhrmann, F., Leitfaden der Mikrophotographie in der Mj'kologie. Mit 3 Ttin. u. 33 Abb. im Text. Jena (G. Fischer) 1909. 88 pp. 3 M. 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Dies ist auch wohl die Hauptursache dessen, daß die Wissenschaft von der Histogenese der Gewebe und Organe beim Säugetierembryo im Gegensatz zu ihrer Morphogenese noch sehr schwach entwickelt erscheint. Seit mehreren Jahren beschäftige ich mich mit histogenetischeu Studien an Wirbeltierembryonen, hauptsächlich bei Säugetieren. In meinem Laboratorium ist dabei eine Reihe von einfachen und leicht zu handhabenden üntersuchuugsmethoden ausgearbeitet worden, die wir jetzt mit bestem Erfolge anwenden. Sie genügen, wie ich glaube, in hohem Maße den nötigen Anforderungen. Man erhält eine sehr vollkommene Fixierung, sogar von Geweben, die sonst sehr schwierig Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XXVI, 2. 12 178 Maximow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. XXVI, 2. zu behandeln sind und leicht Artefakte geben und sehr elektive Färbungen, die die verschiedenen Gewebselemente sehr schihi und deutlich hervortreten lassen. Außerdem gestatten sie lückenlose Schnittserien zu erlangen. Es wird vielleicht nicht unnütz sein , wenn ich hier über diese Methoden berichte. Diese Verötfentlichung könnte vielleicht für Forscher, die histogenetische Untersuchungen an embryonalem Material unternehmen wollen, bei der Wahl der zweckmäßigsten Unter- suchungsmethodik von Nutzen sein. Die Methoden zerfallen in drei Teile: 1) Fixierung; 2) Ein betten, Schneiden und Aufkleben der Schnitte ; 3) Färbung. 1. Fixierung. Als Fixierungsmittel gebrauche ich seit einigen Jahren mit großem Erfolg das sogen. Zenker -Formol, welches bekanntlich seinerzeit von Helly (2) empfohlen worden ist. Es ist ZENKERSche Flüssigkeit, zu welcher statt 5 cc Essigsäure auf 100 cc der Stammlösung 5 cc Formalin hinzugesetzt werden. Diese Mischung ist meiner Meinung nach der ursprünglichen ZENKERSchen Flüssigkeit in jeder Beziehung überlegen; sie dringt vielleicht nicht so tief ein , dafür sind aber die Fixierungsresultate viel vollkommener ; besonders klar tritt der Unterschied an sehr leicht veränderlichen Gewebselementen hervor, z. B. an den roten Blutkörperchen, vor allem den embryonalen. Nach Fixierung mit gewöhnlicher, säurehaltiger Zenker scher Flüssigkeit ist die normale äußere Form des Zelleibes der Erythrocyten meistens stark ver- ändert ; das hämoglobinhaltige Protoplasma erscheint stark gequollen, blasig und statt des intravitalen, vollkommen homogenen Aussehens enthält es grobe körnige oder netzige Gerinnsel. Die körnigen Ein- schlüsse verschiedener Zellen, die Granula der Leukocyten, besonders die leicht löslichen, z.B. die Mastzellengranula, die Sekretgranula der Drüsenzellen werden durch die gewöhnliche Zenker sehe Flüssig- keit oft auch gelöst oder alteriert, während sie durch das Zenker- Formol meistens tadellos fixiert erscheinen. Auch sonst steht das mikroskopische Aussehen verschiedener anderer Gewebselemente, z. B. der Epithelzellen, Neuroblasten usw. nach Fixierung mit ZENKER-Formol dem Aussehen derselben Elemente in frischem, lebendem Zustand, eventuell bei intravitaler Färbung XXVI, 2. Maximow: Cytologische ii. histogenetische Untersuchungen. 179 mit Neutralrot u. dgl., unvergleichlich viel näher, als nach Fixierung mit säurehaltiger Zenker scher P'lüssigkeit. In der letzten Zeit habe ich aber das Zenker -Formol in der Beziehung modifiziert, daß ich statt 5 Prozent Formol 10 Prozent nehme. Die Flüssigkeit dringt dabei noch rascher ein und die Fixierungsresultate sind noch vollkommener. Als Stammlösung halte ich mir die gewöhnliche ZENKERSche Mischung ohne Essigsäure nnd ohne Formalin vorrätig. Sie be- steht aus: 1000 cc Aqua destillata, 50 g Sublimat (puriss.), 25 „ Kalium bichromicum pnrissimum, 10 „ Natrium sulfuricum purissimum. Vor dem Gebrauch werden auf je 100 cc der auf 37*^ C er- wärmten Stammlösung 10 cc Formalin hinzugesetzt und die vollständig frischen , lebenswarmen Objekte in diese ex tempore hergestellte Mischung gebracht, Amphibienlarven , überhaupt Gewebe poikilo- thermer Tiere, werden bei Zimmertemperatur fixiert. Jedes Objekt muß dabei natürlicli je nach seinen Eigenschaften in entsprechend angepaßter, zweckmäßiger Form fixiert werden, um einerseits die vollkommene Fixierung der einzelnen Zellen zu ermög- lichen , anderseits die topographisclien Verhältnisse der Gewebsteile in möglichst unverändertem Znstande zu bewahren. Dünne Keim- scheiben, überhaupt dünne Membranen, die man als Flächenpräparate herstellen will und nicht zu schneiden beabsichtigt, werden zweck- mäßigerweise in physiologischer Kochsalzlösung, wo sie heransprä- pariert werden , auf der konvexen Oberfläche eines Uhrglases aus- gebreitet und dann zunächst während ein paar Sekunden mittels Aufträufeins von Fixierungsflüssigkeit in ihrer ausgespannten, falten- losen Lage zum Erstarren gebracht ; dann werden sie in der Fixierungsflüssigkeit durch leises Schwenken des Glases von dem- selben befreit. Zur Fixierung kleiner zarter Embryonen eignen sich sehr gut die STEiNACHSchen Siebdosen, wohin der unter Kochsalz- lösung herauspräparierte Embryo auf einem Hornspatel oder in einem Hornlöffel gebracht wird. Embryonen von 1'5 cm und größere müssen , um eine ganz vollkommene Fixierung aller innerer Organe zu erhalten , aufgeschnitten werden. Man macht bei ihnen in der Bauchwand eine größere oder kleinere Öffnung oder man schneidet sogar noch den oberen Teil des Kopfes und von der einen Seite 12* 180 Maximow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. XXVI, 2. den lateralen Teil des Halses und Rumpfes und die Extremitäten mittels einer feinen, spitzen Schere ab. Alles das variiert natürlich je nach dem speziellen Zwecke, den die Untersuchung verfolgt. Zum Studium verschiedener weicher, locker gebauter und viele freie Zellen enthaltender Gewebe, z. B. der verschiedenen blutbilden- den Organe , sind außer Schnittpräparaten noch Deckglaspräparate unerläßlich. Doch sind gewöhnliche Trockenpräparate für histo- genetische Zwecke meist ganz unbrauchbar. Entweder muß das Gewebe vor dem Trocknen noch mit Osmiumdämpfen fixiert werden, wie es Weidenreich tut, oder es werden noch besser vom Gewebe an Deckgläsern feuchte Abstrich- oder Abklatschpräparate gemacht; die Gewebsschicht wird sofort, noch bevor sie anfängt auszutrocknen, in einer Fixierungsflüssigkeit fixiert ; die Zellen bleiben dann am Glase fest kleben. Diese Methode ist von .Jolly (4) und von mir (6, 7) bereits im Jahre 1902 angegeben worden. Neuerdings wird sie auch von Marchand (5) wieder gelobt. Gerade zu diesen Deckglaspräparaten eignet sich das Zenker- Formol ganz vorzüglich. Man bringt das Deckglas mit der dünnen Gewebsschicht möglichst rasch in die Fixierungsflüssigkeit; das beste ist, wenn man das Deckgläschen mit der Gewebsschicht nach unten auf der Fixierungsflüssigkeit schwimmen läßt. In solchen Präparaten erscheinen die Zellen immer in ganz auffallend vollkommener Weise fixiert. Die Fixierungsdauer beträgt verschiedene Zeit, je nach der Größe und Dicke des Objektes. Bei sehr jungen Säugetierkeim- scheiben, bei Stückchen verschiedener Membranen, z. B. der Dotter- sackwand u. dgl., auch bei den feuchten Deckglaspräparaten genügen in der Regel 10 bis 15 Minuten. Kleine Embryonen bis zu .3 mm Länge bleiben eine Stunde , größere entsprechend länger in der Flüssigkeit. Auch für die größten Objekte darf aber der Zeitraum von 6 Stunden nicht überschritten werden , da sonst Niederschläge entstehen könnten ; 5 Stunden genügen hier im allgemeinen voll- ständig. Wenn das Objekt bei einer Temperatur von 37^ fixiert wird, so bleibt es bei dieser Temperatur nur während einer halben Stunde. Nach Ablauf dieser Frist wird das Gefäß vom Thermostat heruntergenommen ' und während der übrigen Fixierungszeit bleibt es also bei gewöhnlicher Zimmertemperatur stehen. Nach der Fixierung werden die Objekte in Wasser ausgewaschen. Die größeren Embryonen oder Gewebsstücke werden in Mull ein- gewickelt und unter der Leitung 24 bis 48 Stunden lang gewässert. XXVI, 2. Maxiraow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. 181 Zarte, kleine Objekte müssen natürlich anders ausgewaschen werden. Hier bcAvähren sich gerade die Steixach scheu Siebdoseu sehr gut. Aus der Fixierungsflüssigkeit kommen die Dosen mit den Objekten in eine Reihe von großen Gefäßen mit destilliertem Wasser. Ich verwende meistens fünf Gefäße und in einem jeden verbleiben die Objekte ungefähr 5 Stunden. Die Deckglaspräparate werden in der Weise gewaschen , daß man sie auf destilliertem Wasser in großen Schalen schwimmen läßt. Nach dem Auswaschen werden die Objekte, die kleineren auch weiter in Siebdosen, mit jodhaltigem Alkohol von steigender Kon- zentration behandelt, dann entwässert und nach der gewöhnlichen Methode in Celloi'din eingebettet. In der letzten Zeit wende ich eine neue Modifikation des Zexkek- Formols an, die in speziellen Fällen , wie es scheint, noch Besseres wird leisten können, als die gewöhnliche Mischung. Ich setze nämlich, zu der oben angegebenen Zenker -Formollösung 2prozentige wässerige Osmiumsäurelösung hinzu. Die Flüssigkeit wird natürlich auch ex tempore bereitet, indem man auf 100 cc der warmen Stammlösung 10 cc käuflichen Formols und 10 cc einer 2prozentigen Osmium- säurelösung hinzusetzt. Man fixiert ebenso wie mit der gewöhnlichen Lösung, nur bei Lichtabschluß. Die Flüssigkeit hält sich lange Zeit, mehrere Tage, augenscheinlich unverändert. Sie dringt unvergleich- lich viel besser ein, als die anderen gewöhnlichen Osmiummischungen und gibt eine wirklich tadellose Fixierung bei tiefer und äußerst dauerhafter Schwärzimg selbst der kleinsten Spuren von Fett , die sich der lösenden Wirkung der ätherischen Öle und des Xylols zäh widersetzt. Die Länge der Fixierungsdauer mit der Zenker -Formol- Osmiummischung kann man für bestimmte Zwecke auch vergrößern ; mau kann die Objekte 24 Stunden und sogar länger in der Flüssig- keit liegen lassen. Nach den Beobachtungen meines Kollegen , des Herrn Dr. W. Rubaschkin, gelingt es auf diese Weise unter gewissen umständen bei Säugetierembryonen mittels der Eisenhämatoxylin- färbuug die Chondriosomen in schönster Weise zur Darstellung zu bringen. Die Nachbehandlung der Präparate nach der beschriebenen Fixierung ist dieselbe , also Wasser , dann steigender jodhaltiger Alkohol und Einbettung in Paraffin oder Celloidin. 182 Maximow: Cytologisclie u. histogenetische Untersuchungen. XXVI, 2. 2. Einbetten, Sehneiden und Aufkleben der Serienschnitte. Die Wahl der pjinbettungsmethode ist gerade für histogenetische Untersuclmngen am Embryo außerordentlich wichtig. Die Paraffin- und die Celloidineinbettung geben nämlich ganz verschiedene Resul- tate. Auf Grund meiner Erfahrungen muß ich es als eine bestimmt formulierte Behauptung aufstellen , daß die Paraffineinbettung für histogenetische und cytologische Untersuchungen am Embryo , be- sonders am Säugetierembryo, ganz unpassend ist und nur die Celloidin- einbettung brauchbare Resultate liefert, und zwar sicherlich nach den meisten Fixierungen. Dieser Schluß ist rein empirischer Natur — um ihn theoretisch zu begründen , müßte man natürlich genaue Messungen der Zellen und der anderen Gewebsbestandteile vor und nach Paraffin oder Celloidin vornehmen, die beiden Einbettungen in allen ihren Stadien und an jedem einzelnen Objekt in verschiedenen Modifikationen in systematischer Weise parallel durchprobieren usw., um die wirklichen Ursachen der eintretenden Alterationen aufzuklären. Das alles habe ich nicht gemacht , ich glaube aber doch , daß die obige Entscheidung auch ohnehin zweifellos das Richtige triift. Wenn man nach derselben Fixierung, überhaupt nach genau identischer Vorbehandlung die gleichen Objekte das eine Mal nach Paraffin- , das andere Mal nach Celloidineinbettung , bei ebenfalls gleicher Färbung unter starker Vergrößerung betrachtet, so bemerkt man sofort einen scharfen Unterschied zwischen den Paraffin- und Celloidinpräparaten. In den ersteren erscheinen die Zellen sämtlich mehr oder weniger geschrumpft, die Interzellularräume sind breiter, die Zellsubstanz selbst hat meistens auch eine andere , gröber ge- körnte oder gröber uetzige Struktur ; die weiter unten beschriebenen Färbungen gelingen hier lange nicht so gut, sie erscheinen mehr difl'us und es ist infolgedessen sehr oft nicht möglicli , verschiedene Zellarten voneinander mit genügender Sicherheit zu unterscheiden, z. ß. Lymphocyten von primitiven Blutzellen und von noch hämo- globiuarmen Erythroblasten (8). Besonders leidet gerade das Hämo- globin und seine Färbung. Alle diese Nachteile der Paraffinpräparate wird man allerdings meist nur dann gewahr, wenn mau sie mit Celloidinpräparaten vergleicht. Hier sehen nämlich alle Gewebs- elemente sowohl ihrer äußeren Form als auch ihrer inneren Struktur nach genau so aus, wie unmittelbar nach der Fixierung und Wässe- rung — die Celloidineinbettung selbst ruft also in dem einmal XXVI, 2. Maximow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. 183 lixierten Gewebe keine Veränderungen nielir liervor. Es versteht sich von selbst, daß dies Aussehen dem intravitalen jedenfalls auch mehr entspricht, als das Aussehen der Paraltinpräparate , die sicli nach der Fixierung noch weiter verändert haben. Ich muß speziell noch hervorheben, daß ich mich bei dem Vergleich der beiden Ein- bettungen nicht nur auf eine einzige bestimmte Methode der ParafHn- durchtränkung beschränkte , sondern als Übergangsmedien sowolil Xylol, Benzol und Chloroform als aucli verschiedene ätherische Öle und auch den von M. Heidenhain vorgeschlagenen Schwefelkohlen- stoff durchprobierte. Das Resultat war immer dasselbe. * Die mit dem osmiumhaltigen Zenker -Formol fixierten Präparate scheinen die Paraffineinbettung im allgemeinen besser zu vertragen als die mit gewöhnlichem ZENKER-Formol behandelten. Ein Unter- schied in ungünstigem Sinne im Vergleich mit Celioidinpräparaten ist aber auch hier ohne weiteres klar. Der Anwendung der Celloidineinbettung bei embryologischen Untersuchungen stand bis jetzt immer die Unmöglichkeit im Wege, gute dünne Schnittserien rasch und sicher herzustellen. Es gab ge- wiß schon seit langem mehrere Verfahren zum Aufkleben von Celloidin- schnitten, sie waren aber alle nur für große dicke Schnitte , wie es etwa Schnitte vom Zentralnervensystem zu sein pflegen, brauchbar und bei allen blieb auch das Celloidin ungelöst , was die meisten Färbungen unmöglich machte. Dasselbe ist auch von der erst vor kurzem von Suzuki (12) vorgeschlagenen, sicherlich sehr umständ- lichen und zeitraubenden Methode zur Herstellung von Celloidinserien zu sagen, die darin besteht, daß man am Celloidinrande eines jeden einzelnen Schnittes eine kleine Ziffer mittels Tusche anbringt. Die Schnitte bleiben frei, müssen einzeln behandelt werden und das Celloidin bleibt auch ungelöst. Vor 2 Jahren ist nun von Rubaschkin (10) eine Methode zum Aufkleben von Celloidiuschnitten veröffentlicht wurden, die meiner Meinung nach das Problem zum größten Teile gelöst hat und die jetzt in meinem Laboratorium stets mit dem besten Erfolg gebraucht wird. Sie ist sehr einfach zu handhaben — ist dabei, vielleicht nur abgesehen von Osmiumpräparaten , ebenso sicher , wie die besten Methoden des Aufklebens von Paraffinschnitten und dürfte bei einiger Übung auch kaum mehr Zeit in Anspruch nehmen, als diese letzteren. Sie erlaubt es, lückenlose Serien von dünnen und beliebig kleinen oder beliebig großen Schnitten herzustellen und da das Celloidin nachträglich gelöst wird, können auch alle möglichen Färbungen 184 Maximow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. XXVI, 2. angewandt werden. Die Methode ist nachträglich von Dantscha- KOFF (1) etwas modifiziert und vervollkommnet worden. Leider sclieint mir die RuBAscHKiNSche Methode, soweit ich sehen kann, in anderen Laboratorien noch sehr wenig oder gar nicht in Gebrauch zu sein. Ich will es mir daher an dieser Stelle ge- statten, sie wieder ausführlicher zu beschreiben, in der Modifikation, wie sie jetzt, zum größten Teil nach Dantschakoffs Angaben, von mir stets mit bestem Erfolg gebraucht wird. Die in Celloidin eingebetteten Objekte werden feucht in 65pro- zentigem Alkohol geschnitten. Wenn die Einbettung, namentlich das Entwässern und das schließliche langsame Austrocknen, sorgfältig durchgeführt worden sind , so geUngt es ohne jede Mühe , Schnitte von 5 /^ zu bekommen. Säugetierembryonen schnitt ich meistens 7 jx dick. Anderseits gelingt es bei kleinen Objekten auch bis auf 3 w herunterzugehen, obwohl dies nur selten wirklich notwendig oder sogar nützlich sein kann. Zum Gelingen des Schneidens ist selbst- verständlich ein vollkommenes Mikrotom mit tadellos geschliifenem Messer unerläßliche Vorbedingung. Ich gebrauche stets nur Jung sehe Mikrotome, meistens Modell II. Links am Mikrotom auf dem Arbeitstisch ist auf einer Höhe von etwa 20 cm eine schwarze Holz- oder Hartgummiplatte an- gebracht, auf der mehrere Objektträger Platz finden. Auf der Messer- klinge wird jeder Schnitt sofort aufgerollt und geglättet, was ein paar Sekunden erfordert und von hier wird er mit Hilfe von Nadel und Spatel auf den bereitstehenden Objektträger gebracht. Der Objektträger wird vorher mit einer dünnen Schicht Eiweiß- glyzerin beschickt (Eiweiß durch ein dichtes Leintuch gepreßt 2 Teile, Glyzerin pur. 1 Teil). Dies erreicht man am besten einfach auf solche Weise, daß ein kleiner, mittels eines Glasstabes aufgetragener Tropfen mit der Fingerbeere ausgebreitet und fast ganz abgestrichen wird, bis eine kaum sichtbare, gleichmäßig dünne Schicht übrig bleibt. Die Schnitte kommen also direkt vom Messer auf die Eiweiß- schicht. Sie werden hierher der eine nach dem anderen in der gewünschten Reihenfolge und Ordnung gelegt, bis die ganze Deck- glasfläche , die bei mir bei kleinen Embryonen und großen Deck- gläsern (24x40 mm) manchmal 80 und sogar mehr Schnitte faßt, ausgefüllt ist. Wenn die ersten Schnitte inzwischen , besonders bei einer großen Schnittzahl, einzutrocknen anfangen, muß man sie vor- sichtig mit der Spitze eines in 65prozentigen Alkohol getauchten Pinsels betupfen ; zuviel Alkohol kann die Schnitte wegschwemmen. XXVI, 2. Maximow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. 185 Wenn die gewünsclite Anzahl Schnitte auf dem Objektträger erreicht ist, unterbricht man das Schneiden und schützt den Block vor dem Eintrocknen durch Auflegen eines mit 65prozentigera Alkohol reichlich durchtränkten Wattebäuschchens. Man nimmt den Objekt- träger von der Platte herunter, ordnet eventuell noch die Schnitte endgültig mit der Nadel und preßt sie dann mit mehrfach zusammen- gefaltetem, bestem schwedischem Fließpapier fest an den Objektträger an. Dadurch werden die Schnitte, wenn das Schneiden glatt vor sich ging, tadellos und ohne Falten ausgebreitet und fast der ganze Alkohol wird entfernt. Man darf die Schnitte aber keineswegs aus- trocknen lassen — den Beginn des Austrocknens bemerkt man an dem Weißwerden derselben. Nach dem Anpressen werden sie sofoi't mit reinem englischem Nelkenöl Übergossen — statt der von Rubaschkin empfohlenen Anilin- Nelkenölmischung, die meistens unschöne Runzeln oder Falten ver-- ursacht — und der Objektträger wird wieder auf die Platte gelegt, zur Seite geschoben und das Schneiden beginnt von neuem. Nach 5 bis 10 Minuten erscheinen die mit Nelkenöl bedeckten Schnitte ganz aufgehellt. Bis dies geschieht, werden meist zwei oder drei neue Objektträger mit Schnitten beschickt und mit Nelkenöl Übergossen, und wenn dann das erste Glas zur weiteren Verarbeitung kommt, wird der Platz für ein neues Glas frei. Die Arbeit wickelt sich mit vollkommener periodischer Regelmäßigkeit ab , ohne daß eine einzige Minute unnütz verloren gehen würde. Das Nelkenöl wird von den aufgehellten Schnitten abgegossen, die Ränder des Glases mit einem Stück Fließpapier oder mit einem Tuche abgewischt und der Objektträger kommt dann in eine HELLENDAHLSche Küvcttc mit absolutem oder 96prozeutigem, jeden- falls aber nicht schwächerem Alkohol. Das nochmalige Anpressen der Schnitte mit Fließpapier nach dem Nelkenöl , wie es Dantscha- KOFF empfohlen hat, habe ich wieder gelassen, da dabei mitunter infolge der Weichheit des gequollenen Celloidius Gewebsstücke ab- gerissen werden. Nach 5 bis 10 ^Minuten kommt das Glas mit den Schnitten in eine zweite, dann in eine dritte Küvette mit absolutem Alkohol. Das Celloidin erscheint jetzt meistens schon vollständig gelöst, da es aber manchmal an den Schnitten doch noch in Form von gequollenen Klümpchen haften bleibt, ist es stets zu empfehlen, die Objektträger aus der dritten Alkoholküvette noch in einen kleinen Glaszylinder mit absolutem Alkohol und mit geglühtem Kupfersulfat am Boden 186 Maximow: Cytologische u. histogenetischc Untersuchungen. XXVI, 2. für ein paar Minuten zu legen und dann in einen Zylinder mit einer Miscliung- von Alkohol absolutus und Äther zu gleichen Teilen zu übertragen. Hier Avird das Celloidin in ein paar weiteren Minuten stets vollständig gelöst und aus dem Alkoholiither kommen die Gläser, wenn es sich um Präparate handelt, die mit Sublimatgemisclien fixiert wurden, in eine IlELLENDAHLSche Küvette mit 75prozentigem, schwach jodhaltigem, hellgelbem Alkohol für 10 bis 20 Minuten. Um das Jod seinerseits zu entfernen , werden sie dann in eine Kü- vette mit reinem 75prozentigem Alkohol gebracht und hier können die Objektträger bis zur Färbung beliebig lange aufbewahrt werden. Vor der Färbung werden sie natürlich meistens für mehrere Stunden in Wasser übertragen, wenn es sich nicht um Färbung mit alkoholi- schen Lösungen handelt. Während aller dieser Manipulationen bleiben die Schnitte stets tadellos am Glase haften; nur nacli Fixierung mit ZENKEu-FormoI- Osmium kann es, wie erwähnt, mitunter vorkommen, daß die Ränder einzelner Schnitte etwas abgehoben werden. Bei genügender Vor- sicht bietet aber auch dies keine Gefahr, und vollständigen Verlust, aber auch dann nur von einzelnen Schnitten , hatte ich sehr selten zu beklagen. ^»^ 3. Färbung. Die mit ZENKER-Formol oder Zenker- Formol -Osmium fixierten und in der oben beschriebenen Weise in Serienschuitte zerlegten Präparate können nach beliebiger Methode gefärbt werden. Unter anderem gibt auch die Eisenhämatoxylinfärbung mitunter sehr schöne Resultate. Die Zentrosomen treten dabei überall scharf hervor, im Epithel der Urnierenkanälchen sieht man sehr deutlich die Zentral- geißeln usw. Daß diese Färbung bei Zenker -Formol -Osmium -Fixie- rung nach RuBASCHKiN mitunter auch die Chondriosomen zur Dar- stellung bringen kann, habe ich bereits oben notiert. Meine Untersuchungen bezogen sich bis jetzt zum größten Teil auf die Erforschung der embryonalen Histogenese des Blutes und des Bindegewebes (7, 8). Für mich galt es also in erster Linie, solche Färbungsmethoden ausfindig zu machen, die die verschiedenen Blutzellen elektiv färben und vor allem das Hämoglobin, auch in den kleinsten Spuren, deutlich hervortreten lassen würden. Von allen durchprobierten Methoden erwiesen sich zwei Fär- bimgen als den genannten Forderungen in hohem Grade genügend. XXVI, 2. Maximow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. 187 Die erste ist die Eosin -Azurfärbung, wie sie in verscliiedenen Modi- fikationen in der Hiimatoloyie und Pathologie zur Darstellung der Bhitzellen und speziell auch der Malariaparasiten, besonders an Deck- glaspräparaten gebraucht wird. Die zweite ist die Eosin-Orange- Toluidinblaufärbung von Dominici. Für die erste Methode, die ich in der von Helly (3) für Schnitte voi'geschlagenen NocHTSchen (9) Modifikation gebrauche, halte ich mir zwei Stammlösungen vorrätig, die indessen nicht zu alt sein dürfen — eine wässerige Lösung von Eosin w. G. (Grübler) 1 : 1000 und eine wässerige Lösung von Azur II (Grübler) 1 : 1000. Zur Färbung werden 10 cc Eosin mit 100 cc Wasser verdünnt; 10 cc Azur werden dann hinzugegossen, das Ganze wird mit einem Glasstab gut umgerührt und in diese Lösung kommen sofort die Objektträger mit den Schnitten. Die Färbungsdauer beträgt 12 bis 24 Stunden. Die zur Erlangung einer genügend intensiven Färbung nötige Zeit wechselt aber je nach dem Objekt. Mitunter erhält man auch schon nach 6 Stunden eine sehr gute Färbung. Wenn man eine besonders intensive Färbung wünscht, so kann man statt 100 cc Wasser bloß 80 cc nehmen. Endlich kann man mit fast identischem Resultat auch die bei Grübler käufliche Giemsa- Lösung verwenden. Die Farblösung be- reitet mau dann ex tempore durch Hinzusetzen von zwei Tropfen der käuflichen Stammlösung auf je 1 cc Wasser. Die aus der Farblösung herausgenommenen Präparate werden mit 9(5prozentigem Alkohol differenziert, bis keine blauen Farbstotf- wolken mehr abgehen , was nach einer bis 2 Minuten in der Regel erreicht ist, kommen dann für eine halbe Minute in absoluten Alkohol, dann in drei Portionen reinsten Xylols. Schließlich werden sie in neutralem , in Xylol gelöstem Kanadabalsam eingeschlossen. Die gleiche Behandlung erfahren auch die Deckglaspräparate , nur muß hier die Dauer der einzelnen Prozeduren abgekürzt werden. Die beschriebene Färbung gibt sehr polychrome Präparate, die zum Studium der histogenetischen Wechselbeziehungen der verschie- denen Zellarten, und zwar nicht nur im Blut und Bindegewebe, sondern auch in den anderen Geweben sehr geeignet erscheinen. Das Protoplasma ist bläulich in verschiedenen Abstufungen, das Basi- chromatin dunkelblau, das Oxychromatin rosa, die Kukleolen schmutzig- rütlichviolett ; das Hämoglobin erscheint in reinem Zustande leuchtend rosenrot gefärbt, die azidophilen und pseudoeosinophilen Granula, die Sekretgranula im Pankreas und anderen Drüsen sind grellrot. Die 188 Maximow: Cytologische u. histogenetische Untersuchungen. XXVI, 2. Achseuzylinder der jungen Nervenfasern haben ebenfalls eine selir schöne rosenrote Färbung. Manchmal , besonders in den großen Lymphocytcn, färben sich endlich auch die Zentrosomen deutlich rot. Bekanntlich hat Schridde (11), der die Eosin-Azurfärbung (mit der GiEMSASchen Lösung) ebenfalls gebraucht, vorgeschlagen, die Präparate nicht mit Alkohol zu differenzieren , sondern direkt aus der Farblösung nach flüchtiger Abspülung mit Wasser in reines Aceton und von dort in Xylol zu bringen. Nur bei Acetonanwendung soll nach ihm die elektive Färbung der Blutelemente erhalten bleiben. Ich habe die Schridde sehe Modiükation nachgeprüft und habe ge- funden, daß das Aceton, da es in der Tat fast gar keinen Farbstoff extrahiert, bei schwer färbbaren Objekten, z.B. bei Schnitten de- kalzinierter Knochen usw., manchmal vorteilhaft ist. In der Regel hat aber die Acetonbehandlung direkt eine ungünstige Wirkung, da infolge des Ausfallens des Extraktionsprozesses das GeAvebe , selbst nach kurzer , -^/g- bis einstündiger Färbungsdauer , mehr diffus und gleichmäßig gefärbt erscheint. Nach längerer Färbung, nach 6 Stun- den, ist die Anwendung des Acetons überhaupt unmöglich , weil die Präparate dann einen ganz undurchsichtigen, schmutzigblauen Ton erhalten. In manchen Fällen, z. B. bei jungen Amphibienlarven oder Selachierembryonen ist die oben geschilderte ursprüngliche Zusammen- setzung der NocHTSchen Eosin -Azurmischung ungünstig, weil die Schnitte vom Eosin fast gar nichts behalten und selbst das Hämo- globin grünlichblau erscheint. In diesem Fall ist es zweckmäßig. Eosin und Azur in einem anderen Verhältnis zu mischen : man nimmt 16 cc Eosin, 80 cc Wasser und nur 8 cc Azur. Die übrige Be- handlung bleibt dieselbe. In der Eosin-Azurlösung nach Nocht bilden sich während der Färbung , wie auch in den anderen ähnlichen Lösungen , Nieder- schläge. Sie bleiben jedoch an den Schnitten nicht haften; selbst- verständlich müssen die Objektträger in der Lösung aufrecht stehen. Wenn man feuchte Deckglaspräparate färbt, so muß man sie mit der Gewebsschicht nach unten auf der Flüssigkeit schwimmen lassen. Die DojiiNicische Eosin- Orange -Toluidinblaufärbung gebrauche ich in der Weise, daß ich mir wieder zwei Stammlösungen herstelle ; die eine besteht aus 0*25 Eosin w. G. und 0'3 Orange G in 50 cc Wasser; die andere aus 0*25 Toluidinblau in 50 cc Wasser. Hier werden die Lösungen aber nicht vermischt, sondern sie werden nach- einander angewandt. Zuerst kommen die Präparate in die Eosin- XXVI, 2. Maxiraow: Cytologische u. hiätogenetische Untersuchungen. 189 Orangelösung für 20 bis 30 Minuten ; dann folgt kurzes Auswaschen in 60prozentigem Alkohol und Färbung in der Toluidinblaulösung während ^/^ bis 1 bis 2 Minuten. Dann wird mit 96prozentigem Alkohol differenziert , bis keine Farbstoffwolken mehr abgehen und Avie bei Eosin -Azur in Balsam eingeschlossen. Das Resultat der Färbung ist ähnlich wie nach Eosin- Azur, nur herrschen die vio- letten Töne vor. Eine sehr gute Modifikation dieser Methode, die noch viel farben- prächtigere Bilder liefert, hat Herr Kollege N. Tischutkix aus- gearbeitet; statt der eben angegebenen Eosin -Orangemischung ge- braucht man eine Mischung von 10 cc einer zur Hälfte (mit Wasser) verdünnten (filtrierten) konzentrierten wässerigen Lösung von Orange G und von 2 cc einer konzentrierten Lösung von Jodeosin in abso- lutem Alkohol. Bei Anwendung auf Schnitte und Deckglaspräparate steht die Doiiixicische Färbung der Eosin - Azurfärbung im allgemeinen doch nach, denn bei der letzteren erscheinen alle Gewebsbestandteile schärfer und elektiver gefärbt. Die Dominici- Färbung ist aber in manchen speziellen Fällen geradezu unersetzlich — nämlich dann, wenn es sich um Stücke von relativ dicken Gewebsmembraneu, z. B. der Dottersackwand, handelt, die nicht geschnitten und nicht an- geklebt werden , sondern von Anfang bis zu Ende frei , einzeln be- arbeitet werden. Hier gibt die Eosiu -Azurfärbung immer eine nur sehr undeutliche, verschwommene Färbung, und außerdem entstehen bei Anwesenheit großer Blutmengen in den Gefäßen störende kristal- linische Niederschläge. Nach der Eosin- Orange -Toluidinblaufärbung bieten hingegen solche Gewebsmembraneu äußerst klare und schöne Bilder, die ich in einer anderen Arbeit beschrieben habe (8). Was die Haltbarkeit der nach den beschriebenen Methoden be- handelten und gefärbten Präparate betriffst, so muß ich vor allem hervorheben , daß in dieser Beziehung das wichtigste die Qualität der Reagentien und vor allem des schließlich zur Anwendung kommen- den Xylols und des Balsams ist. Wenn es nicht die besten reinsten Marken sind (Xylol purissimum Kahlbaujl, Kanadabalsam rectificat. fest, neutral GRtJBLER) , dann kann man sicher erwarten , daß die Präparate in ein paar Monaten total abblassen , besonders wenn sie in einem hellen Räume aufbewahrt werden. Bei Beachtung der an- gegebenen Vorsichtsmaßregeln halten sie sich aber im allgemeinen ziemlich lange; ich besitze 2 bis 3 Jahre alte Schnittpräparate, die die ursprüngliche Färbung bis jetzt noch unverändert zeigen. Un- 190 Maximow: Cytologisehe u. histogenetische Untersuchungen. XXVI, 2. günstiger sind die Verhältnisse für die Deckglaspräparate. Trotz aller Vorsiclitsmaßregeln blassen sie meistens schon nach einem Jahre stark ab. Ebenso geht es augenscheinlich den dekalzinierten Prä- paraten und ferner Celloidinschnitten , die nicht angeklebt wurden, sondern frei geblieben und mit dem Celloidinmnntel gefärbt und ein- geschlossen sind. Icli wiederhole schließlich noch einmal, daß nach meiner Über- zeugung die beschriebenen Fixierungs-, Serienschnitt- und Färbungs- raethoden manchem Fachkollegen nicht nur bei speziell hämatologischen, sondern auch überhaupt bei verschiedenen histogenetischen Unter- suchungen am Wirbeltierembryo von Nutzen sein könnten. Literatur. 1) Dantschakoff , Zur Herstellung der Celloidinserien (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXV, 1908). 2) Helly, Eine Modifikation der Zenker sehen Fixierungsflüssigkeit (Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. Bd. XXI, 1904). 3) Helly, Zur Morphologie der Exsudatzellen usw. (Zieglers Bei- träge Bd. XXXVII, 1904). 4) JoLLY, Sur quelques points de l'etude des globules bhincs dans la leucemie etc. (Laboratoire d'histologie du College de France. Travaux de l'annee 1902—1903). 5) Marchand, Über die natürliche Fixierung von Blutpräparaten (Med. Gesellsch. zu Leipzig, 17. Dez. 1907; München, med. Wochenschr. 1908, No. 8, p. 423). 6) Maximow, A., Experimentelle Untersuchungen über entzündliehe Neubildung von Bindegewebe (Zieglers Beiträge, Suppl. V, Jena 1902). 7) Maximow, A. , Über die Zellformen des lockeren Bindegewebes (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXVH, 1906). 8) Maximow, A., Untersuchungen über Blut und Bindegewebe. 1. Die frühesten Entwicklungsstadien der Blut- und Bindegewebszellen beim Säuge- tierembryo usw. (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LXXIII, 1909). 9) NocHT, Artikel „Malariaplasmodien" in der Enzyklopädie der mikroskopischen Technik, 1903, p. 785. 10) RuBASCHKiN, Eine neue Methode zur Herstellung von Celloidin- serien (Anat. Anzeiger Bd. XXXI, 1907). 11) Schridde, Die Darstellung der Leukocytenkörnelungen im Gewebe (Zentralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XVI, No. 19). 12) Suzuki, Eine einfache Schnittserienmethode bei der Celloidineinbet- tung (Anat. Anzeiger Bd. XXXIV, 1909). [Eingegangen am 15. Juni 1909.] XXM, 2. Kittsteiner: Über die Einwiri